| 摘要 | 第14-18页 |
| Abstract | 第18-23页 |
| 缩写词表 | 第24-26页 |
| 第一部分 唾液酸乳糖摄入对新生仔猪神经发育和认知功能的影响 | 第26-131页 |
| 第一章 前言 | 第26-58页 |
| 1.1 母乳与脑发育 | 第26-29页 |
| 1.1.1 脑发育的概况 | 第26-27页 |
| 1.1.2 母乳的营养特点 | 第27-29页 |
| 1.1.3 母乳喂养与脑发育 | 第29页 |
| 1.2 唾液酸乳糖和唾液酸 | 第29-37页 |
| 1.2.1 唾液酸乳糖和唾液酸的结构 | 第30-31页 |
| 1.2.2 唾液酸在自然界和人体中的分布 | 第31-32页 |
| 1.2.3 唾液酸乳糖和唾液酸在母乳和配方奶中的含量 | 第32-33页 |
| 1.2.4 唾液酸乳糖和唾液酸的消化、吸收及代谢 | 第33-35页 |
| 1.2.5 唾液酸乳糖对肠道发育和免疫功能的影响 | 第35-36页 |
| 1.2.6 唾液酸可以促进大脑发育,提高学习和记忆能力 | 第36-37页 |
| 1.3 猪作为动物模型在生物行为中的应用 | 第37-46页 |
| 1.3.1 猪在神经科学领域的应用的可行性及优势 | 第37-39页 |
| 1.3.2 猪的行为学实验的研究 | 第39-46页 |
| 1.4 学习和记忆的研究现状 | 第46-50页 |
| 1.4.1 学习与记忆的概念 | 第46页 |
| 1.4.2 学习与记忆的分类 | 第46-50页 |
| 1.4.3 学习记忆与海马-前额叶神经回路 | 第50页 |
| 1.5 神经营养因子及其功能 | 第50-53页 |
| 1.5.1 神经生长因子(NGF) | 第51-52页 |
| 1.5.2 脑源性神经营养因子(BDNF) | 第52页 |
| 1.5.3 神经营养因子-3(NTF-3) | 第52-53页 |
| 1.6 CREB与记忆的研究进展 | 第53-57页 |
| 1.6.1 CREB的分子结构 | 第53-54页 |
| 1.6.2 CREB的调控机制 | 第54-55页 |
| 1.6.3 CREB与记忆 | 第55-57页 |
| 1.7 本课题的研究目的及意义 | 第57-58页 |
| 第二章 材料与方法 | 第58-79页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第58-61页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第58-59页 |
| 2.1.2 实验试剂与耗材 | 第59-61页 |
| 2.2 实验动物 | 第61-62页 |
| 2.2.1 唾液酸乳糖奶粉的制备 | 第61页 |
| 2.2.2 仔猪的饲养 | 第61-62页 |
| 2.3 八臂迷宫行为学训练及测试 | 第62-67页 |
| 2.3.1 八臂迷宫的适应 | 第63-64页 |
| 2.3.2 八臂迷宫训练及学习能力评估 | 第64-65页 |
| 2.3.3 八臂迷宫记忆测试 | 第65-67页 |
| 2.3.4 学习能力数据采集 | 第67页 |
| 2.4 标本收集 | 第67-68页 |
| 2.4.1 血液样本采集 | 第67-68页 |
| 2.4.2 组织样本采集 | 第68页 |
| 2.5 LC-MS/MS法测血液及脑组织中的唾液酸含量 | 第68-71页 |
| 2.5.1 红细胞膜唾液酸的提取 | 第68页 |
| 2.5.2 血浆中唾液酸的提取 | 第68-69页 |
| 2.5.3 海马和前额叶中唾液酸的提取 | 第69页 |
| 2.5.4 检测条件 | 第69-70页 |
| 2.5.5 标准曲线的绘制 | 第70页 |
| 2.5.6 最低检测限的测定 | 第70-71页 |
| 2.5.7 进样重复性试验 | 第71页 |
| 2.5.8 稳定性试验 | 第71页 |
| 2.5.9 精密度试验 | 第71页 |
| 2.5.10 加标回收率试验 | 第71页 |
| 2.6 PCR-array | 第71-76页 |
| 2.6.1 海马组织中总RNA的提取 | 第72-73页 |
| 2.6.2 总RNA浓度的测定 | 第73页 |
| 2.6.3 核糖体带RNA完整性的测定 | 第73-74页 |
| 2.6.4 cDNA合成 | 第74页 |
| 2.6.5 RT~2 Profiler PCR-arrays操作步骤 | 第74-75页 |
| 2.6.6 RT~2 Profiler PCR-arrays结果分析 | 第75-76页 |
| 2.7 蛋白表达 | 第76-78页 |
| 2.7.1 蛋白提取 | 第76页 |
| 2.7.2 蛋白浓度测定 | 第76-77页 |
| 2.7.3 Western blot | 第77-78页 |
| 2.7.4 ELISA | 第78页 |
| 2.8 统计分析 | 第78-79页 |
| 第三章 结果与分析 | 第79-122页 |
| 3.1 唾液酸乳糖对仔猪体重与脑重的影响 | 第79-82页 |
| 3.1.1 唾液酸乳糖摄入对仔猪体重的影响 | 第79-81页 |
| 3.1.2 唾液酸乳糖摄入对仔猪脑重的影响 | 第81-82页 |
| 3.2 仔猪应激激素的检测结果 | 第82-83页 |
| 3.3 血液及脑组织中唾液酸的含量 | 第83-95页 |
| 3.3.1 质谱条件的优化 | 第83-86页 |
| 3.3.2 LC-MS/MS方法的评价 | 第86-88页 |
| 3.3.3 血浆中总唾液酸的含量 | 第88-89页 |
