| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·本课题研究意义 | 第8-9页 |
| ·国内外研究概况 | 第9-12页 |
| ·西红柿中GAST family 的组织分布及生物功能 | 第9页 |
| ·拟兰芥中GASA family 的组织分布及生物功能 | 第9-10页 |
| ·矮牵牛花中GIP family 的组织分布及生物功能 | 第10-11页 |
| ·其他物种中类GIP 蛋白的组织分布及生物功能 | 第11-12页 |
| ·本课题的研究内容 | 第12-16页 |
| 第二章 重组质粒的构建及融合蛋白的表达和纯化 | 第16-35页 |
| ·实验材料 | 第16-19页 |
| ·菌株和载体 | 第16页 |
| ·引物 | 第16页 |
| ·主要仪器和设备 | 第16-17页 |
| ·主要试剂及溶液 | 第17-19页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要溶液及配制 | 第17-19页 |
| ·实验方法 | 第19-27页 |
| ·聚合酶链反应(PCR)及扩增产物的胶回收 | 第19-21页 |
| ·胶回收纯化产物和载体的酶切 | 第21页 |
| ·酶切片段连接反应 | 第21页 |
| ·转化 | 第21-22页 |
| ·转化 | 第21-22页 |
| ·菌落PCR | 第22页 |
| ·质粒的抽提 | 第22-23页 |
| ·转化 | 第23页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第23页 |
| ·蛋白质凝胶电泳SDS-PAGE | 第23-24页 |
| ·W estern-blot 鉴定 | 第24-25页 |
| ·GASA 的细胞定位 | 第25页 |
| ·游离细胞收集固定 | 第25页 |
| ·电镜 | 第25页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| ·细胞超声破碎 | 第25-26页 |
| ·His-tag 亲和层析纯化 | 第26页 |
| ·Sephadex 纯化 | 第26页 |
| ·bradford 法蛋白浓度的测定 | 第26-27页 |
| ·标准曲线制作 | 第26页 |
| ·样品中蛋白质浓度的测定 | 第26-27页 |
| ·实验结果 | 第27-35页 |
| ·构建重组质粒的PCR 结果 | 第27-29页 |
| ·蛋白质凝胶电泳SDS-PAGE | 第29-30页 |
| ·蛋白的可溶性分析及western-blot 鉴定 | 第30-31页 |
| ·电镜 | 第31-32页 |
| ·融合蛋白纯化 | 第32-33页 |
| ·His-tag 亲和层析纯化结果 | 第32-33页 |
| ·Sephadex 纯化结果 | 第33页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第33-35页 |
| 第三章 讨论与展望 | 第35-39页 |
| ·实验讨论 | 第35-37页 |
| ·重组质粒构建及诱导表达 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白细胞定位及纯化 | 第36-37页 |
| ·实验展望 | 第37-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 攻硕期间取得的研究成果 | 第45-46页 |
