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干扰素诱导基因GPR171在病毒感染中的功能研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 研究背景第14-23页
    1.病毒严重危害人类的生命健康第14-16页
    2.干扰素和干扰素诱导基因在病毒感染中发挥重要作用第16-17页
    3.干扰素相关信号通路受到机体的精确调控第17-18页
    4.GPCR对于细胞内信号转导具有重要的调控作用第18-19页
    5.GPCR在病毒感染中发挥重要作用第19-20页
    6.GPR171目前的研究进展第20-21页
    7.课题研究目的以及意义第21-23页
第二章 实验材料与方法第23-49页
    1.实验材料第23-28页
        1.1.实验小鼠及细胞第23页
        1.2.实验试剂第23-24页
        1.3.实验器材及耗材第24-25页
        1.4.试剂配制第25-27页
        1.5.引物序列第27-28页
    2.实验方法第28-48页
        2.1.荧光定量PCR第28-30页
        2.2.基因敲除技术(CRISPR/cas9)第30-38页
        2.3.VSV病毒扩增第38-39页
        2.4.病毒滴度检测第39页
        2.5.免疫印迹法 (Western blot)第39-41页
        2.6.小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)的提取第41-42页
        2.7.小鼠腹腔来源巨噬细胞(PEM)的提取第42-43页
        2.8.小鼠嗅球VSV感染模型第43页
        2.9.小鼠腹腔VSV感染模型第43页
        2.10.结晶紫染色第43-44页
        2.11.L929上清的制备第44页
        2.12.转染步骤第44-45页
        2.13.GPR171-sh RNA的构建第45-48页
    3.统计学分析第48-49页
第三章.实验结果和讨论第49-73页
    第一节. GPR171是干扰素诱导基因第49-55页
        1.干扰素诱导GPR171的表达第49-51页
        2.干扰素通过NF-κB信号通路诱导GPR171表达上调第51-53页
        3.病毒感染促进了GPR171的表达第53-55页
    第二节. 过表达GPR171及其配体Biglen促进病毒的复制第55-61页
        1.过表达GPR171能促进VSV的复制第56-58页
        2.过表达GPR171能促进HSV和NDV的复制第58-59页
        3.GPR171配体Biglen促进病毒的复制第59-60页
        4.干扰GPR171的表达下调VSV的复制第60-61页
    第三节. GPR171敲除后病毒的复制减少第61-66页
        1.CRISPR/cas9技术构建GPR171敲除小鼠第61-62页
        2.巨噬细胞敲除GPR171降低病毒复制第62-63页
        3.Biglen通过GPR171促进病毒的复制第63-64页
        4.VSV腹腔感染模型中,GPR171敲除小鼠VSV的表达量减少第64-65页
        5.VSV嗅球感染模型中,GPR171敲除的小鼠嗅球中的VSV量明显减少第65-66页
    第四节. GPR171通过影响干扰素信号通路来促进病毒的复制第66-70页
        1.GPR171不影响干扰素的表达第66-67页
        2.GPR171通过抑制干扰素下游的干扰素诱导基因的表达来达到促进病毒复制第67-70页
    第五节:结论与展望第70-73页
附录Ⅰ 缩略词第73-75页
附录Ⅱ 攻读硕士学位期间科研工作成果第75-76页
    科研工作成果第75-76页
参考文献第76-82页
致谢第82页

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