| 3.3.4 血红细胞膜结合唾液酸的含量 | 第89-91页 |
| 3.3.5 海马组织中唾液酸含量的表达 | 第91-93页 |
| 3.3.6 前额叶中唾液酸的含量 | 第93-95页 |
| 3.4 唾液酸乳糖摄入对仔猪学习记忆能力及机制的影响 | 第95-122页 |
| 3.4.1 八臂迷宫实验的结果分析 | 第95-108页 |
| 3.4.2 PCR-array结果分析 | 第108-113页 |
| 3.4.3 唾液酸乳糖对仔猪海马中slit2蛋白表达的影响 | 第113-114页 |
| 3.4.4 唾液酸乳糖对NTF-3、及其受体和下游通路的影响 | 第114-122页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第122-131页 |
| 4.1 唾液酸乳糖对新生仔猪脑发育及认知功能的影响的研究 | 第122-129页 |
| 4.1.1 唾液酸乳糖对仔猪激素水平的影响 | 第122-123页 |
| 4.1.2 唾液酸乳糖对血液和脑组织中唾液酸表达水平的影响 | 第123-124页 |
| 4.1.3 唾液酸乳糖对仔猪学习和记忆能力的影响 | 第124-126页 |
| 4.1.4 唾液酸乳糖对神经发育信号通路的影响 | 第126-128页 |
| 4.1.5 唾液酸乳糖对仔猪海马区NTF-3、及其受体和下游蛋白的影响 | 第128-129页 |
| 4.2 总结与展望 | 第129-131页 |
| 第二部分 唾液酸乳糖摄入对新生仔猪视网膜发育和学习认知功能的影响 | 第131-169页 |
| 第一章 前言 | 第131-142页 |
| 1.1 视网膜的结构与发育 | 第131-135页 |
| 1.1.1 视网膜的结构 | 第131-132页 |
| 1.1.2 视网膜的发育 | 第132-135页 |
| 1.2 PolySia-NCAM在神经系统中的概述 | 第135-140页 |
| 1.2.1 多聚唾液酸的结构 | 第135-136页 |
| 1.2.2 NCAM和SynCAM的结构 | 第136-138页 |
| 1.2.3 多聚唾液酸转移酶 | 第138-139页 |
| 1.2.4 多聚唾液酸在中枢及周围神经系统中的作用 | 第139-140页 |
| 1.3 本课题的研究意义 | 第140-142页 |
| 第二章 材料与方法 | 第142-154页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第142-145页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第142-143页 |
| 2.1.2 实验试剂与耗材 | 第143-145页 |
| 2.2 标本收集 | 第145页 |
| 2.2.1 组织样本采集 | 第145页 |
| 2.2.2 组织样本处理 | 第145页 |
| 2.3 HE-染色 | 第145-146页 |
| 2.3.1 冰冻切片 | 第145-146页 |
| 2.3.2 HE-染色 | 第146页 |
| 2.4 免疫荧光方法 | 第146-147页 |
| 2.4.1 冰冻切片 | 第146页 |
| 2.4.2 免疫荧光染色 | 第146-147页 |
| 2.5 LC-MS/MS法测视网膜组织中的唾液酸含量 | 第147页 |
| 2.5.1 视网膜中唾液酸的提取 | 第147页 |
| 2.5.1 LC-MS/MS检测 | 第147页 |
| 2.6 Real time-PCR | 第147-151页 |
| 2.6.1 总RNA的提取 | 第147-148页 |
| 2.6.2 反转录 | 第148-149页 |
| 2.6.3 内参基因的选择 | 第149-150页 |
| 2.6.4 荧光定量PCR | 第150-151页 |
| 2.7 蛋白表达 | 第151-153页 |
| 2.7.1 蛋白提取 | 第151页 |
| 2.7.2 蛋白浓度测定 | 第151页 |
| 2.7.3 Western blot | 第151-153页 |
| 2.8 统计分析 | 第153-154页 |
| 第三章 结果与分析 | 第154-164页 |
| 3.1 唾液酸乳糖对仔猪视网膜厚度的影响 | 第154-155页 |
| 3.2 唾液酸乳糖对仔猪视网膜中唾液酸表达的影响 | 第155-156页 |
| 3.3 唾液酸乳糖对视网膜和视神经节中ST8SiaⅡ、ST8SiaⅢ、ST8SiaⅣ、NCAM、SynCAM和Neuropilin-2 mRNA表达水平的影响 | 第156-160页 |
| 3.4 唾液酸乳糖对仔猪视网膜中polySia-NCAM表达的影响 | 第160-164页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第164-169页 |
| 4.1 唾液酸乳糖对仔猪视网膜厚度的影响 | 第164页 |
| 4.2 唾液酸乳糖对仔猪视网膜中唾液酸表达的影响 | 第164-165页 |
| 4.3 唾液酸乳糖对视网膜和视神经节中ST8SiaⅡ,ST8SiaⅢ,ST8SiaⅣ,NCAM,SynCAM和Neuropilin-2 mRNA表达水平的影响 | 第165-166页 |
| 4.4 唾液酸乳糖对仔猪视网膜中polySia-NCAM表达的影响 | 第166-167页 |
| 4.5 总结和展望 | 第167-169页 |
| 参考文献 | 第169-193页 |
| 致谢 | 第193-194页 |
| 攻读博士期间发表文章及会议摘要 | 第194页 |
