| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 引言 | 第11-24页 |
| 一、激活素的结构及分类 | 第11-12页 |
| 二、激活素的功能 | 第12-14页 |
| (一) 诱导早期胚胎中胚层形成 | 第12页 |
| (二) 在生殖系统中的作用 | 第12页 |
| (三) 在红细胞生成中的作用 | 第12-13页 |
| (四) 对胎盘功能的影响 | 第13页 |
| (五) 对肝细胞凋亡的影响 | 第13页 |
| (六) 对神经细胞分化的影响 | 第13页 |
| (七) 对免疫功能的调节作用 | 第13页 |
| (八) 对机体急性期反应的调节 | 第13-14页 |
| (九) 对创伤修复的影响 | 第14页 |
| 三、激活素信号转导途径中的信号分子 | 第14-15页 |
| (一) 受体 | 第14页 |
| (二) Smad蛋白 | 第14-15页 |
| 四、激活素信号的调节 | 第15-22页 |
| (一) 配体活性的调节 | 第15-17页 |
| (二) 受体活性的调节 | 第17-20页 |
| (三) Smad活性的调节 | 第20-21页 |
| (四) 其它途径对激活素信号的调节 | 第21页 |
| (五) 激活素的旁路信号途径 | 第21-22页 |
| 五、激活素与乳腺癌发生的相关性 | 第22页 |
| 六、本论文的研究内容和意义 | 第22-24页 |
| 第一部分 材料与方法 | 第24-34页 |
| 一、实验材料 | 第24-27页 |
| (一) 主要试剂及耗材 | 第24页 |
| (二) 质粒、菌株及细胞株 | 第24页 |
| (三) 组织标本 | 第24页 |
| (四) 实验动物 | 第24-25页 |
| (五) 实验试剂的配制 | 第25-27页 |
| (六) 实验仪器 | 第27页 |
| 二、实验方法 | 第27-34页 |
| (一) pHB-hARIP2原核表达载体的构建 | 第27-28页 |
| (二) 哺乳动物双杂交系统中重组载体的构建 | 第28页 |
| (三) pSilencer-hARIP2 siRNA表达载体的构建 | 第28-29页 |
| (四) hARIP2蛋白的原核表达与纯化 | 第29-30页 |
| (五) hARIP2蛋白多克隆抗体制备 | 第30页 |
| (六) 哺乳动物细胞双杂交实验分析hARIP2和ActRⅡ相互作用 | 第30-31页 |
| (七) 磷酸钙法瞬时转染293T细胞 | 第31页 |
| (八) Lipofectamine~(TM)2000转染乳腺癌细胞 | 第31页 |
| (九) 激活素应答性转录活性分析 | 第31页 |
| (十) 免疫印迹法检测hARIP2蛋白在乳腺癌细胞系中的表达 | 第31-32页 |
| (十一) MTT法检测hARIP2对肿瘤细胞增殖的影响 | 第32页 |
| (十二) 平板克隆形成实验 | 第32-33页 |
| (十三) 免疫细胞化学染色法检测肿瘤细胞中hARIP2的表达 | 第33页 |
| (十四) 免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中hARIP2的表达 | 第33页 |
| (十五) 统计学分析 | 第33-34页 |
| 第二部分 实验结果与分析 | 第34-48页 |
| 一、hARIP2基因克隆和序列分析 | 第34-35页 |
| 二、pHB-hARIP2原核表达载体的构建 | 第35-37页 |
| (一) hARIP2基因的钓取 | 第35-36页 |
| (二) pHB表达载体的制备 | 第36页 |
| (三) pHB-hARIP2重组质粒的构建 | 第36-37页 |
| 三、hARIP2蛋白的原核表达 | 第37页 |
| 四、hARIP2蛋白纯化、浓缩 | 第37-38页 |
| (一) hARIP2蛋白纯化 | 第37-38页 |
| (二) hARIP2蛋白浓缩 | 第38页 |
| 五、hARIP2蛋白多克隆抗体的制备及鉴定 | 第38-39页 |
| 六、hARIP2能够特异地与ActRIIs相互作用 | 第39-40页 |
| 七、hARIP2对激活素应答性转录活性的影响 | 第40页 |
| 八、免疫印迹分析hARIP2在乳腺癌细胞中的表达 | 第40-41页 |
| 九、hARIP2对肿瘤细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
| 十、hARIP2对乳腺癌细胞克隆形成能力的影响 | 第42-44页 |
| 十一、hARIP2在肿瘤细胞中的表达 | 第44页 |
| 十二、hARIP2在正常乳腺及乳腺癌组织中的表达 | 第44-48页 |
| 第三部分 讨论 | 第48-51页 |
| 第四部分 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64-65页 |
| 在学期间参与的科研项目 | 第65页 |
