| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 mTOR信号通路 | 第11-14页 |
| 1.1.1 概述 | 第11-13页 |
| 1.1.2 mTOR通路与肿瘤 | 第13-14页 |
| 1.2 细胞骨架与微管 | 第14-16页 |
| 1.2.1 细胞骨架概述 | 第14页 |
| 1.2.2 微管的结构和功能 | 第14-16页 |
| 1.3 细胞自噬 | 第16-20页 |
| 1.3.1 概述 | 第16-17页 |
| 1.3.2 mTOR与细胞自噬 | 第17-18页 |
| 1.3.3 微管与细胞自噬 | 第18-20页 |
| 1.4 本课题的研究目的、内容、方法与意义 | 第20-22页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第20页 |
| 1.4.2 研究方法 | 第20页 |
| 1.4.3 研究内容 | 第20-21页 |
| 1.4.4 研究意义 | 第21-22页 |
| 第二章 mTORC1影响微管稳定性 | 第22-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要实验耗材 | 第23页 |
| 2.1.4 实验相关细胞株 | 第23页 |
| 2.1.5 主要试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.2.2 细胞爬片 | 第25页 |
| 2.2.3 微管免疫染色 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-27页 |
| 2.4 实验讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 mTORC1影响微管稳定性的临床意义 | 第28-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-32页 |
| 3.1.1 主要实验仪器 | 第28页 |
| 3.1.2 主要实验试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.3 主要实验耗材 | 第29页 |
| 3.1.4 实验相关细胞株 | 第29页 |
| 3.1.5 主要试剂配制 | 第29-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第32页 |
| 3.2.2 雷帕霉素与临床化疗药物联合处理HeLa细胞 | 第32页 |
| 3.2.3 HeLa细胞总蛋白提取 | 第32-33页 |
| 3.2.4 蛋白免疫印迹技术 | 第33-35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-37页 |
| 3.3.1 雷帕霉素稳定微管降低诺考达唑的疗效 | 第35-36页 |
| 3.3.2 雷帕霉素稳定微管降低紫杉醇的疗效 | 第36页 |
| 3.3.3 雷帕霉素稳定微管不能降低依托泊苷的疗效 | 第36-37页 |
| 3.4 结果讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 微管稳定性与细胞自噬的关系 | 第39-51页 |
| 4.1 实验材料 | 第39-42页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第39页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第39-40页 |
| 4.1.3 主要实验耗材 | 第40页 |
| 4.1.4 实验相关细胞株 | 第40页 |
| 4.1.5 实验相关质粒 | 第40页 |
| 4.1.6 实验相关载体图 | 第40-41页 |
| 4.1.7 主要试剂配制 | 第41-42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-48页 |
| 4.2.1 HeLa-ATG5-shRNA稳转细胞株的构建 | 第42-46页 |
| 4.2.2 HeLa-Scramble细胞株的建立 | 第46页 |
| 4.2.3 使用Crispr/Cas9技术构建HeLa-ATG5敲除细胞系 | 第46-48页 |
| 4.3 实验结果 | 第48-50页 |
| 4.3.1 HeLa-ATG5-shRNA干扰效率的鉴定 | 第48页 |
| 4.3.2 HeLa-ATG5-KO细胞系的构建 | 第48页 |
| 4.3.3 MEF-ATG5细胞系鉴定 | 第48-49页 |
| 4.3.4 微管稳定性与自噬无关 | 第49-50页 |
| 4.4 结果讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 mTORC1调节微管稳定性机制的初步探讨 | 第51-53页 |
| 5.1 实验材料 | 第51页 |
| 5.1.1 实验相关器材 | 第51页 |
| 5.1.2 实验相关试剂 | 第51页 |
| 5.2 实验方案 | 第51-52页 |
| 5.2.1 细胞铺板 | 第51页 |
| 5.2.2 蛋白免疫印迹 | 第51-52页 |
| 5.3 实验结果 | 第52页 |
| 5.4 结果讨论 | 第52-53页 |
| 第六章 主要结论与展望 | 第53-54页 |
| 6.1 主要结论 | 第53页 |
| 6.2 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-70页 |
| 综述 | 第70-81页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章及参加的会议 | 第82页 |
