| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第15-23页 |
| 1.1 烟粉虱 | 第15-16页 |
| 1.1.1 烟粉虱的概述 | 第15页 |
| 1.1.2 烟粉虱的危害现状 | 第15-16页 |
| 1.2 双生病毒 | 第16-17页 |
| 1.2.1 双生病毒概述 | 第16-17页 |
| 1.2.2 双生病毒的基因结构和功能 | 第17页 |
| 1.3 烟粉虱和双生病毒的互作 | 第17-20页 |
| 1.3.1 双生病毒对烟粉虱的影响 | 第17-18页 |
| 1.3.2 烟粉虱传毒机制 | 第18-19页 |
| 1.3.3 双生病毒侵染后烟粉虱基因表达的变化 | 第19-20页 |
| 1.4 转录组学分析对烟粉虱中肠研究的必要性 | 第20-21页 |
| 1.5 酵母双杂交技术 | 第21-22页 |
| 1.6 本研究的目的及内容 | 第22-23页 |
| 1.6.1 本研究的目的 | 第22页 |
| 1.6.2 本研究的内容 | 第22-23页 |
| 2 基本材料与方法 | 第23-31页 |
| 2.1 基本材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 供试昆虫及实验种群维持 | 第23页 |
| 2.1.2 供试病毒 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第23-24页 |
| 2.2 基本实验方法 | 第24-31页 |
| 2.2.1 烟粉虱隐存种的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.2 带毒植物的获取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 基因克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.4 载体构建 | 第27-28页 |
| 2.2.5 烟粉虱虫体RNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.6 烟粉虱cDNA的制备 | 第29页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR | 第29-31页 |
| 3 TYLCV对烟粉虱中肠基因表达的影响 | 第31-54页 |
| 3.1 材料与实验方法 | 第32-35页 |
| 3.1.1 供试烟粉虱、病毒及植物 | 第32页 |
| 3.1.2 带毒烟粉虱的获取 | 第32页 |
| 3.1.3 烟粉虱中肠的解剖和储存 | 第32页 |
| 3.1.4 烟粉虱中肠RNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.1.5 烟粉虱中肠cDNA文库的构建及测序 | 第33-34页 |
| 3.1.6 用于qPCR的中肠和虫体的cDNA获取 | 第34页 |
| 3.1.7 参照基因和验证基因的选取以及引物设计 | 第34-35页 |
| 3.1.8 qPCR反应 | 第35页 |
| 3.2 数据处理与分析 | 第35-37页 |
| 3.2.1 中肠转录组数据的拼接 | 第35-36页 |
| 3.2.2 中肠转录组数据注释 | 第36页 |
| 3.2.3 差异表达基因的筛选 | 第36页 |
| 3.2.4 差异表达基因的GO和KEGG富集分析 | 第36页 |
| 3.2.5 qPCR数据的处理 | 第36-37页 |
| 3.3 结果 | 第37-38页 |
| 3.3.1 中肠转录组数据概况 | 第37页 |
| 3.3.2 中肠转录组数据注释和分类 | 第37页 |
| 3.3.3 差异表达基因概况 | 第37页 |
| 3.3.4 qPCR对转录组验证结果 | 第37-38页 |
| 3.3.5 差异表达基因的基因类别和通路富集分析 | 第38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-54页 |
| 3.4.1 基因类别和通路富集分析 | 第38-39页 |
| 3.4.2 TYLCV干扰烟粉虱中肠细胞的细胞周期和DNA修复 | 第39-40页 |
| 3.4.3 TYLCV引起烟粉虱中肠防御反应 | 第40-42页 |
| 3.4.4 TYLCV侵染激活烟粉虱中肠免疫相关信号分子及通路 | 第42-54页 |
| 4 酵母双杂筛选与病毒非结构蛋白互作的烟粉虱蛋白 | 第54-61页 |
| 4.1 材料与方法 | 第54-58页 |
| 4.1.1 供试文库、菌株及质粒 | 第54-55页 |
| 4.1.2 病毒非结构蛋白基因的克隆及诱饵载体的构建 | 第55页 |
| 4.1.3 酵母感受态细胞的制备 | 第55页 |
| 4.1.4 诱饵载体质粒转入酵母细胞 | 第55-56页 |
| 4.1.5 诱饵载体质粒的毒性和自激活毒性试验 | 第56页 |
| 4.1.6 利用诱饵载体筛选烟粉虱cDNA文库 | 第56-57页 |
| 4.1.7 含互作克隆酵母菌株的筛选 | 第57页 |
| 4.1.8 阳性克隆酵母质粒提取及分离测序 | 第57-58页 |
| 4.1.9 阳性质粒进行酵母双杂回转验证 | 第58页 |
| 4.1.10 阳性质粒进行自激活验证 | 第58页 |
| 4.2 结果与分析 | 第58-60页 |
| 4.2.1 诱饵质粒的自激活和毒性 | 第58-59页 |
| 4.2.2 与AC2蛋白互作的烟粉虱蛋白 | 第59页 |
| 4.2.3 与AC3蛋白互作的烟粉虱蛋白 | 第59页 |
| 4.2.4 与AC4蛋白互作的烟粉虱蛋白 | 第59-60页 |
| 4.3 讨论 | 第60-61页 |
| 5 总讨论 | 第61-63页 |
| 5.1 本研究的特色和创新之处 | 第62页 |
| 5.2 本研究中存在的问题 | 第62页 |
| 5.3 值得继续研究的问题 | 第62-63页 |
| 6 参考文献 | 第63-71页 |
