| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-27页 |
| 1.1 PCBS的概述 | 第15-18页 |
| 1.1.1 PCBs的性质和应用 | 第15-16页 |
| 1.1.2 PCBs的污染和暴露水平 | 第16页 |
| 1.1.3 PCBs的内分泌干扰效应 | 第16-17页 |
| 1.1.4 PCB118 简介 | 第17-18页 |
| 1.2 OH-PCBS概述 | 第18-23页 |
| 1.2.1 OH-PCBs的生成和来源 | 第18-19页 |
| 1.2.2 OH-PCBs的暴露水平 | 第19-21页 |
| 1.2.3 OH-PCBs的内分泌干扰效应 | 第21-22页 |
| 1.2.4 4-OH-CB107 简介 | 第22-23页 |
| 1.3 GnRH分泌调控机制的研究 | 第23-25页 |
| 1.3.1 GnRH概述 | 第23-24页 |
| 1.3.2 Kisspeptin/GPR54 信号通路对分泌GnRH的调控 | 第24-25页 |
| 1.4 GT1-7 细胞是研究GnRH神经元的理想模型 | 第25页 |
| 1.5 研究内容和目的意义 | 第25-27页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第25-26页 |
| 1.5.2 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 PCB118和4-OH-CB107对GT1-7 细胞毒性及GnRH分泌影响与机制研究 | 第27-56页 |
| 2.1 材料和方法 | 第27-39页 |
| 2.1.1 细胞模型 | 第27页 |
| 2.1.2 试剂材料 | 第27页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第27-29页 |
| 2.1.4 GT1-7 细胞的培养 | 第29-31页 |
| 2.1.4.1 细胞的复苏 | 第29-30页 |
| 2.1.4.2 细胞的传代 | 第30页 |
| 2.1.4.3 细胞的冻存 | 第30-31页 |
| 2.1.5 PCB118和 4-OH-CB107溶液的配制 | 第31页 |
| 2.1.6 CCK-8 法细胞存活率测定 | 第31页 |
| 2.1.7 LDH释放法细胞毒性检测 | 第31-32页 |
| 2.1.8 Annexin V-FITC/PI双染法定量检测细胞凋亡 | 第32页 |
| 2.1.9 GnRH分泌量的测定 | 第32-33页 |
| 2.1.9.1 细胞接板和染毒 | 第32-33页 |
| 2.1.9.2 ELISA测定Gn RH浓度 | 第33页 |
| 2.1.10 细胞总蛋白的提取 | 第33页 |
| 2.1.10.1 细胞接板和染毒 | 第33页 |
| 2.1.10.2 总蛋白的提取 | 第33页 |
| 2.1.11 BCA法测定蛋白浓度 | 第33-34页 |
| 2.1.12 蛋白质印迹（Western blot） | 第34页 |
| 2.1.12.1 蛋白变性样品的准备 | 第34页 |
| 2.1.12.2 Western blot操作步骤 | 第34页 |
| 2.1.13 细胞总RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.1.13.1 细胞铺板和染毒 | 第34页 |
| 2.1.13.2 总RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.1.14 RNA浓度和纯度检测 | 第35页 |
| 2.1.15 RNA完整性检测 | 第35-36页 |
| 2.1.16 逆转录合成c DNA | 第36页 |
| 2.1.17 PCR扩增 | 第36-37页 |
| 2.1.17.1 引物设计 | 第36-37页 |
| 2.1.17.2 反应体系和程序 | 第37页 |
| 2.1.18 PCR产物凝胶电泳鉴定 | 第37-38页 |
| 2.1.19 Real-time qPCR | 第38页 |
| 2.1.20 基因表达定量分析方法 | 第38页 |
| 2.1.21 统计学分析 | 第38-39页 |
| 2.2 结果与分析 | 第39-52页 |
| 2.2.1 GT1-7 细胞形态学观察 | 第39页 |
| 2.2.2 PCB118和 4-OH-CB107对GT1-7 细胞增殖的影响 | 第39-41页 |
| 2.2.2.1 PCB118对GT1-7 细胞增殖的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.2.2 4-OH-CB107对GT1-7 细胞增殖的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.3 PCB118和 4-OH-CB107对GT1-7 细胞LDH释放的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.3.1 PCB118对GT1-7 细胞LDH释放的影响 | 第41页 |
| 2.2.3.2 4-OH-CB107对GT1-7 细胞LDH释放的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.4 PCB118和 4-OH-CB107对GT1-7 细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.4.1 PCB118对细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.4.2 4-OH-CB107对细胞凋亡的影响 | 第43页 |
| 2.2.5 PCB118和 4-OH-CB107对GT1-7 细胞分泌Gn RH的影响 | 第43-44页 |
| 2.2.5.1 PCB118对GT1-7 细胞分泌Gn RH的影响 | 第43-44页 |
| 2.2.5.2 4-OH-CB107对GT1-7 细胞分泌Gn RH的影响 | 第44页 |
| 2.2.6 PCB118和 4-OH-CB107对Kisspeptin/GPR54信号通路相关蛋白表达的影响 | 第44-47页 |
| 2.2.6.1 PCB118对Kisspeptin/GPR54信号通路相关蛋白表达的影响 | 第44-46页 |
| 2.2.6.2 4-OH-CB107对Kisspeptin/GPR54信号通路相关蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
| 2.2.7 PCR产物电泳鉴定 | 第47-48页 |
| 2.2.8 实时荧光定量扩增曲线和熔解曲线 | 第48-50页 |
| 2.2.9 PCB118和 4-OH-CB107对Kisspeptin/GPR54信号通路相关基因m RNA表达的影响 | 第50-52页 |
| 2.2.9.1 PCB118对Kisspeptin/GPR54信号通路相关基因m RNA表达的影响 | 第50-51页 |
| 2.2.9.2 4-OH-CB107对Kisspeptin/GPR54信号通路相关基因m RNA表达的影响 | 第51-52页 |
| 2.3 讨论 | 第52-56页 |
| 2.3.1 PCB118和 4-OH-CB107对GT1-7 细胞增殖和凋亡的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.2 PCB118和 4-OH-CB107对GT1-7 细胞分泌Gn RH的影响 | 第53-54页 |
| 2.3.3 PCB118和 4-OH-CB107对Kisspeptin/GPR54信号通路相关蛋白及其基因表达的影响 | 第54-56页 |
| 第三章 全文结论 | 第56-57页 |
| 3.1 论文总结 | 第56页 |
| 3.2 研究创新点 | 第56页 |
| 3.3 研究展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简历 | 第67页 |
