中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
前言 | 第8-10页 |
材料与方法 | 第10-28页 |
1 材料 | 第10-16页 |
·原代人脐静脉内皮细胞 | 第10页 |
·抗体 | 第10页 |
·培养基、试剂盒、和主要试剂 | 第10-11页 |
·主要溶液的配制 | 第11-14页 |
·引物序列和siRNA序列 | 第14-15页 |
·耗材 | 第15页 |
·主要仪器设备 | 第15-16页 |
2 实验方法 | 第16-28页 |
·原代人脐静脉内皮细胞的复苏、传代培养、和冻存 | 第16-17页 |
·细胞的处理和分组 | 第17-18页 |
·人脐静脉内皮细胞的siRNA转染 | 第18页 |
·单层内皮细胞通透性的检测 | 第18页 |
·内皮细胞肌动蛋白骨架和细胞核的染色 | 第18-19页 |
·单层内皮细胞间隙的测量 | 第19页 |
·细胞凋亡的检测 | 第19-20页 |
·RT-PCR检测基因的表达量 | 第20-23页 |
·Western blot检测蛋白的表达量 | 第23-26页 |
·统计学分析 | 第26-28页 |
实验结果 | 第28-42页 |
1 亚低温缓解TNF-α引起的单层内皮细胞通透性增加、肌动蛋白骨架重排、和细胞凋亡 | 第28-30页 |
2 亚低温抑制TNF-α引起的p38 MAPK和JNK信号通路的激活 | 第30-32页 |
3 亚低温通过抑制p38 MAPK/HSP27信号通路缓解TNF-α引起的单层内皮细胞通透性增加和肌动蛋白骨架重排 | 第32-34页 |
4 亚低温通过抑制p38 MAPK和JNK信号通路缓解TNF-α引起的内皮细胞凋亡 | 第34-37页 |
5 亚低温诱导MKP-1的表达 | 第37-39页 |
6 沉默MKP-1的表达破坏亚低温对p38 MAPK和JNK激酶活性的抑制作用 | 第39页 |
7 沉默MKP-1的表达破坏亚低温对TNF-α引起的内皮炎症反应的保护作用 | 第39-42页 |
讨论 | 第42-47页 |
总结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录 | 第53-95页 |
1 英文名词及缩写 | 第53-55页 |
2 发表的文章 | 第55-65页 |
3 综述 | 第65-94页 |
4 致谢 | 第94-95页 |