| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 一、血管生成与肿瘤 | 第10-11页 |
| （一） 血管生成 | 第10页 |
| （二） 血管生成与肿瘤的关系 | 第10-11页 |
| 二、血管内皮生长因子的结构功能及与肿瘤的关系 | 第11-14页 |
| （一） 血管内皮生长因子 | 第11-12页 |
| （二） 血管内皮生长因子与肿瘤的关系 | 第12-13页 |
| （三） 血管内皮生长因子与肿瘤的治疗 | 第13-14页 |
| 三、RNA 干涉（RNA INTERFERENCE，RNAI） | 第14-17页 |
| （一） RNA 干涉现象的发现 | 第14-15页 |
| （二） RNAi 的作用机制 | 第15页 |
| （三） RNAi 技术在基因研究上的历史突破 | 第15页 |
| （四） RNAi 技术在肿瘤基因治疗中的应用 | 第15-17页 |
| 四、宫颈癌的研究进展 | 第17-20页 |
| （一） 宫颈癌简介 | 第17页 |
| （二） 血管内皮生长因子在宫颈癌中的表达及其作用 | 第17-18页 |
| （三） RNAi 在宫颈癌基因治疗中的应用 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-27页 |
| 一、实验材料 | 第20-21页 |
| （一） 实验材料 | 第20页 |
| （二） 主要仪器 | 第20-21页 |
| 二、实验方法 | 第21-27页 |
| （一） 哺乳动物细胞培养 | 第21页 |
| （二） 大量制备质粒的方法 | 第21-22页 |
| （三） 哺乳动物细胞电穿孔法转染 | 第22页 |
| （四） 瞬时转染 | 第22页 |
| （五） 稳定转染 | 第22页 |
| （六） 哺乳动物细胞总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| （七） 逆转录 PCR (RT-PCR) | 第23-24页 |
| （八） SDS-PAGE 电泳及Western Blotting | 第24-25页 |
| （九） 酶联免疫吸附实验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA） | 第25-26页 |
| （十） MTT 法 | 第26页 |
| （十一） 流式细胞仪检测细胞增殖 | 第26-27页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第27-36页 |
| 一、瞬时转染VEGF 干涉质粒 | 第27-30页 |
| （一） 质粒 | 第27-28页 |
| （二） 质粒的大量制备及酶切鉴定 | 第28-29页 |
| （三） RT-PCR 鉴定干涉质粒对VEGF 表达的干涉效果 | 第29-30页 |
| 二、稳定表达VEGF SIRNA 的细胞株的建立 | 第30-32页 |
| （一） 稳定转染细胞株的筛选 | 第30-31页 |
| （二） RT-PCR 鉴定 | 第31-32页 |
| 三、RNA 干涉对细胞 VEGF 表达的影响 | 第32-34页 |
| （一） RNAi 对细胞内VEGF mRNA 表达的影响 | 第32页 |
| （二） RNAi 对VEGF 蛋白表达的影响 | 第32-34页 |
| 四、靶向VEGF 的SIRNA 对细胞增殖的影响 | 第34-36页 |
| （一） MTT 法检测RNAi 对细胞增殖的影响 | 第34页 |
| （二） 流式细胞仪检测 RNAi 对细胞增殖的影响 | 第34-36页 |
| 讨论 | 第36-39页 |
| 一、VEGF 基因的干涉靶点确定 | 第36-37页 |
| 二、稳定转染细胞系的建立 | 第37-38页 |
| 三、靶向VEGF 的SIRNA 抑制细胞增殖的机制 | 第38-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第45页 |
