| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| 1.1 引言 | 第9-13页 |
| 1.1.1 多环芳烃污染及修复现状 | 第9页 |
| 1.1.2 重金属污染现状、危害以及生物修复 | 第9-10页 |
| 1.1.3 PAHs和重金属Cr(Ⅵ)复合污染现状及危害情况 | 第10-11页 |
| 1.1.4 PAHs细菌降解途径以及分子机制研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.5 重金属Cr(Ⅵ)微生物还原分子机制研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 研究目标及主要研究内容 | 第13-14页 |
| 1.2.1 LZ-E菌株降解萘同时还原六价铬的功能和机理探究 | 第13页 |
| 1.2.2 LZ-C菌株基因组草图测序研究其重金属抗性和多环芳烃降解机制 | 第13-14页 |
| 1.3 研究技术路线 | 第14页 |
| 1.3.1 同时降解萘、还原Cr(Ⅵ)菌株LZ-E的分离,鉴定及其分子机理 | 第14页 |
| 1.3.2 多环芳烃、重金属复合抗性菌株LZ-C的分离,鉴定及其分子机理 | 第14页 |
| 1.4 课题研究意义 | 第14-15页 |
| 第二章 同时降解萘、还原CR(Ⅵ)菌株LZ-E的分离,鉴定及分子机理 | 第15-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 土壤样品采集和处理 | 第15页 |
| 2.1.2 试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 仪器 | 第15页 |
| 2.1.4 常用溶液配制 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-20页 |
| 2.2.1 同时降解萘并且还原六价铬的菌株的富集和分离 | 第16页 |
| 2.2.2 LZ-E菌株鉴定 | 第16-17页 |
| 2.2.3 LZ-E菌株最适温度,最适PH,抗生素抗性,耐高盐情况,以及生长情况的测定 | 第17-18页 |
| 2.2.4 气质色谱方法检测萘标准曲线和LZ-E菌株萘降解情况 | 第18页 |
| 2.2.5 二苯碳酰二肼法检测六价铬标准曲线和LZ-E菌株六价铬还原曲线 | 第18页 |
| 2.2.6 LZ-E菌株电镜观察铬沉淀情况 | 第18页 |
| 2.2.7 LZ-E菌株野生质粒测序 | 第18页 |
| 2.2.8 十二烷基硫酸钠消除LZ-E菌株野生质粒 | 第18-19页 |
| 2.2.9 LZ-E菌株萘降解基因基因克隆 | 第19页 |
| 2.2.10 LZ-E菌株六价铬还原基因克隆 | 第19页 |
| 2.2.11 RNA提取和萘降解基因和六价铬还原基因Realtime PCR(RT-PCR)检测基因在萘和铬诱导下表达量 | 第19-20页 |
| 2.3 实验结果 | 第20-35页 |
| 2.3.1 富集分离获得能够同时降解萘并能够还原六价铬的菌株LZ-E | 第20-21页 |
| 2.3.2 菌株LZ-E的鉴定(16S rRNA ViTEK革兰氏染色) | 第21页 |
| 2.3.3 LZ-E对于高盐和抗生素的抗性检测 | 第21页 |
| 2.3.4 LZ-E在萘和Cr(Ⅵ)复合环境下的生长情况和萘降解、Cr (Ⅵ)还原情况 | 第21-24页 |
| 2.3.5 透射电镜及能谱检测观察Cr(Ⅵ)还原到Cr(Ⅲ)结果 | 第24-25页 |
| 2.3.6 提取野生质粒pHWL10及其测序结果 | 第25-26页 |
| 2.3.7 pHWL10消除后菌株功能测定 | 第26页 |
| 2.3.8 克隆LZ-E基因组上萘降解基因和Cr(Ⅵ)还原基因 | 第26-29页 |
| 2.3.9 菌株LZ-E在生物曝气池中高效降解萘同时还原Cr(Ⅵ) | 第29-31页 |
| 2.3.10 萘降解基因与Cr(Ⅵ)还原基因表达量 | 第31-35页 |
| 第三章 多环芳烃、重金属复合抗性菌株LZ-C的分离,鉴定及分子机理 | 第35-47页 |
| 3.1 材料方法 | 第35-36页 |
| 3.1.1 试剂及仪器 | 第35页 |
| 3.1.2 常用溶液的配制 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 重金属和多环芳烃复合污染条件富集分离抗性菌株LZ-C | 第36页 |
| 3.2.2 LZ-C鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2.3 菌株最适温度,最适PH,抗生素抗性,耐高盐情况,以及生长情况的测定 | 第37-38页 |
| 3.2.4 各种重金属最小抑制浓度和各种有机物能否被降解检测 | 第38页 |
| 3.2.5 细菌基因组DNA提取,基因组测序 | 第38页 |
| 3.2.6 细菌基因组数据分析 | 第38页 |
| 3.2.7 细菌关键基因表达量测定 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-47页 |
| 3.3.1 在重金属和多环芳烃复合条件下,富集分离得到菌株LZ-C | 第39-40页 |
| 3.3.2 LZ-C的鉴定(16S ViTEK革兰氏染色) | 第40-41页 |
| 3.3.3 LZ-C特性(耐高盐抗生素)以及生长情况 | 第41-42页 |
| 3.3.4 Cr (Ⅵ),Hg (Ⅱ), Cd(Ⅱ) and Pb (Ⅱ)最小抑制浓度测定 | 第42-43页 |
| 3.3.5 对萘蒽菲芘二甲基萘二甲苯苯酚萘酚等有机物具有广谱抗性 | 第43页 |
| 3.3.6 基因组DNA测序结果统计分析和基因预测 | 第43-44页 |
| 3.3.7 基因组数据分析 | 第44-46页 |
| 3.3.8 重金属和多环芳烃相关基因表达量 | 第46-47页 |
| 全文总结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 在学期间发表的学术论文和研究成果 | 第53页 |
