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水稻细菌性条斑病菌中组氨酸代谢关键基因及耐盐基因的鉴定和功能分析

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第一部分 文献综述第12-40页
    第一章 水稻黄单胞病菌研究进展第12-24页
        1 黄单胞菌概述第12页
        2 黄单胞菌危害及生物学特性第12-13页
        3 黄单胞菌基因组特征第13页
        4 稻黄单胞菌研究概况第13-15页
            4.1 水稻黄单胞菌病害分布第13页
            4.2 稻黄单胞菌生物学特性及危害第13-15页
        5 水稻黄单胞菌毒性及致病机理第15-24页
            5.1 水稻黄单胞菌致病相关基因第15页
            5.2 水稻黄单胞菌致病生化因子第15-20页
            5.3 致病因子调控系统第20-24页
    第二章 组氨酸代谢系统研究概况第24-32页
        1 组氨酸的理化性质及其功能第24页
        2 生物体内组氨酸及其代谢通路研究第24-32页
            2.1 组氨酸代谢通路第24-26页
            2.2 组氨酸合成代谢第26-28页
            2.3 组氨酸降解代谢第28-30页
            2.4 黄单胞菌中组氨酸代谢第30-32页
    第三章 病原菌环境胁迫适应机制第32-38页
        1 环境胁迫概述第32-34页
            1.1 温度胁迫第32-33页
            1.2 重金属胁迫第33页
            1.3 活性氧胁迫第33-34页
            1.4 盐胁迫第34页
        2 微生物耐盐机制研究进展第34-38页
            2.1 微生物对盐浓度的适应能力第34-35页
            2.2 微生物耐盐机制研究第35-36页
            2.3 SYLF蛋白概述第36-38页
    第四章 研究目的及意义第38-40页
第二部分 研究内容第40-96页
    第一章 组氨酸代谢系统在水稻细菌性条斑病菌致病过程中的功能研究第40-76页
        1 材料与方法第41-59页
            1.1 实验菌株、质粒及引物第41-47页
            1.2 培养基及抗生素第47-48页
            1.3 细菌培养与保存第48-49页
            1.4 Rs105基因组DNA的提取第49页
            1.5 DNA操作系统第49-52页
            1.6 细菌转化系统第52-54页
            1.7 细菌RNA的提取及后续实验操作第54-56页
            1.8 缺失突变菌株及互补菌株的构建第56-57页
            1.9 生物学表型测定第57-59页
            1.10 数据处理第59页
        2 结果与分析第59-72页
            2.1 组氨酸合成与降解代谢基因簇第59-60页
            2.2 组氨酸代谢相关基因序列分析第60-61页
            2.3 缺失突变菌株的构建和验证第61-62页
            2.4 致病性测定结果显示his基因簇在Xoc致病过程中具有重要作用第62-63页
            2.5 his基因簇相关基因的缺失突变不影响在非寄主烟草上的HR反应第63-64页
            2.6 体外组氨酸添加实验证明his基因簇在Xoc组氨酸合成中至关重要第64-65页
            2.7 Xoc菌株蛋白酶活性受组氨酸诱导第65-66页
            2.8 Xoc菌株抗氧化压力能力受组氨酸诱导第66页
            2.9 △hisB黄色素的形成能力与组氨酸浓度有关第66-67页
            2.10 △hisB生物膜形成能力与组氨酸浓度呈正相关第67-68页
            2.11 △hisB在不同组氨酸浓度条件下的生长动态分析第68-69页
            2.12 250μM组氨酸条件下5个致病相关基因在hisB突变体中表达量下降第69-70页
            2.13 250μM组氨酸条件下5个黄色素相关基因在△hisB中的表达量下降第70-72页
            2.14 250μM组氨酸条件下生物膜形成相关基因在△hisB中的表达量下降第72页
        3 结论与讨论第72-76页
    第二章 水稻细菌性条斑病菌耐盐调控基因的鉴定第76-96页
        1 材料与方法第77-82页
            1.1 实验菌株、质粒及引物第77-79页
            1.2 培养基及抗生素第79页
            1.3 菌株培养与存储第79页
            1.4 gDNA的提取第79页
            1.5 DNA操作系统第79页
            1.6 细菌转化系统第79页
            1.7 细菌RNA的提取及反转录第79-81页
            1.8 缺失突变体的构建第81页
            1.9 生物学表型测定第81-82页
            1.10 数据处理第82页
        2 结果与分析第82-92页
            2.1 PXO_03841突变菌株构建及耐盐能力测定第82页
            2.2 氨基酸序列分析第82-83页
            2.3 重组载体的构建及酶切验证第83页
            2.4 突变体的验证第83-84页
            2.5 00945基因的缺失突变不影响Xoc在寄主水稻上的致病性以及非寄主烟草上的HR反应第84-85页
            2.6 00945基因缺失突变后不影响Xoc的蛋白酶活性第85页
            2.7 00945基因缺失突变后不影响Xoc的生物膜形成能力第85-86页
            2.8 00945基因缺失突变后不影响Xoc胞外多糖产量第86-87页
            2.9 00945基因的缺失突变不影响Xoc的抗氧化压力能力第87页
            2.10 00945基因的缺失突变降低了Xoc对NaCl的耐受能力第87-88页
            2.11 00945基因的表达量受环境中NaCl浓度的诱导第88-89页
            2.12 00945基因缺失突变菌株对K~+、Ca~(2+)耐受性测定第89-91页
            2.13 00945基因缺失突变菌株对重金属Zn~(2+)的敏感性测定第91页
            2.14 00945基因缺失突变致使Xoc运动能力下降第91-92页
        3 结论与讨论第92-96页
第三部分 全文总结及展望第96-98页
    1 结论第96页
        1.1 组氨酸代谢系统研究小结第96页
        1.2 盐离子耐盐调控研究小结第96页
    2 创新点第96-97页
    3 研究展望第97-98页
攻读硕士学位期间发表的论文第98-100页
参考文献第100-112页
致谢第112页

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