摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
第一部分 研究背景 | 第8-19页 |
一、HEY1 简介 | 第8-12页 |
(一) Notch 信号通路 | 第8-11页 |
(二) HEY1 基因的调控研究进展 | 第11-12页 |
二、DNA 甲基化, PcG 蛋白复合物与真核生物基因的转录调控 | 第12-17页 |
(一) DNA 甲基化与真核生物基因的转录调控 | 第12-14页 |
(二) PcG(Polycomb group)蛋白复合物及其功能研究概述 | 第14-17页 |
三、本论文研究的内容及意义 | 第17-19页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第19-29页 |
一、实验材料 | 第19页 |
(一) 质粒 | 第19页 |
(二) 蛋白质和抗体 | 第19页 |
(三) 哺乳动物细胞系 | 第19页 |
(四) 试剂 | 第19页 |
二、实验方法 | 第19-29页 |
I. 分子生物学试验方法 | 第19-24页 |
(一) 分子克隆 | 第19-20页 |
(二) DNA 的琼脂糖电泳 | 第20页 |
(三) 质粒大量制备的方法 | 第20-22页 |
(四) 哺乳动物细胞总RNA 的提取 | 第22-23页 |
(五) 逆转录(Reverse Transcription, RT) | 第23页 |
(六) PCR 和荧光实时定量PCR (Real-time PCR) | 第23-24页 |
(七) RNA 干涉(RNAi) | 第24页 |
II. 细胞生物学实验方法 | 第24-29页 |
(一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第24-25页 |
(二) 细胞的药物刺激 | 第25页 |
(三) 真核生物细胞的瞬时转染 | 第25-26页 |
(四) 蛋白质的Western Blot 分析 | 第26-28页 |
(五) 流式细胞术 | 第28-29页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第29-34页 |
一、Polycomb 参与HEY1 基因的表达调控 | 第29-31页 |
(一) 前列腺癌细胞系中Polycomb 蛋白的表达与恶性程度相关 | 第29-30页 |
(二) 前列腺细胞系中HEY1 的表达情况与Polycomb 蛋白呈现负相关 | 第30页 |
(三) HEY1 是Polycomb 家族调控的靶基因 | 第30-31页 |
二、DNA 甲基化参与HEY1 基因的表达调控 | 第31-33页 |
三、HEY1 在 DU145 细胞周期进程中的影响 | 第33-34页 |
第四部分 讨论 | 第34-36页 |
第五部分 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第44页 |