| 摘要 | 第3-7页 |
| abstract | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第20-27页 |
| 1 力学因素与血管重建 | 第21-24页 |
| 1.1 切应力与血管重建 | 第23页 |
| 1.2 张应变与血管重建 | 第23-24页 |
| 2 移植静脉内膜增生的力学生物学机制 | 第24-25页 |
| 3 microRNA在移植静脉内膜增生中的作用 | 第25页 |
| 4 本文的研究思路、拟解决的关键科学问题与意义 | 第25-27页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第27-36页 |
| 1 实验仪器和材料 | 第27-29页 |
| 1.1 实验仪器 | 第27页 |
| 1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-36页 |
| 2.1 静脉移植 | 第29页 |
| 2.2 大鼠有参miRNA测序 | 第29-30页 |
| 2.3 Elastin Van Gieson染色 | 第30页 |
| 2.4 miRNA和small interfering RNA(siRNA)转染 | 第30-31页 |
| 2.5 BMP3重组蛋白作用 | 第31页 |
| 2.6 体外培养细胞增殖检测 | 第31-32页 |
| 2.7 在体细胞增殖检测 | 第32-33页 |
| 2.8 micrON?miRNA agomiR和antagomiR在体注射 | 第33页 |
| 2.9 BMP3lentivirus在体注射 | 第33-34页 |
| 2.10 细胞周期性张应变加载 | 第34页 |
| 2.11 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第34-35页 |
| 2.12 划痕法检测细胞迁移 | 第35页 |
| 2.13 统计学分析 | 第35-36页 |
| 第3章 实验结果 | 第36-72页 |
| 1 大鼠移植静脉内膜增生与细胞增殖 | 第36-37页 |
| 1.1 移植静脉内膜增生 | 第36-37页 |
| 1.2 移植静脉血管细胞增殖 | 第37页 |
| 2 大鼠移植静脉有参miRNA测序 | 第37-42页 |
| 2.1 大鼠移植静脉样本聚类分析 | 第37-38页 |
| 2.2 大鼠移植静脉样本差异基因表达模式聚类分析 | 第38-39页 |
| 2.3 大鼠移植静脉样本差异基因表达分析 | 第39-40页 |
| 2.4 大鼠移植静脉样本差异基因GO富集分析 | 第40-41页 |
| 2.5 IPA软件分析miR-33相关疾病与功能 | 第41-42页 |
| 3 移植静脉的miR-33表达含量下降 | 第42-43页 |
| 4 miR-33调控静脉VSMCs增殖、凋亡和迁移 | 第43-47页 |
| 4.1 miR-33MI和IN调控静脉VSMCs的miR-33表达 | 第43-44页 |
| 4.2 miR-33调控静脉VSMCs增殖 | 第44-45页 |
| 4.3 miR-33调控静脉VSMCs凋亡 | 第45-46页 |
| 4.4 miR-33调控静脉VSMCs迁移 | 第46-47页 |
| 5 miR-33靶向作用于BMP | 第47-52页 |
| 5.1 BMP3是miR-33的潜在靶标 | 第47-48页 |
| 5.2 双荧光素酶检测miR-33与BMP3'UTR结合 | 第48-50页 |
| 5.3 miR-33调控静脉VSMCs的BMP3表达 | 第50-52页 |
| 6 BMP3调节静脉VSMCs增殖和相关信号分子 | 第52-59页 |
| 6.1 BMP3调节静脉VSMCs增殖 | 第52-56页 |
| 6.2 BMP3调控smad2和smad5 磷酸化 | 第56-59页 |
| 7 周期性张应变调控静脉VSMCs增殖和miR-33的表达 | 第59-64页 |
| 7.1 周期性张应变促进静脉VSMCs增殖 | 第59页 |
| 7.2 周期性张应变降低静脉VSMCs的miR-33的表达 | 第59-60页 |
| 7.3 周期性张应变激活静脉VSMCs的BMP3信号通路 | 第60-61页 |
| 7.4 miR-33参与周期性张应变调控的VSMCs增殖和BMP3信号通路 | 第61-63页 |
| 7.5 BMP3参与周期性张应变调控的VSMCs增殖和smad磷酸化 | 第63-64页 |
| 8 agomiR-33缓解移植静脉内膜增生 | 第64-68页 |
| 8.1 agomiR-33可以提高移植静脉血管miR-33的表达含量 | 第64-65页 |
| 8.2 agomiR-33降低移植静脉血管BMP3的表达 | 第65页 |
| 8.3 agomiR-33缓解移植静脉内膜增生 | 第65-66页 |
| 8.4 agomiR-33缓解移植静脉细胞增殖 | 第66-67页 |
| 8.5 antagomiR-33不影响移植静脉内膜增生 | 第67-68页 |
| 8.6 antagomiR-33不影响移植静脉细胞增殖 | 第68页 |
| 9 BMP3lentivirus调控移植静脉内膜增生 | 第68-72页 |
| 9.1 BMP3lentivirus上调移植静脉BMP3的含量 | 第68-69页 |
| 9.2 BMP3lentivirus促进移植静脉内膜增生 | 第69-70页 |
| 9.3 BMP3lentivirus促进移植静脉细胞增殖 | 第70-72页 |
| 第4章 讨论 | 第72-81页 |
| 1 细胞张应变加载参数的选择 | 第72-74页 |
| 2 miR-33研究详述 | 第74-79页 |
| 2.1 miR-33与脂质代谢 | 第74-77页 |
| 2.2 miR-33与细胞增殖 | 第77-78页 |
| 2.3 miR-33是力敏感分子 | 第78页 |
| 2.4 miR-33的其他功能 | 第78-79页 |
| 3 结论与展望 | 第79-81页 |
| 全文小结 | 第81-82页 |
| 文献综述：microRNA在应力调控血管细胞功能中的作用 | 第82-99页 |
| 1 miRNAs概述 | 第82-90页 |
| 1.1 miRNAs生物合成 | 第84-88页 |
| 1.2 miRNAs作用方式 | 第88-89页 |
| 1.3 miRNAs靶标预测 | 第89-90页 |
| 2 miRNAs与心血管疾病 | 第90-95页 |
| 2.1 miRNAs与心脏疾病 | 第90-91页 |
| 2.2 miRNAs与动脉粥样硬化 | 第91-95页 |
| 3 切应力敏感的内皮源性miRNAs | 第95-97页 |
| 3.1 miRNAs与切应力诱导的ECs激活和动脉粥样硬化 | 第95-96页 |
| 3.2 切应力通过miRNA调控细胞交流 | 第96-97页 |
| 4 结语 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-109页 |
| 附录1 实验仪器 | 第109-110页 |
| 附录2 实验试剂 | 第110-111页 |
| 附录3 主要溶液成分及配制 | 第111-113页 |
| 附录4 大鼠有参miRNA测序相关名词解释 | 第113-114页 |
| 附录5 大鼠有参miRNA测序相关软件 | 第114-115页 |
| 附录6 大鼠有参miRNA测序相关数据库 | 第115-116页 |
| 附录7 实验方法 | 第116-128页 |
| 1 大鼠静脉VSMCs原代培养、传代培养以及鉴定 | 第116-117页 |
| 2 蛋白免疫印迹实验 | 第117页 |
| 3 RNA提取和荧光定量PCR | 第117-119页 |
| 4 双荧光素酶报告实验 | 第119-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 攻读博士学位期间已发表的学术论文 | 第129-131页 |
| 攻读博士学位期间获奖情况 | 第131-133页 |
