| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| 1.1 抗生素的污染现状 | 第14页 |
| 1.2 土壤环境中的抗生素和抗生素抗性基因 | 第14-17页 |
| 1.2.1 抗生素的主要种类 | 第14-15页 |
| 1.2.2 土壤中抗生素的主要来源 | 第15页 |
| 1.2.3 土壤中抗生素的污染情况及危害 | 第15-16页 |
| 1.2.4 土壤中抗生素抗性基因的来源及污染状况 | 第16-17页 |
| 1.2.5 土壤中抗生素抗性基因的传播及危害 | 第17页 |
| 1.3 蔬菜中的抗生素和抗生素抗性基因 | 第17-18页 |
| 1.4 抗生素抗性基因的检测 | 第18页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 1.6 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 实验方法 | 第20-32页 |
| 2.1 样品采集 | 第20-21页 |
| 2.2 土壤基本理化性质的测定 | 第21页 |
| 2.3 土壤中抗生素的提取与测定 | 第21-22页 |
| 2.3.1 土壤中抗生素的提取方法 | 第21-22页 |
| 2.3.2 土壤中抗生素的测定方法 | 第22页 |
| 2.4 样品DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.4.1 土壤中DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.4.2 蔬菜中DNA的提取 | 第23页 |
| 2.5 抗生素抗性基因的检测及其定量分析 | 第23-27页 |
| 2.5.1 标准品的制备 | 第23-25页 |
| 2.5.2 抗生素抗性基因的定性检测 | 第25页 |
| 2.5.3 抗生素抗性基因的定量检验 | 第25-27页 |
| 2.6 耐药菌株的筛选及稳定性的检测 | 第27-28页 |
| 2.6.1 耐药菌株的筛选 | 第27页 |
| 2.6.2 菌株的纯化 | 第27页 |
| 2.6.3 耐药菌株稳定性的检测 | 第27-28页 |
| 2.7 细菌16SrRNA基因多样性分析 | 第28-31页 |
| 2.7.1 细菌16SrRNA基因扩增 | 第28-29页 |
| 2.7.2 DGGE试剂准备 | 第29-30页 |
| 2.7.3 DGGE胶的制备 | 第30-31页 |
| 2.7.4 DGGE凝胶电泳及染色 | 第31页 |
| 2.8 数据分析 | 第31-32页 |
| 第三章 结果 | 第32-48页 |
| 3.1 土壤理化性质 | 第32页 |
| 3.2 土壤中的残留抗生素 | 第32页 |
| 3.3 土壤中细菌16SrRNA基因,intl1,tnpA和ARGs丰度和多样性 | 第32-38页 |
| 3.3.1 细菌16SrRNA基因,intl1,tnpA和ARGs的丰度差异 | 第32-36页 |
| 3.3.2 细菌16SrRNA基因,intl1,tnpA和ARGs的多样性比较 | 第36-38页 |
| 3.3.3 检出ARGs之间的共选择模式 | 第38页 |
| 3.4 样品中残留抗生素、ARGs以及MGEs之间的相关性 | 第38页 |
| 3.5 分离得到的抗性菌株中ARGs的稳定性 | 第38-44页 |
| 3.6 蔬菜中ARGs的丰度和多样性 | 第44-48页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第48-54页 |
| 4.1 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1.1 长期施粪对土壤理化性质及残留抗生素的影响 | 第48页 |
| 4.1.2 长期施粪对土壤中细菌16SrRNA基因,intl1,tnpA和ARGs丰度和多样性的影响 | 第48-49页 |
| 4.1.3 抗生素残留水平及MGEs对ARGs丰度与传播的影响 | 第49-50页 |
| 4.1.4 抗生素含量及MGEs对ARGs稳定性的影响 | 第50-51页 |
| 4.1.5 长期施粪对蔬菜中ARGs多样性与丰度的影响 | 第51页 |
| 4.2 结论 | 第51-52页 |
| 4.3 存在的问题与展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简况及联系方式 | 第64-67页 |
