| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-31页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第12页 |
| ·PRRS 的危害及流行病学 | 第12-13页 |
| ·PRRSV 的病原特性 | 第13-14页 |
| ·PRRSV 的分类 | 第13页 |
| ·PRRSV 的一般特性 | 第13-14页 |
| ·PRRSV 的培养特性 | 第14页 |
| ·PRRSV 的分子生物学研究进展 | 第14-19页 |
| ·PRRSV 的基因组结构 | 第14-15页 |
| ·PRRSV 基因组编码的蛋白 | 第15-19页 |
| ·PRRSV 的免疫学研究进展 | 第19-22页 |
| ·PRRSV 的体液免疫研究 | 第19-21页 |
| ·PRRSV 的细胞免疫研究 | 第21-22页 |
| ·PRRSV 的免疫调节和免疫逃避 | 第22页 |
| ·PRRS 的疫苗研究进展 | 第22-30页 |
| ·PRRS 的常规疫苗 | 第23-24页 |
| ·PRRS 的新型疫苗 | 第24-26页 |
| ·免疫佐剂 | 第26-30页 |
| ·研究的目的与意义 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-48页 |
| ·试验材料 | 第31-32页 |
| ·质粒、工程菌、细胞株 | 第31页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒 | 第31页 |
| ·主要生化试剂 | 第31-32页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-47页 |
| ·PRRSV ORF5 基因、pIL-15 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建 | 第32-37页 |
| ·pIL-15 原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pGEX-6p-pIL-15-48 和pGEX-6p-pIL-15-29 的诱导表达及纯化 | 第38-39页 |
| ·抗pIL-15 多克隆抗体的制备及鉴定 | 第39-40页 |
| ·pVAX1-pIL-15和pVAX1-PRRSV ORF5重组质粒体外瞬时表达及其表达产物的检测 | 第40-42页 |
| ·pVAX1-pIL-15和pVAX1-PRRSV ORF5重组质粒在小鼠体内的应用及其免疫效果的检测 | 第42-47页 |
| ·数据处理 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-63页 |
| ·PRRSV ORF5 基因及pIL-15 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建及鉴定 | 第48-50页 |
| ·PRRSV ORF5 重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第48-49页 |
| ·pIL-15 重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第49-50页 |
| ·pGEX-6p-pIL-15-48 和pGEX-6p-pIL-15-29 重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第50-52页 |
| ·pGEX-6p-pIL-15-48 和pGEX-6p-pIL-15-29 重组蛋白的诱导表达 | 第50-51页 |
| ·pGEX-6p-pIL-15-48 重组蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| ·抗pIL-15 多克隆抗体的制备及鉴定 | 第52页 |
| ·酶联免疫吸附实验（ELISA）检测多抗效价 | 第52页 |
| ·真核表达质粒体外转染及其表达产物的检测 | 第52-54页 |
| ·PRRSV ORF5 基因真核表达质粒体外转染及其表达产物的检测 | 第52-53页 |
| ·pIL-15 基因真核表达质粒体外转染及其表达产物的检测 | 第53-54页 |
| ·小鼠脾脏及外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第54-56页 |
| ·小鼠脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第54页 |
| ·小鼠外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第54-56页 |
| ·小鼠脾脏及外周血不同亚型T 淋巴细胞动态变化 | 第56-59页 |
| ·小鼠脾脏及外周血CD4~+T 淋巴细胞动态变化 | 第56-57页 |
| ·小鼠脾脏及血液 CD8~+T 淋巴细胞动态变化 | 第57-59页 |
| ·小鼠外周血抗 PRRSV ORF5 IgG 抗体含量动态变化 | 第59-60页 |
| ·小鼠外周血 IFN-γ 的检测 | 第60-61页 |
| ·PRRSV-ORF5 在小鼠体内动态分布的检测 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-72页 |
| ·PRRSV ORF5 和 pIL-15 的重组质粒联合免疫设计 | 第63-64页 |
| ·真核表达载体的选择 | 第64页 |
| ·pIL-15 原核表达载体的构建及其在原核细菌中的表达 | 第64-65页 |
| ·细胞因子对DNA 疫苗的佐剂效应及其接种剂量对免疫效果的影响 | 第65-66页 |
| ·细胞因子对DNA 疫苗的佐剂效应 | 第65-66页 |
| ·细胞因子接种剂量对免疫效果的影响 | 第66页 |
| ·真核载体表达质粒体外瞬时转染结果分析 | 第66-67页 |
| ·小鼠免疫pVAX1-PRRSV ORF5 与pVAX1-pIL-15 基因疫苗后脾脏和外周血T 淋巴细胞转化效果 | 第67-68页 |
| ·小鼠免疫 pVAX1-PRRSV ORF5 与 pVAX1-pIL-15 基因疫苗后脾脏和外周血 CD4~+和 CD8~+淋巴细胞数量的动态变化 | 第68-69页 |
| ·小鼠免疫pVAX1-PRRSV ORF5 与pVAX1-pIL-15 基因疫苗后抗PRRSV ORF5 IgG 抗体含量动态变化 | 第69页 |
| ·小鼠免疫pVAX1-PRRSV ORF5 与pVAX1-pIL-15 基因疫苗后IFN-γ的动态变化分析 | 第69-70页 |
| ·小鼠免疫pVAX1-PRRSV ORF5 与pVAX1-pIL-15 基因疫苗后PRRSV-ORF5 基因在小鼠体内动态分布的分析 | 第70-72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
