间接原位PCR检测GPV方法建立及GPV在实验感染雏鹅体侵染规律的研究
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 小鹅瘟病理学特征 | 第11-12页 |
| 2 小鹅瘟病毒生物学研究进展 | 第12-16页 |
| ·GPV一般生物学特征 | 第12页 |
| ·GPV分子生物学特征 | 第12-14页 |
| ·GPV基因结构 | 第12-13页 |
| ·GPV结构蛋白 | 第13-14页 |
| ·GPV非结构蛋白 | 第14页 |
| ·GPV分子生物学研究进展 | 第14-15页 |
| ·GPV常规检测方法 | 第15-16页 |
| 3 原位PCR技术 | 第16-18页 |
| ·原位PCR主要方法 | 第17-18页 |
| ·原位PER在病理学研究中的应用 | 第18页 |
| 4 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二 实验研究 | 第19-41页 |
| 1 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·材料 | 第19-24页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·毒株 | 第19页 |
| ·主要实验仪器 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·溶液配制 | 第20-24页 |
| ·动物实验设计 | 第24页 |
| ·实验动物分组 | 第24页 |
| ·实验材料的采集 | 第24页 |
| ·实验材料的固定 | 第24页 |
| ·间接原位PCR检测小鹅瘟病毒方法的建立 | 第24-31页 |
| ·引物及探针设计 | 第24-25页 |
| ·引物特异性实验 | 第25页 |
| ·探针特异性实验 | 第25-26页 |
| ·探针敏感性实验 | 第26页 |
| ·组织切片消化反应条件的优化 | 第26-27页 |
| ·探针浓度优化 | 第27页 |
| ·材料的预处理 | 第27-28页 |
| ·原位PCR扩增 | 第28页 |
| ·原位杂交 | 第28页 |
| ·杂交后洗涤 | 第28-29页 |
| ·杂交后显色 | 第29页 |
| ·结果判定 | 第29页 |
| ·间接原位PCR结果的验证 | 第29-31页 |
| 2 实验结果 | 第31-36页 |
| ·间接原位PCR反应条件的优化结果 | 第31-34页 |
| ·引物特异性实验结果 | 第31-32页 |
| ·探针特异性实验结果 | 第32页 |
| ·探针敏感性实验结果 | 第32-33页 |
| ·组织切片消化优化实验结果 | 第33页 |
| ·探针浓度优化实验结果 | 第33-34页 |
| ·间接原位PCR结果的验证结果 | 第34页 |
| ·间接原位PCR检测结果 | 第34-36页 |
| ·攻毒组检测结果 | 第34-35页 |
| ·同居组检测结果 | 第35页 |
| ·对照组检测结果 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-41页 |
| ·间接原位PCR方法的建立和优化 | 第36-39页 |
| ·间接原位PCR方法的选择 | 第36页 |
| ·组织切片优化 | 第36-37页 |
| ·引物和探针优化 | 第37-38页 |
| ·反应条件优化 | 第38-39页 |
| ·小鹅瘟病毒在小鹅体内动态分布规律的探讨 | 第39-40页 |
| ·间接原位PCR技术的优势、存在问题及展望 | 第40-41页 |
| 第三部分 结论 | 第41-42页 |
| 第四部分 参考文献 | 第42-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附录 | 第48-58页 |
