| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTARCT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1、ABA | 第11-15页 |
| 1.1 ABA的合成与运输 | 第11-12页 |
| 1.2 ABA受体 | 第12-13页 |
| 1.3 ABA信号通路中的Ca~(2+) | 第13-15页 |
| 2、OsDMI3 | 第15页 |
| 3、蛋白互作研究的方法 | 第15-17页 |
| 4、本研究的目的与内容 | 第17-19页 |
| 第二章 OsUGD与OsDMI3之间存在相互作用且参与ABA诱导的抗氧化防护 | 第19-43页 |
| 1、实验材料 | 第20-22页 |
| 1.1 植物材料、耗材、菌株与载体 | 第20页 |
| 1.2 实验相关试剂与溶液 | 第20-21页 |
| 1.3 主要实验仪器及设备 | 第21-22页 |
| 1.4 引物合成与基因测序 | 第22页 |
| 2、实验方法 | 第22-34页 |
| 2.1 引物设计 | 第22页 |
| 2.2 水稻总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.3 RNA反转录为cDNA单链 | 第23页 |
| 2.4 目的基因片段通过PCR大量扩增 | 第23-24页 |
| 2.5 DNA片段的回收和纯化 | 第24-25页 |
| 2.6 目的基因连接T载体或者目的载体 | 第25页 |
| 2.7 热激法转化E.coli DH5α | 第25-26页 |
| 2.8 筛选阳性克隆 | 第26页 |
| 2.9 试剂盒小量提取质粒 | 第26页 |
| 2.10 质粒大量提取 | 第26-27页 |
| 2.11 dsRNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.12 提取水稻的原生质体 | 第28-29页 |
| 2.13 PEG法转化水稻原生质体 | 第29页 |
| 2.14 BIFC验证蛋白之间的相互作用 | 第29-30页 |
| 2.15 融合蛋白的表达 | 第30页 |
| 2.16 融合蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| 2.17 SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第31页 |
| 2.18 Western Blotting | 第31-32页 |
| 2.19 GST-pull down | 第32页 |
| 2.20 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP) | 第32-33页 |
| 2.21 RT-PCR分析基因表达量 | 第33页 |
| 2.22 水稻超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)的测定 | 第33-34页 |
| 3、结果与分析 | 第34-41页 |
| 3.1 BIFC验证OsDMI3与OsUGD的相互作用 | 第34-35页 |
| 3.2 GST-pull down体外验证OsUGD与OsDMI3互作 | 第35-38页 |
| 3.3 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)体内验证OsUGD与OsDMI3互作 | 第38-39页 |
| 3.4 外源ABA处理诱导水稻中OsUGD基因表达上调 | 第39-40页 |
| 3.5 瞬时沉默OsUGD,测定SOD与CAT酶活 | 第40-41页 |
| 4 、本章小结与讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 OsBIP130与OsDMI3之间存在相互作用且参与ABA诱导的抗氧化防护 | 第43-51页 |
| 1、实验材料 | 第44-45页 |
| 1.1 植株材料、菌株及载体 | 第44页 |
| 1.2 实验相关试剂与溶液 | 第44页 |
| 1.3 实验仪器及设备 | 第44页 |
| 1.4 引物合成及测序 | 第44-45页 |
| 2、实验方法 | 第45页 |
| 3、结果与分析 | 第45-49页 |
| 3.1 BIFC验证OsDMI3与OsBIP130的相互作用 | 第45-46页 |
| 3.2 CoIP验证OsDMI3与OsBIP130的相互作用 | 第46-48页 |
| 3.3 外源ABA处理诱导水稻中OsBIP130基因表达上调 | 第48页 |
| 3.4 瞬时沉默和过表达OsBIP130,检测SOD与CAT酶活变化 | 第48-49页 |
| 4、本章小结与分析 | 第49-51页 |
| 第四章 OsRab5A与OsDMI3之间存在相互作用且可能不参与ABA诱导的抗氧化防护 | 第51-62页 |
| 1、实验材料 | 第52-53页 |
| 1.1 植株材料、菌株及载体 | 第52页 |
| 1.2 实验相关试剂与溶液 | 第52页 |
| 1.3 实验仪器及设备 | 第52页 |
| 1.4 引物合成及测序 | 第52-53页 |
| 2、实验方法 | 第53页 |
| 3、结果与分析 | 第53-59页 |
| 3.1 BIFC验证OsDMI3与OsRab5A的相互作用 | 第53-54页 |
| 3.2 GST-pull down验证OsDMI3与OsRab5A的相互作用 | 第54-56页 |
| 3.3 CoIP验证OsDMI3与OsRab5A的相互作用 | 第56-58页 |
| 3.4 外源ABA处理诱导水稻中OsRab5A基因表达上调 | 第58页 |
| 3.5 瞬时沉默OsRab5A,检测SOD与CAT酶活变化 | 第58-59页 |
| 4、本章小结与讨论 | 第59-62页 |
| 第五章 创新之处与存在问题 | 第62-63页 |
| 1、创新之处 | 第62页 |
| 2、存在问题 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 硕士期间所发表的论文 | 第71页 |
