| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 牛传染性鼻气管炎诊断方法研究进展 | 第9-14页 |
| 1 牛传染性鼻气管炎概述 | 第9-11页 |
| 1.1 牛传染性鼻气管炎病毒的病原学 | 第9-10页 |
| 1.2 牛传染性鼻气管炎病毒的传播 | 第10页 |
| 1.3 牛传染性鼻气管炎的流行病学 | 第10-11页 |
| 2 牛传染性鼻气管炎的诊断方法 | 第11-13页 |
| 2.1 病原学诊断 | 第11页 |
| 2.1.1 病毒的分离鉴定 | 第11页 |
| 2.1.2 包涵体检查 | 第11页 |
| 2.1.3 聚合酶链式反应（PCR） | 第11页 |
| 2.2 血清学诊断 | 第11-12页 |
| 2.2.1 间接血凝试验 | 第11-12页 |
| 2.2.2 中和试验 | 第12页 |
| 2.2.3 酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第12页 |
| 2.2.4 间接免疫荧光试验 | 第12页 |
| 2.3 胶体金技术 | 第12-13页 |
| 3 研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 第二章 北京地区牛传染性鼻气管炎血清学调查 | 第14-18页 |
| 1 材料 | 第14页 |
| 1.1 血清样品 | 第14页 |
| 1.2 主要试剂 | 第14页 |
| 1.3 主要仪器 | 第14页 |
| 2 方法 | 第14页 |
| 2.1 试验方法 | 第14页 |
| 2.2 统计方法 | 第14页 |
| 3 结果与分析 | 第14-16页 |
| 3.1 北京地区IBR血清学调查 | 第14-15页 |
| 3.2 卡方检验 | 第15页 |
| 3.3 北京地区IBR流行趋势 | 第15-16页 |
| 4 讨论 | 第16-18页 |
| 第三章 IBR抗体检测间接ELISA方法的建立 | 第18-38页 |
| 1 材料 | 第18-19页 |
| 1.1 病毒和细胞 | 第18页 |
| 1.2 血清和抗体 | 第18页 |
| 1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 1.5 主要试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2 方法 | 第19-24页 |
| 2.1 IBRV抗原的制备 | 第19-21页 |
| 2.1.1 病毒的增值 | 第19页 |
| 2.1.2 IBRV组织半数感染量（TCID50）的测定 | 第19-20页 |
| 2.1.3 间接免疫荧光试验 | 第20页 |
| 2.1.4 中和试验 | 第20-21页 |
| 2.1.5 病毒的纯化 | 第21页 |
| 2.2 间接ELISA方法的建立 | 第21-24页 |
| 2.2.1 间接ELISA操作程序 | 第21-22页 |
| 2.2.2 抗原包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定 | 第22页 |
| 2.2.3 最佳封闭液的确定 | 第22页 |
| 2.2.4 血清稀释液的确定 | 第22页 |
| 2.2.5 血清作用时间的确定 | 第22页 |
| 2.2.6 HRP-兔抗牛Ig G稀释液的确定 | 第22页 |
| 2.2.7 HRP-兔抗牛Ig G稀释度的确定 | 第22-23页 |
| 2.2.8 HRP-兔抗牛Ig G作用时间的确定 | 第23页 |
| 2.2.9 显色时间的确定 | 第23页 |
| 2.2.10 间接ELISA阴、阳性血清临界值的确定 | 第23页 |
| 2.2.11 特异性试验 | 第23页 |
| 2.2.12 敏感性试验 | 第23页 |
| 2.2.13 重复性试验 | 第23页 |
| 2.2.14 间接ELISA与IDEXX试剂盒的对比试验 | 第23-24页 |
| 2.2.15 间接ELISA与中和试验对比试验 | 第24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-36页 |
| 3.1 IBRV抗原的制备 | 第24-26页 |
| 3.1.1 病毒接种 | 第24页 |
| 3.1.2 IBRV组织半数感染量（TCID50）的测定 | 第24-25页 |
| 3.1.3 间接免疫荧光试验 | 第25-26页 |
| 3.1.4 中和试验 | 第26页 |
| 3.1.5 纯化病毒含量测定 | 第26页 |
| 3.2 间接ELISA方法的建立 | 第26-36页 |
| 3.2.1 抗原包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定 | 第26-27页 |
| 3.2.2 最佳封闭液的确定 | 第27页 |
| 3.2.3 血清稀释液的确定 | 第27-28页 |
| 3.2.4 血清作用时间的确定 | 第28-29页 |
| 3.2.5 HRP-兔抗牛Ig G稀释液的确定 | 第29页 |
| 3.2.6 HRP-兔抗牛Ig G稀释倍数的确定 | 第29-30页 |
| 3.2.7 HRP-兔抗牛Ig G作用时间的确定 | 第30-31页 |
| 3.2.8 显色时间的确定 | 第31页 |
| 3.2.9 间接ELISA阴、阳性血清临界值的确定 | 第31-32页 |
| 3.2.10 特异性试验 | 第32-33页 |
| 3.2.11 敏感性试验 | 第33页 |
| 3.2.12 重复性试验 | 第33-34页 |
| 3.2.13 间接ELISA与IDEXX试剂盒对比试验 | 第34页 |
| 3.2.14 间接ELISA与中和试验对比试验 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 ELISA包被抗原的选择 | 第36-37页 |
| 4.2 封闭液的选择 | 第37-38页 |
| 4.3 HRP-兔抗牛Ig G稀释液的选择 | 第38页 |
| 4.4 间接ELISA与IDEXX试剂盒的比较 | 第38页 |
| 4.5 间接ELISA与中和试验的比较 | 第38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 展望 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 附录 1 | 第44-46页 |
| 附录 2 | 第46-47页 |
