| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第一章 S-β-咔啉-3-酰基-RGDV的合成 | 第18-23页 |
| 1.S-β-咔啉-3-酰基-RGDV的选择 | 第18页 |
| 2.S-β-咔啉-3-酰基-RGDV的合成 | 第18-21页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 3.鉴定结果 | 第21-22页 |
| 4.讨论及小结 | 第22-23页 |
| 4.1 合成中遇到的问题及解决方法 | 第22页 |
| 4.2 小结 | 第22-23页 |
| 第二章 以S-β-咔啉-3-酰基-RGDV为主要膜材的空白脂质体的制备 | 第23-28页 |
| 1.试剂及仪器 | 第23页 |
| 2.实验方法 | 第23-25页 |
| 2.1 以S-β-咔啉-3-酰基-RGDV为主要膜材的空白脂质体的制备方法 | 第23-24页 |
| 2.2 正交处方筛选 | 第24-25页 |
| 3.实验结果 | 第25-26页 |
| 4.讨论与小结 | 第26-28页 |
| 第三章 载SURVIVIN-siRNA的基因递送系统的制备 | 第28-36页 |
| 1.试剂及仪器 | 第28-29页 |
| 2.实验方法 | 第29-32页 |
| 2.1 LPD(liposome-polycation-DNA,脂质体-多聚阳离子-DNA复合物) | 第29页 |
| 2.2 溶液的配制 | 第29页 |
| 2.3 基因后载入法制备SURVIVIN-siRNA/CRVliposomes | 第29-30页 |
| 2.4 琼脂糖凝胶电泳法筛选复合物鱼精蛋白比例 | 第30-31页 |
| 2.5 共聚焦显微镜测定转染效率 | 第31-32页 |
| 3.实验结果 | 第32-35页 |
| 3.1 凝胶成像及分析 | 第32-33页 |
| 3.2 共聚焦显微镜测定转染效率 | 第33-35页 |
| 4.讨论与小结 | 第35-36页 |
| 第四章 载SURVIVIN-siRNA的基因递送系统的理化性质研究 | 第36-46页 |
| 1.试剂与仪器 | 第36页 |
| 2.实验方法 | 第36-40页 |
| 2.1 载SURVIVIN-siRNA的基因递送系统的形态观察 | 第36-37页 |
| 2.2 粒径及粒度分布的测定 | 第37页 |
| 2.3 Zeta电位的测定 | 第37-38页 |
| 2.4 体外释放度测定 | 第38-39页 |
| 2.5 差式扫描量热分析(DSC) | 第39-40页 |
| 3.实验结果 | 第40-45页 |
| 3.1 形态观察结果 | 第40-41页 |
| 3.2 粒径、粒径分布及Zeta电位的测定结果 | 第41-42页 |
| 3.3 体外释放度实验结果 | 第42-44页 |
| 3.4 差式扫描量热分析(DSC)结果 | 第44-45页 |
| 4.讨论与小结 | 第45-46页 |
| 第五章 载SURVIVIN-siRNA的基因递送系统的体外抗肿瘤活性评价 | 第46-58页 |
| 1.材料与方法 | 第46-48页 |
| 1.1 试剂与仪器 | 第46-47页 |
| 1.2 溶液配制 | 第47-48页 |
| 2.实验方法 | 第48-52页 |
| 2.1 细胞培养 | 第48页 |
| 2.2 实验分组及药物配制 | 第48-51页 |
| 2.3 MTT法 | 第51-52页 |
| 3.实验结果 | 第52-57页 |
| 3.1 实验组和对照组的细胞的存活率 | 第52-54页 |
| 3.2 制剂组和空白组的细胞的存活率 | 第54-55页 |
| 3.3 实验组和制剂组的细胞的抑制率 | 第55-57页 |
| 4.讨论与小结 | 第57-58页 |
| 第六章 载SURVIVIN-siRNA的基因递送系统蛋白水平沉默效率评价 | 第58-68页 |
| 1.材料与方法 | 第58-59页 |
| 1.1 试剂与仪器 | 第58-59页 |
| 1.2 溶液配制 | 第59页 |
| 2.实验方法 | 第59-65页 |
| 2.1 实验分组及药物配制 | 第59-61页 |
| 2.2 细胞培养及基因转染 | 第61-62页 |
| 2.3 总蛋白的提取 | 第62页 |
| 2.4 总蛋白定量 | 第62-63页 |
| 2.5 ELISA | 第63-65页 |
| 3.实验结果 | 第65-67页 |
| 3.1 SURVIVIN标准曲线的建立 | 第65页 |
| 3.2 ELISA检测结果 | 第65-67页 |
| 4.讨论与小结 | 第67-68页 |
| 第七章 载SURVIVIN-siRNA的基因递送系统的mRNA水平沉默效率评价 | 第68-77页 |
| 1.材料与方法 | 第68-69页 |
| 1.1 试剂与仪器 | 第68-69页 |
| 1.2 溶液配制 | 第69页 |
| 2.实验方法 | 第69-74页 |
| 2.1 实验分组及药物配制 | 第69-71页 |
| 2.2 细胞培养及基因转染 | 第71-72页 |
| 2.3 细胞全RNA的提取 | 第72页 |
| 2.4 逆转录 | 第72-73页 |
