| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 前列腺癌的研究现状 | 第9-11页 |
| 1.1.1 前列腺癌发生发展情况 | 第9页 |
| 1.1.2 前列腺癌发生因素 | 第9-10页 |
| 1.1.3 前列腺癌的治疗现状 | 第10页 |
| 1.1.4 前列腺癌的研究意义 | 第10-11页 |
| 1.2 雄性激素受体在前列腺癌中的作用 | 第11-13页 |
| 1.2.1 雄性激素受体的结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 雄性激素受体信号通路 | 第12页 |
| 1.2.3 雄性激素受体在前列腺癌中的研究 | 第12-13页 |
| 1.3 EphA3受体及其家族 | 第13-16页 |
| 1.3.1 Eph家族及其结构 | 第13-15页 |
| 1.3.2 EphA3研究现状与意义 | 第15-16页 |
| 1.4 本课题研究内容及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 前列腺癌细胞中AR和Sp1共同调控EphA3的表达 | 第17-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 主要细胞系 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 相关质粒 | 第19页 |
| 2.1.5 siRNA | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-31页 |
| 2.2.1 质粒和菌株 | 第19-22页 |
| 2.2.1.1 DH5α感受态细胞制备 | 第19-20页 |
| 2.2.1.2 质粒的洗脱 | 第20页 |
| 2.2.1.3 热激法转化 | 第20-21页 |
| 2.2.1.4 细菌培养 | 第21页 |
| 2.2.1.5 质粒提取与纯化 | 第21-22页 |
| 2.2.2 细胞培养及转染 | 第22-23页 |
| 2.2.2.1 细胞培养 | 第22页 |
| 2.2.2.2 细胞计数 | 第22-23页 |
| 2.2.2.3 细胞转染 | 第23页 |
| 2.2.3 细胞中基因mRNA的水平检测 | 第23-25页 |
| 2.2.3.1 细胞总RNA的提取及基因组DNA的去除 | 第23-24页 |
| 2.2.3.2 RT反应 | 第24-25页 |
| 2.2.3.2.1 反转录反应体系如下 | 第24页 |
| 2.2.3.2.2 普通PCR反应体系如下 | 第24页 |
| 2.2.3.2.3 实时定量PCR反应体系如下 | 第24-25页 |
| 2.2.4 细胞中蛋白表达的检测 | 第25-27页 |
| 2.2.4.1 细胞总蛋白提取 | 第25页 |
| 2.2.4.2 DC法蛋白定量 | 第25-26页 |
| 2.2.4.3 蛋白免疫印迹 | 第26-27页 |
| 2.2.5 细胞总DNA提取 | 第27页 |
| 2.2.6 双荧光素酶报告基因检测 | 第27页 |
| 2.2.7 siRNA干扰 | 第27-28页 |
| 2.2.8 蛋白免疫共沉淀 | 第28页 |
| 2.2.9 染色质免疫共沉淀 | 第28-30页 |
| 2.2.10 数据处理与统计 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-43页 |
| 2.3.1 前列腺癌细胞中AR和EphA3的mRNA和蛋白表达水平 | 第31-32页 |
| 2.3.2 DHT刺激对EphA3表达的影响 | 第32-34页 |
| 2.3.3 AR对EphA3表达的影响 | 第34页 |
| 2.3.4 AR对EphA3转录活性的影响 | 第34-37页 |
| 2.3.5 Sp1对EphA3表达的影响 | 第37-39页 |
| 2.3.6 AR与Sp1的相互作用 | 第39页 |
| 2.3.7 AR和Sp1与EphA3启动子的相互作用 | 第39-40页 |
| 2.3.8 总结与讨论 | 第40-42页 |
| 2.3.9 展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| PCR引物汇总 | 第46-47页 |
| 主要试剂配制 | 第47-48页 |
| 英文缩略词表 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
