| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-40页 |
| ·晚疫病概述 | 第15-17页 |
| ·病原菌特性 | 第15-16页 |
| ·晚疫病症状 | 第16-17页 |
| ·晚疫病的危害及防治 | 第17页 |
| ·植物的抗性机制 | 第17-19页 |
| ·非专化抗性 | 第18-19页 |
| ·专化抗性 | 第19页 |
| ·马铃薯晚疫病抗性机制 | 第19-25页 |
| ·以R基因介导的垂直抗性 | 第20-23页 |
| ·水平抗性 | 第23-25页 |
| ·病程相关蛋白基因研究概况 | 第25-29页 |
| ·病程相关蛋白与植物系统获得抗性和诱导系统抗性的关系 | 第26-27页 |
| ·病程相关蛋白基因的分类 | 第27页 |
| ·PR蛋白的分泌与分布 | 第27-28页 |
| ·病程相关蛋白PR-17家族成员的研究进展 | 第28-29页 |
| ·植物基因功能研究策略 | 第29-38页 |
| ·基因功能缺失的方法 | 第30-36页 |
| ·超量表达目的基因的方法 | 第36-38页 |
| ·本研究的目的、意义和主要内容 | 第38-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-47页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·病原菌繁育及离体叶片接种鉴定 | 第40-41页 |
| ·黑麦培养基繁育法 | 第40-41页 |
| ·块茎薄片繁育法 | 第41页 |
| ·离体叶片接种晚疫病原菌 | 第41页 |
| ·大肠杆菌及农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第41-42页 |
| ·瞬时超量表达体系及病毒介导的基因沉默体系的配制 | 第42-43页 |
| ·实验所用试剂的配制方法 | 第42页 |
| ·农杆菌悬浮液的配制及叶片注射 | 第42-43页 |
| ·农杆菌介导的马铃薯试管薯的遗传转化及转基因株系的鉴定 | 第43-47页 |
| ·杆菌介导的马铃薯试管薯的遗传转化方法 | 第43页 |
| ·基因组DNA抽提 | 第43-45页 |
| ·总RNA抽提及mRNA分离 | 第45-47页 |
| 第三章 初步验证StPRp27和POTHR-1基因功能 | 第47-57页 |
| ·前言 | 第47页 |
| ·材料和方法 | 第47-50页 |
| ·植物材料及晚疫病生理小种 | 第47-48页 |
| ·质粒和菌株 | 第48页 |
| ·载体构建 | 第48-49页 |
| ·瞬时超量表达StPRp27和POTHR-1基因及晚疫病菌接种鉴定 | 第49-50页 |
| ·瞬时超量表达叶片中StPRp27和POTHR-1基因表达情况检测 | 第50页 |
| ·病情调查 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-55页 |
| ·镜检晚疫病菌生长活力 | 第50-51页 |
| ·pENTR-StPRp27和pENTR-POTHR-1载体构建 | 第51-52页 |
| ·pK7WG2-StPRp27和pK7WG2-POTHR-1载体构建 | 第52-53页 |
| ·瞬时超量表达叶片中StPRp27和POTHR-1基因的表达情况 | 第53页 |
| ·晚疫病原菌抗性鉴定结果 | 第53-55页 |
| ·结语 | 第55-57页 |
| 第四章 StPRp27和POTHR-1基因与R(Rpi-blbl,Rpi-blb2)基因介导抗性的关系 | 第57-70页 |
| ·前言 | 第57页 |
| ·材料和方法 | 第57-60页 |
| ·植物材料以及晚疫病生理小种 | 第57-58页 |
| ·质粒和菌株 | 第58页 |
| ·载体构建 | 第58-59页 |
| ·TRV病毒载体侵染转基因本氏烟草及马铃薯野生种 | 第59页 |
| ·晚疫病菌的接种鉴定及病情监测 | 第59页 |
| ·R基因与Avr基因的识别反应 | 第59-60页 |
| ·基因沉默后接种病原菌的叶片中基因表达情况检测 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-68页 |
| ·TRV2-StPRp27和TRV2-POTHR-1载体构建 | 第60-62页 |
| ·TRV-PDS病毒载体侵染本氏烟草和马铃薯野生种 | 第62-63页 |
| ·病原菌接种叶片后StPRp27和POTHR-1基因表达情况检测 | 第63-64页 |
| ·StPRp27和POTHR-1与R(Rpi-blb1,Rpi-blb2)基因介导抗性的关系 | 第64-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第五章 StPRp27基因在马铃薯植株上进行功能确证 | 第70-81页 |
| ·前言 | 第70页 |
| ·材料和方法 | 第70-74页 |
| ·植物材料 | 第70页 |
| ·菌株和质粒 | 第70-71页 |
| ·表达载体的构建 | 第71-73页 |
| ·马铃薯的转化、再生和筛选 | 第73页 |
| ·转基因植株的检测及Southern检测 | 第73-74页 |
| ·转基因植株的接种鉴定及统计分析 | 第74页 |
| ·转基因植株中StPRp27基因的表达检测 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-80页 |
| ·干涉载体的构建 | 第74-75页 |
| ·转基因马铃薯植株的获得及Southern检测结果 | 第75-77页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测及晚疫病抗性鉴定 | 第77-80页 |
| ·结语 | 第80-81页 |
| 第六章 StPRp27基因的作用机理 | 第81-99页 |
| ·前言 | 第81页 |
| ·材料与方法 | 第81-86页 |
| ·StPRp27同源序列的搜索及蛋白质序列的多重序列比对 | 第81页 |
| ·StPRp27的原核表达 | 第81-83页 |
| ·StPRp27亚细胞定位 | 第83-85页 |
| ·StPRp27和POTHR-1基因的基因组定位 | 第85-86页 |
| ·结果与分析 | 第86-97页 |
| ·StPRp27编码蛋白质的预测和分析 | 第86-87页 |
| ·StPRp27基因的原核表达及对晚疫病孢子囊萌发的影响 | 第87-91页 |
| ·StPRp27基因的亚细胞定位 | 第91-93页 |
| ·StPRp27和POTHR-1全长基因的克隆及染色体定位结果 | 第93-97页 |
| ·小结 | 第97-99页 |
| 第七章 总讨论 | 第99-103页 |
| ·StPRp27在马铃薯晚疫病抗病反应过程中的作用 | 第99-100页 |
| ·POTHR-1在抗病反应过程中的作用 | 第100-102页 |
| ·不足与展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-121页 |
| 附录 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
