| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-17页 |
| 第一部分：Aβ_(1-42)对BMSCs细胞增殖功能的影响 | 第17-32页 |
| 1 前言 | 第17-19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-26页 |
| 2.1 主要试剂、仪器及相关液体的配制 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验中使用的主要试剂及耗材 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验中使用的主要仪器 | 第20页 |
| 2.1.3 L-DMEM培养基的配制 | 第20页 |
| 2.1.4 Aβ_(1-42)的制备 | 第20-21页 |
| 2.2 细胞来源与培养方法 | 第21页 |
| 2.3 CCK-8法检测不同浓度Aβ_(1-42)对BMSCs细胞活力的影响 | 第21页 |
| 2.4 不同处理因素干预后细胞内活性氧的检测。 | 第21-22页 |
| 2.5 westen blotting检测目的蛋白 | 第22-23页 |
| 2.6 细胞周期检测 | 第23-24页 |
| 2.7 EdU检测细胞增殖 | 第24-25页 |
| 2.8 统计学分析 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-29页 |
| 3.1 不同浓度的Aβ_(1-42)对BMSCs细胞活力的影响 | 第26页 |
| 3.2 不同浓度的Aβ_(1-42)对BMSCs增殖细胞核抗原蛋白PCNA表达的影响 | 第26-27页 |
| 3.3 不同浓度的Aβ_(1-42)对BMSCs细胞周期S期细胞所占比例的影响 | 第27-28页 |
| 3.4 Edu法检测不同浓度的Aβ_(1-42)对BMSCs细胞增殖的影响 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 5 结论 | 第31-32页 |
| 第二部分：自噬在Aβ_(1-42)抑制BMSCs细胞增殖中的作用及机制研究 | 第32-54页 |
| 1 前言 | 第32-34页 |
| 2 实验材料与方法 | 第34-40页 |
| 2.1 主要试剂、仪器及相关液体的配制 | 第34-36页 |
| 2.1.1 实验中使用的试剂及耗材 | 第34-35页 |
| 2.1.2 实验中使用的主要仪器 | 第35页 |
| 2.1.3 L-DMEM培养基的配制 | 第35页 |
| 2.1.4 Aβ_(1-42)寡聚体的制备 | 第35页 |
| 2.1.5 200μM/LH_2O_2制备 | 第35页 |
| 2.1.6 3-MA的制备 | 第35-36页 |
| 2.1.7 雷帕霉素(RAPA)的制备 | 第36页 |
| 2.1.8 N-乙酰半胱氨酸(N-AC)的制备 | 第36页 |
| 2.2 细胞来源与培养方法 | 第36页 |
| 2.3 CCK-8法检测不同浓度Aβ_(1-42)对BMSCs细胞活力的影响 | 第36页 |
| 2.4 不同浓度处理因素干预后细胞内活性氧的检测 | 第36-37页 |
| 2.5 westen blotting检测目的蛋白 | 第37页 |
| 2.6 透射电子显微镜观察自噬体形成 | 第37-38页 |
| 2.7 免疫荧光技术观察点簇状LC3小体 | 第38页 |
| 2.8 不同时间点BMSCs细胞内活性氧及自噬相关蛋白检测 | 第38-39页 |
| 2.9 细胞周期检测S期细胞所占比例 | 第39页 |
| 2.10 EdU法检测处于DNA合成期细胞数量 | 第39页 |
| 2.11 统计学分析 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-50页 |
| 3.1 不同浓度Aβ_(1-42)对BMSCs细胞内活性氧的影响 | 第40页 |
| 3.2 Aβ_(1-42)诱发的ROS对BMSCs细胞增殖能力的影响 | 第40-42页 |
| 3.3 不同浓度Aβ_(1-42)干预对BMSCs细胞内自噬相关蛋白表达的影响 | 第42页 |
| 3.4 免疫荧光技术对Aβ_(1-42)干预下BMSCs细胞内自噬水平的检测 | 第42-43页 |
| 3.5 透射电子显微镜观察BMSCs细胞内自噬体形成 | 第43-44页 |
| 3.6 Aβ_(1-42)干预下的ROS与自噬之间相互关系的探究 | 第44-45页 |
| 3.7 AKT/mTOR信号通路在Aβ_(1-42)干预下的BMSCs中ROS调控自噬中的作用 | 第45-47页 |
| 3.8 使用自噬调节剂对5μM/LAβ_(1-42)干预下BMSCs自噬蛋白表达的影响 | 第47页 |
| 3.9 调节自噬对Aβ_(1-42)干预下BMSCs细胞内ROS及增殖功能的影响 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 第三部分 Wnt/β-catenin通路在Aβ_(1-42)抑制BMSCs成骨分化中的作用 | 第54-70页 |
| 1 前言 | 第54-56页 |
| 2 实验材料与方法 | 第56-61页 |
| 2.1 主要设备及试剂的配制 | 第56-58页 |
| 2.1.1 实验中使用的主要试剂及耗材 | 第56页 |
| 2.1.2 实验中使用的主要仪器 | 第56-57页 |
| 2.1.3 成骨诱导分化完全培养基的配制 | 第57页 |
| 2.1.4 Aβ_(1-42)寡聚体的制备 | 第57页 |
| 2.1.5 0.1%明胶溶液的配制 | 第57-58页 |
| 2.1.6 0.1%茜素红S染液的配制 | 第58页 |
| 2.2 细胞来源与培养方法 | 第58页 |
| 2.3 碱性磷酸酶活性检测 | 第58-59页 |
| 2.4 westen blotting检测目的蛋白 | 第59-60页 |
| 2.5 茜素红S钙结节染色 | 第60页 |
| 2.6 统计学分析 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-66页 |
| 3.1 不同浓度Aβ_(1-42)对BMSCs成骨分化效能的影响 | 第61-62页 |
| 3.2 不同浓度Aβ_(1-42)对Wnt/β-catenin通路的影响 | 第62-63页 |
| 3.3 调节Wnt/β-catenin通路后相关的蛋白的变化 | 第63-64页 |
| 3.4 调节Wnt/β-catenin通路后BMSCs成骨分化功能的变化 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第70-71页 |
| 本研究的不足之处 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 综述 | 第82-99页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 个人简历 | 第101页 |
