| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 中英文缩写词表 | 第15-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-23页 |
| 1.1 Patatin的发现及命名 | 第17页 |
| 1.2 Patatin研究现状 | 第17-20页 |
| 1.2.1 Patatin启动子的分类 | 第17-18页 |
| 1.2.2 Patatin在马铃薯中的分布 | 第18页 |
| 1.2.3 Patatin的表达部位 | 第18页 |
| 1.2.4 Patatin的结构及重要组成元件 | 第18-19页 |
| 1.2.5 Patatin的生理功能 | 第19-20页 |
| 1.2.6 Patatin启动子研究展望 | 第20页 |
| 1.3 信号肽简述 | 第20-21页 |
| 1.3.1 信号肽的结构 | 第20页 |
| 1.3.2 信号肽的功能 | 第20-21页 |
| 1.3.3 信号肽的预测 | 第21页 |
| 1.4 研究目标及研究内容 | 第21-23页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第21-22页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 第2章 AtG系列和AtSG系列转化株的鉴定及更名 | 第23-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第23页 |
| 2.1.3 生化试剂及耗材 | 第23页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 培养基及溶液配制 | 第24-25页 |
| 2.2.1 含Hyg抗性的1/2MS培养基 | 第24页 |
| 2.2.2 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.3.1 拟南芥的播种与培养 | 第25页 |
| 2.3.2 转基因拟南芥植株核DNA的提取与PCR检测 | 第25-26页 |
| 2.3.3 PCR产物纯化及测序 | 第26页 |
| 2.3.4 拟南芥植株总RNA的提取及反转录 | 第26-27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-31页 |
| 2.4.1 P05、p06质粒PCR鉴定及全株系转基因植物基因组PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 2.4.2 AtG-1与AtG-2株系DNA测序比对 | 第28-30页 |
| 2.4.3 RT-PCR鉴定全株系转基因拟南芥中Patatin启动子启动GUS报告基因在转录水平上的表达 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第3章 马铃薯Patatin启动子植物表达载体的重构建及拟南芥遗传转化 | 第32-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第33页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.2.1 试剂配制 | 第34页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.3 结果分析 | 第39-49页 |
| 3.3.1 pCAMBIA-1304载体与p05、p06质粒酶切结果 | 第39页 |
| 3.3.2 重组载体PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3.3 p1304-GUS阳性重组载体测序结果分析 | 第40-42页 |
| 3.3.4 p1304-SGus阳性重组载体测序结果分析 | 第42-45页 |
| 3.3.5 p1304-PS 连接产物转化结果 | 第45-46页 |
| 3.3.6 p1304-PS阳性重组载体PCR鉴定 | 第46页 |
| 3.3.7 p1304-PS阳性重组载体测序结果分析 | 第46-48页 |
| 3.3.8 p1304-PS阳性重组载体氨基酸序列比对结果 | 第48-49页 |
| 3.3.9 拟南芥的遗传转化 | 第49页 |
| 3.4 小结 | 第49-51页 |
| 第4章 转基因拟南芥植株蛋白表达分析 | 第51-56页 |
| 4.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 4.1.2 试剂的配制 | 第51-52页 |
| 4.1.3 仪器与设备 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 4.2.1 拟南芥蛋白粗提取 | 第52页 |
| 4.2.2 蛋白标准曲线制作 | 第52-53页 |
| 4.2.3 转基因拟南芥蛋白WesternBlotting检测 | 第53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-55页 |
| 4.3.1 蛋白标准曲线 | 第53-54页 |
| 4.3.2 SDS-PAGE电泳与WesternBlotting结果 | 第54-55页 |
| 4.4 小结 | 第55-56页 |
| 第5章 AtSG系列转基因植株组织化学染色分析 | 第56-59页 |
| 5.1 实验材料 | 第56页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第56页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第56页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第56页 |
| 5.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 5.2.1 材料的培养 | 第56页 |
| 5.2.2 试剂的配置 | 第56-57页 |
| 5.2.3 GUS染色方法 | 第57页 |
| 5.3 结果与分析 | 第57-58页 |
| 5.3.1 AtSG转基因植株全生长期的组织化学染色分析 | 第57页 |
| 5.3.2 高浓度蔗糖对AtSG转基因株全生长期GUS基因表达的影响 | 第57-58页 |
| 5.4 小结 | 第58-59页 |
| 第6章 讨论与结论 | 第59-61页 |
| 6.1 讨论 | 第59页 |
| 6.2 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第71页 |
