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布鲁氏菌VirB4蛋白与宿主胚胎滋养细胞相互作用的研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-8页
目录第8-10页
英文缩略词表第10-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述 布鲁氏菌研究进展第12-23页
 1 布鲁氏菌的病原学特征第12-13页
 2 布鲁氏菌的流行现状第13-14页
 3 布鲁氏菌的致病性第14页
 4 Ⅳ型分泌系统第14-15页
 5 研究现状第15-17页
   ·布菌侵染滋养细胞过程第15-16页
   ·virB4毒力因子的研究第16页
   ·疫苗株RB51和S19研究背景第16-17页
 参考文献第17-23页
第二章 试验研究第23-69页
 实验一 新疆布鲁氏菌病血清学检测第23-27页
  1 料与方法第23-24页
   ·材料第23页
   ·方法第23-24页
  2 结果第24-25页
   ·羊布氏杆菌病血清抗体检测第24页
   ·牛布氏杆菌病血清抗体检测第24-25页
  3 讨论第25-26页
  参考文献第26-27页
 实验二 布鲁氏菌侵染牛胚胎滋养细胞cDNA文库的构建第27-39页
  1 材料与方法第27-33页
   ·材料第27-28页
   ·方法第28-33页
  2 结果第33-36页
   ·细胞形态观察第33页
   ·免疫细胞化学染色结果第33-34页
   ·RB51侵染滋养层细胞第34页
   ·总RNA纯度及完整性分析第34-35页
   ·ds cDNA琼脂糖凝胶电泳第35页
   ·文库质粒DNA的鉴定第35页
   ·cDNA文库污染的检测第35页
   ·文库质粒DNA评价第35-36页
  3 讨论第36-37页
  参考文献第37-39页
 实验三 布鲁氏菌virB4基因酵母表达载体的构建第39-51页
  1 材料与方法第39-45页
   ·材料第39-40页
   ·方法第40-45页
  2 结果第45-48页
   ·virB4基因的PCR扩增第45-46页
   ·virB4基因的克隆及酶切鉴定和序列分析第46页
   ·pGBKT7-lam双酶切结果第46-47页
   ·pGBKT7-virB4的PCR和酶切鉴定第47页
   ·转化子Y187的鉴定第47-48页
   ·自激活检测和毒性检测第48页
  3 讨论第48-49页
  参考文献第49-51页
 实验四 利用酵母双杂交系统筛选与VirB4相互作用的滋养层细胞靶蛋白第51-59页
  1 材料与方法第52-54页
   ·材料第52页
   ·方法第52-54页
  2 结果第54-56页
   ·阳性对照结果第54页
   ·阴性对照结果第54页
   ·VirB4诱饵蛋白X-a-Gal筛选第54-55页
   ·virB4诱饵蛋白基因捕获得prey蛋白基因的PCR鉴定第55页
   ·VirB4诱饵蛋白基因捕获prey蛋白基因的序列分析第55-56页
  3 讨论第56-57页
  参考文献第57-59页
 实验五 特异结合蛋白辅酶Q10和SLC3A2的mRNA表达检测第59-69页
  1 材料与方法第60-64页
   ·材料第60页
   ·方法第60-64页
  2 结果第64-67页
   ·质粒标准品的制备第64页
   ·标准曲线的生成第64-66页
   ·样品检测结果第66-67页
  3 讨论第67-68页
  参考文献第68-69页
结论第69-70页
创新点第70-71页
附录第71-72页
致谢第72-73页
作者简介第73-74页
附件第74页

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