| 英汉缩略语对照表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1 肿瘤 | 第12-13页 |
| 2 保罗样激酶PLK1与肿瘤 | 第13-14页 |
| 3 蛋白纯化技术 | 第14-15页 |
| 4 PLK1 PBD结构及功能 | 第15-17页 |
| 5 荧光高通量筛选方法 | 第17-19页 |
| 6 PLK1 PBD小分子抑制剂 | 第19-21页 |
| 7 展望 | 第21-23页 |
| 第二章 细胞培养与PLK1 PBD的分离纯化 | 第23-32页 |
| 1 实验材料 | 第23-25页 |
| 1.1 质粒、菌株与细胞株 | 第23页 |
| 1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 1.3 主要溶液 | 第23-25页 |
| 1.4 主要仪器 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.1 细胞复苏和传代 | 第25-26页 |
| 2.2 pET-28a(+)质粒的酶切反应 | 第26-27页 |
| 2.3 PLK1 PBD重组蛋白的表达 | 第27页 |
| 2.4 PLK1 PBD重组蛋白的分离纯化 | 第27-28页 |
| 2.5 目的蛋白的浓度测定 | 第28-29页 |
| 3 实验结果 | 第29-30页 |
| 3.1 细胞培养 | 第29页 |
| 3.2 pET-28a-PLK1 PBD重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| 3.3 PLK1 PBD重组蛋白的可溶性表达与分离纯化 | 第29-30页 |
| 3.4 重组蛋白浓度的测定 | 第30页 |
| 4 讨论 | 第30-31页 |
| 5 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 化合物在荧光偏振模型上的筛选 | 第32-36页 |
| 1 实验材料 | 第32页 |
| 1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 1.2 主要溶液 | 第32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-33页 |
| 2.1 样品库中化合物的稀释 | 第32页 |
| 2.2 荧光偏振模型上初筛化合物 | 第32-33页 |
| 2.3 荧光偏振模型上复筛化合物及IC_(50)值的确定 | 第33页 |
| 3 实验结果 | 第33-35页 |
| 3.1 荧光偏振模型上筛选的结果 | 第33-34页 |
| 3.2 化合物1097G11和6507G11在PLK1 PBD上的活性 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35页 |
| 5 小结 | 第35-36页 |
| 第四章 小分子抑制剂1097C11和6507G11的抗肿瘤机制研究 | 第36-60页 |
| 1 实验材料 | 第36页 |
| 1.1 主要试剂 | 第36页 |
| 1.2 主要溶液 | 第36页 |
| 1.3 仪器 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-40页 |
| 2.1 MTT比色实验 | 第36-37页 |
| 2.2 流式细胞仪检测小分子抑制剂1097C11和6507G11对细胞凋亡的影响 | 第37-38页 |
| 2.3 流式细胞仪检测细胞周期阻滞 | 第38-39页 |
| 2.4 小分子抑制剂1097C11和6507G11对细胞迁移的影响 | 第39-40页 |
| 2.5 小分子抑制剂1097C11和6507G11与PLK1激酶PBD结构域的分子对接 | 第40页 |
| 3 实验结果 | 第40-58页 |
| 3.1 小分子抑制剂1097C11和6507G11的细胞毒性(MTT比色法) | 第40-42页 |
| 3.2 流式细胞仪检测小分子抑制剂1097C11和6507G11对细胞凋亡的影响 | 第42-45页 |
| 3.3 流式细胞仪检测小分子抑制剂1097C11和6507G11对细胞周期影响的结果 | 第45-50页 |
| 3.4 小分子抑制剂1097C11和6507G11对细胞迁移的影响结果 | 第50-54页 |
| 3.5 化合物与PLK1 PBD对接 | 第54-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 全文总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第70-73页 |
| 个人简历 | 第73页 |
