| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 文献综述 | 第12-45页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 | 第12-27页 |
| ·病原 | 第14-27页 |
| ·PRRSV 理化特性 | 第15页 |
| ·PRRSV 生物学特性 | 第15-16页 |
| ·PRRSV 的遗传变异 | 第16-17页 |
| ·PRRSV 基因组结构基因及编码的结构蛋白 | 第17-22页 |
| ·PRRSV 基因组非编码区 | 第22页 |
| ·PRRSV 非结构蛋白的编码与功能 | 第22-23页 |
| ·PRRSV 诊断技术研究进展 | 第23-27页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机制、疫苗研究进展及反向遗传学在动脉炎病毒研究中的应用 | 第27-45页 |
| ·PRRSV 免疫学及致病机制 | 第27-33页 |
| ·体液免疫 | 第27-29页 |
| ·细胞免疫 | 第29-33页 |
| ·PRRS 疫苗研究进展 | 第33-39页 |
| ·弱毒疫苗和灭活疫苗 | 第34-35页 |
| ·重组杆状病毒表达系统 | 第35-36页 |
| ·重组冠状病毒表达系统 | 第36页 |
| ·酵母表达系统 | 第36页 |
| ·大肠埃希菌表达系统 | 第36-37页 |
| ·BCG 表达系统 | 第37页 |
| ·伪狂犬病病毒（PRV）载体 | 第37页 |
| ·基因疫苗 | 第37-38页 |
| ·重组腺病毒载体 | 第38-39页 |
| ·反向遗传学技术在动脉炎病毒中的应用 | 第39-45页 |
| ·在病毒基因组结构与基因功能研究中的应用 | 第39-41页 |
| ·在研究病毒分子致病机理研究中的应用 | 第41-42页 |
| ·在病毒载体研究中的应用 | 第42-44页 |
| ·在新型疫苗研究中的应用 | 第44-45页 |
| 试验研究 | 第45-106页 |
| 第三章 PRRSV HN-08 株分离鉴定及生物学特性研究 | 第45-61页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·病料来源 | 第45页 |
| ·细胞、菌株及载体 | 第45页 |
| ·参考毒株及血清 | 第45-46页 |
| ·试验用猪 | 第46页 |
| ·抗原、抗体检测试剂盒 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-51页 |
| ·病料处理 | 第46页 |
| ·病毒分离 | 第46页 |
| ·分离病毒的PCR 鉴定 | 第46-49页 |
| ·分离病毒生物学特性鉴定 | 第49-51页 |
| ·结果 | 第51-58页 |
| ·病毒分离结果 | 第51-52页 |
| ·HN-08 株病毒PCR 鉴定结果 | 第52页 |
| ·HN-08 株病毒生物学特性 | 第52-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·关于PRRSV 形态特征的讨论 | 第58-59页 |
| ·关于PRRSV 对细胞嗜性的讨论 | 第59页 |
| ·关于PRRSV 对猪的致病性的讨论 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第四章 中国部分地区 2005—2008 年 PRRSV 分离株 ORF5 基因和 Nsp2 基因遗传变异分析 | 第61-76页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·病料来源 | 第62页 |
| ·细胞 | 第62页 |
| ·载体及菌种 | 第62页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第62-63页 |
| ·主要仪器 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-66页 |
| ·引物设计 | 第63页 |
| ·病毒增殖 | 第63页 |
| ·病毒总RNA 提取 | 第63-64页 |
| ·PRRSV 分离株 ORF5 基因 RT-PCR | 第64页 |
| ·PRRSV 分离株 Nsp2 基因 RT-PCR | 第64页 |
| ·RT-PCR 产物的纯化回收 | 第64-65页 |
| ·RT-PCR 产物与T 载体连接 | 第65页 |
| ·转化 | 第65页 |
| ·重组质粒的提取 | 第65页 |
| ·PRRSV 分离株ORF5、Nsp2 基因重组质粒的鉴定 | 第65页 |
| ·PRRSV 分离株ORF5、Nsp2 基因序列测定 | 第65页 |
| ·PRRSV 分离株ORF5 基因核苷酸序列及推导氨基酸序列分析 | 第65-66页 |
| ·PRRSV 分离株Nsp2 基因核苷酸序列及推导氨基酸序列分析 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-72页 |
| ·病毒分离 | 第66页 |
| ·各分离毒株ORF5、 Nsp2 基因扩增结果 | 第66页 |
| ·各分离毒株ORF5、Nsp2 基因重组质粒鉴定结果 | 第66-67页 |
| ·分离株型的测定结果 | 第67-68页 |
| ·分离株ORF5 基因核苷酸序列及推导氨基酸序列分析 | 第68-70页 |
| ·分离株与现地使用疫苗的亲缘关系 | 第70页 |
| ·分离株Nsp2 基因核苷酸序列及推导氨基酸分析 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| ·对病毒分离过程的讨论 | 第72-73页 |
| ·对PRRSV ORF5 基因遗传变异的分析 | 第73-74页 |
| ·对PRRSV Nsp2 基因遗传变异的分析 | 第74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第五章 PRRSV HN-08 株全基因组序列测定及分析 | 第76-92页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·细胞及毒株 | 第76页 |
| ·菌种、载体 | 第76页 |
| ·主要仪器 | 第76-77页 |
| ·主要试剂及培养基的配制 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-80页 |
| ·引物设计 | 第77页 |
| ·病毒总RNA 的提取 | 第77页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第77-78页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第78页 |
| ·回收产物的连接 | 第78-79页 |
| ·连接产物的转化 | 第79页 |
| ·重组质粒的提取 | 第79页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第79页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第79页 |
| ·重组质粒的序列测定与分析 | 第79页 |
| ·基因组结构分析 | 第79-80页 |
| ·基因组系统进化分析 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-90页 |
| ·HN-08 株全基因的 RT-PCR 扩增 | 第80页 |
| ·HN-08 株序列分析 | 第80-90页 |
| ·讨论 | 第90-91页 |
| ·小结 | 第91-92页 |
| 第六章 猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒HN-08 株体内拯救系统的初步研究 | 第92-106页 |
| ·材料 | 第92-93页 |
| ·病毒 | 第92-93页 |
| ·细胞、菌株及载体 | 第93页 |
| ·主要试剂 | 第93页 |
| ·主要仪器 | 第93页 |
| ·方法 | 第93-99页 |
| ·PRRSV HN-08 株基因组片段的扩增 | 第93-96页 |
| ·HN-08 株病毒基因组全长cDNA 组装 | 第96-98页 |
| ·转染Marc-145 细胞 | 第98-99页 |
| ·拯救病毒的鉴定 | 第99页 |
| ·结果 | 第99-102页 |
| ·PRRSV HN-08 株基因组序列的扩增结果 | 第99页 |
| ·A、B、C、D 四个片段连至相应载体酶切鉴定结果 | 第99页 |
| ·pPⅠT7PⅡ-HN08 质粒序列测定结果 | 第99-102页 |
| ·拯救病毒的鉴定结果 | 第102页 |
| ·讨论 | 第102-106页 |
| ·pPⅠT7PⅡ-HN08 克隆没有感染性的可能原因 | 第102-104页 |
| ·今后拟采取的改进措施 | 第104-106页 |
| 结论 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
| 作者简介 | 第121页 |
