| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 1 文献综述:卵泡抑制素对卵巢组织和子宫的作用研究进展 | 第12-25页 |
| ·卵泡抑制素基因对牛颗粒细胞的作用及其调节机制研究进展 | 第12-18页 |
| ·卵泡抑制素在卵巢中的作用 | 第12-17页 |
| ·卵泡抑制素在卵巢中的表达 | 第12页 |
| ·卵泡抑制素对FSH的作用 | 第12-13页 |
| ·卵泡抑制素对卵泡发育的作用 | 第13-17页 |
| ·卵泡抑制素在提高动物繁殖性能上的应用 | 第17-18页 |
| ·抑制素基因对Hela细胞的作用及其调节机制研究进展 | 第18-21页 |
| ·卵泡抑制素在子宫中的表达及作用 | 第18-19页 |
| ·卵泡抑制素与癌症的关系 | 第19-21页 |
| ·卵泡抑制素作为癌症抑制因子 | 第19-20页 |
| ·抑制素与颗粒细胞瘤 | 第20-21页 |
| ·抑制素与宫颈癌及前列腺癌 | 第21页 |
| ·卵泡抑制素功能研究方法学进展 | 第21-25页 |
| ·抑制素基因疫苗 | 第21-22页 |
| ·抑制素基因敲除和RNAi | 第22页 |
| ·添加外源抑制素 | 第22页 |
| ·基因转染 | 第22-25页 |
| 2 研究目的和意义 | 第25-26页 |
| 3 实验研究 | 第26-59页 |
| ·试验材料 | 第26-28页 |
| ·质粒及载体 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·主要溶液及相关缓冲液 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-35页 |
| ·菌株pEGISI、pVAX-asd和pVAX-asd-EGFP复苏鉴定 | 第28-29页 |
| ·pEGISI和pVAX-asd片段的回收 | 第29页 |
| ·pXAISI-EGFP质粒的构建 | 第29页 |
| ·连接反应 | 第29页 |
| ·大肠杆菌x6097感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第29页 |
| ·连接产物的热击法转化 | 第29页 |
| ·pXAISI-EGFP质粒鉴定 | 第29页 |
| ·pXAISI-EGFP和pVAX-asd-EGFP质粒的大量提取 | 第29-30页 |
| ·细胞培养 | 第30页 |
| ·Hela细胞的复苏及培养 | 第30页 |
| ·牛颗粒细胞的原代培养 | 第30页 |
| ·质粒脂质体转染 | 第30页 |
| ·绿色荧光蛋白表达检测 | 第30页 |
| ·重组质粒RNA水平表达检测 | 第30-31页 |
| ·转染重组质粒后细胞总RNA的提取及检测 | 第30页 |
| ·逆转录获得的cDNA第一链 | 第30-31页 |
| ·逆转录产物抑制素片段基因扩增 | 第31页 |
| ·共聚焦显微镜观察pXAISI-EGFP融合蛋白的亚细胞定位 | 第31-32页 |
| ·细胞爬片的制备 | 第31页 |
| ·DAPI细胞核染色 | 第31页 |
| ·共聚焦激光显微镜检测 | 第31-32页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第32页 |
| ·细胞周期检测 | 第32页 |
| ·细胞增殖检测 | 第32-33页 |
| ·细胞凋亡基因检测 | 第33-34页 |
| ·牛颗粒细胞和Hela细胞中抑制素受体基因检测 | 第34页 |
| ·牛颗粒细胞培养液中激素水平的检测 | 第34-35页 |
| ·统计分析 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-52页 |
| ·pEGISI质粒复苏鉴定 | 第35页 |
| ·pXAISI-EGFP质粒鉴定 | 第35-36页 |
| ·牛颗粒细胞原代培养和转染 | 第36-37页 |
| ·抑制素融合蛋白的亚细胞定位 | 第37-38页 |
| ·细胞凋亡 | 第38-39页 |
| ·Hela细胞 | 第38页 |
| ·牛颗粒细胞 | 第38-39页 |
| ·细胞周期变化 | 第39-42页 |
| ·Hela细胞周期变化 | 第39-40页 |
| ·牛颗粒细胞周期变化 | 第40-42页 |
| ·细胞增殖 | 第42-43页 |
| ·Hela细胞增殖 | 第42页 |
| ·牛颗粒细胞细胞增值 | 第42-43页 |
| ·细胞总RNA提取物质量 | 第43-44页 |
| ·目的基因在转录水平上的表达 | 第44-45页 |
| ·细胞凋亡基因的变化 | 第45-47页 |
| ·Hela细胞凋亡基因的变化 | 第45-46页 |
| ·牛颗粒细胞凋亡基因的变化 | 第46-47页 |
| ·卵泡抑制素受体基因的变化 | 第47-48页 |
| ·转染后牛颗粒细胞中激素水平的变化 | 第48-52页 |
| ·讨论 | 第52-58页 |
| ·卵泡抑制素对细胞周期的影响 | 第52页 |
| ·卵泡抑制素对细胞中其受体表达的影响 | 第52-53页 |
| ·卵泡抑制素对牛颗粒细胞中激素水平的影响 | 第53-54页 |
| ·细胞凋亡 | 第54-57页 |
| ·细胞凋亡的分子调控机制 | 第55-56页 |
| ·激素对颗粒细胞凋亡的影响 | 第56-57页 |
| ·卵泡抑制素促进颗粒细胞及Hela细胞凋亡的作用机制 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-71页 |
| 已发表研究论文 | 第71页 |
| 已申请的国家发明专利 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