| 2.5 RT-PCR | 第73-74页 |
| 3.实验结果 | 第74-76页 |
| 3.1 提取细胞全RNA的浓度 | 第74页 |
| 3.2 逆转录获得的cDNA的浓度 | 第74页 |
| 3.3 RT-PCR结果 | 第74-76页 |
| 4.讨论及小结 | 第76-77页 |
| 第八章 载SURVIVIN-siRNA的基因递送系统的体内抗肿瘤活性研究 | 第77-85页 |
| 1.试剂与仪器 | 第77-78页 |
| 2.实验方法 | 第78-80页 |
| 2.1 实验分组及药物配制 | 第78-79页 |
| 2.2 模型建立 | 第79页 |
| 2.3 抗肿瘤活性评价 | 第79-80页 |
| 3.实验结果 | 第80-82页 |
| 3.1 瘤重及抑瘤率 | 第80-81页 |
| 3.2 体重变化曲线 | 第81页 |
| 3.3 脏体比 | 第81-82页 |
| 4.讨论及小结 | 第82-85页 |
| 4.1 瘤重与抑瘤率 | 第82-83页 |
| 4.2 体重变化曲线 | 第83-84页 |
| 4.3 脏体比 | 第84页 |
| 4.4 小结 | 第84-85页 |
| 第九章 S-β-咔啉-3-酰基-RGDV急性毒性研究 | 第85-97页 |
| 1.材料与方法 | 第85-86页 |
| 1.1 试剂与仪器 | 第85页 |
| 1.2 溶液配制 | 第85-86页 |
| 2.实验方法 | 第86-89页 |
| 2.1 实验分组及药物配制 | 第86页 |
| 2.2 急性毒性评价 | 第86页 |
| 2.3 取血方法 | 第86-87页 |
| 2.4 谷丙转氨酶(ALT/GPT)标准曲线的测定 | 第87页 |
| 2.5 谷丙转氨酶(ALT/GPT)样品的测定 | 第87页 |
| 2.6 谷草转氨酶(AST/GOT)标准曲线的测定 | 第87页 |
| 2.7 谷草转氨酶(AST/GOT)样品的测定 | 第87-88页 |
| 2.8 肌酐标准(Crea)曲线的测定 | 第88页 |
| 2.9 肌酐样品(Crea)的测定 | 第88-89页 |
| 3.实验结果 | 第89-95页 |
| 3.1 急性毒性结果 | 第89-91页 |
| 3.2 谷丙转氨酶(ALT/GPT)标准曲线 | 第91页 |
| 3.3 谷草转氨酶(AST/GOT)标准曲线 | 第91-92页 |
| 3.4 肌酐(Crea)标准曲线 | 第92-93页 |
| 3.5 血液生化指标测定结果 | 第93-95页 |
| 4.讨论及小结 | 第95-97页 |
| 4.1 急性毒性 | 第95-96页 |
| 4.2 血液生化指标 | 第96页 |
| 4.3 小结 | 第96-97页 |
| 第十章 载SURVIVIN-siRNA的基因递送系统诱导细胞凋亡的研究 | 第97-112页 |
| 第一节 载SURVIVIN-siRNA的递送系统诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的形态学观察 | 第97-100页 |
| 1.试剂与仪器 | 第97-98页 |
| 2.实验方法 | 第98-99页 |
| 2.1 细胞准备 | 第98页 |
| 2.2 实验分组及药物配制 | 第98-99页 |
| 2.3 体外转染及共聚焦显微镜检测 | 第99页 |
| 3.实验结果 | 第99-100页 |
| 4.讨论 | 第100页 |
| 第二节 AnnexinV-FITC/PI双染法载SURVIVIN-siRNA的递送系统诱导宫颈癌HeLa细胞的凋亡率 | 第100-106页 |
| 1.材料与方法 | 第100-101页 |
| 1.1 试剂与仪器 | 第100-101页 |
| 1.2 溶液配制 | 第101页 |
| 2.实验方法 | 第101-103页 |
| 2.1 实验分组及药物配制 | 第101-102页 |
| 2.2 细胞培养及基因转染 | 第102页 |
| 2.3 细胞的处理与标记 | 第102-103页 |
| 3.实验结果 | 第103-105页 |
| 4.讨论 | 第105-106页 |
| 第三节 载SURVIVIN-siRNA的递送系统诱导宫颈癌HeLa细胞周期的变化. | 第106-112页 |
| 1.材料与方法 | 第106-107页 |
| 1.1 试剂与仪器 | 第106页 |
| 1.2 溶液配制 | 第106-107页 |
| 2.实验方法 | 第107-108页 |
| 2.1 实验分组及药物配制 | 第107页 |
| 2.2 细胞培养及基因转染 | 第107-108页 |
| 2.3 细胞固定 | 第108页 |
| 2.4 PI染色 | 第108页 |
| 3.实验结果 | 第108-111页 |
| 4.讨论 | 第111页 |
| 5.小结 | 第111-112页 |
| 第十一章 全文总结 | 第112-114页 |
| 文献综述 | 第114-119页 |
| 参考文献 | 第119-124页 |
| 缩略词表 | 第124-125页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126-128页 |
| 个人简历 | 第128页 |
