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p53基因治疗联合放疗逆转肿瘤多药耐药的实验研究

内容提要第1-10页
英文缩略词第10-11页
第1章 文献综述第11-20页
   ·细胞膜蛋白介导的耐药第11-13页
     ·P-gp 糖蛋白与卵巢癌多药耐药第12-13页
     ·MRP 蛋白与卵巢癌多药耐药第13页
     ·其他多药耐药相关基因第13页
   ·细胞内酶系统介导的耐药第13-15页
     ·谷胱甘肽-s-转移酶与卵巢癌多药耐药第13-14页
     ·DNA 拓朴异构酶Ⅱ与卵巢癌多药耐药第14-15页
   ·凋亡相关基因介导的多药耐药第15-16页
     ·p53 基因第15-16页
     ·Bcl-2 基因第16页
   ·现有逆转肿瘤MDR 策略第16页
   ·P53 基因治疗与肿瘤MDR第16-17页
   ·放射治疗与MDR第17-19页
   ·本课题研究的意义及前景展望第19-20页
第2章 材料和方法第20-28页
   ·主要试剂及仪器第20-22页
     ·主要试剂与药品第20-21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·细胞培养第22页
     ·细胞株第22页
     ·细胞冻存及复苏第22页
   ·照射条件第22页
   ·细胞模型的建立(脂质体转染法)第22-23页
     ·质粒第22-23页
     ·转染步骤第23页
   ·蛋白质的提取第23页
     ·细胞总蛋白的提取第23页
   ·蛋白质浓度测定第23-24页
     ·蛋白浓度测定—标准曲线法第23-24页
   ·蛋白质免疫印迹法(Western Blotting)第24-25页
     ·凝胶的制备第24页
     ·SDS-PAGE 电泳第24-25页
   ·细胞倍增时间测定第25页
   ·MTT 比色法检测细胞对药物敏感性第25-26页
     ·化疗药物浓度的确定第25页
     ·MTT 步骤第25-26页
   ·RT-PCR 法第26-27页
     ·提取细胞总RNA第26页
     ·紫外分光光度仪检测定量第26页
     ·cDNA 的合成第26页
     ·PCR 扩增第26-27页
     ·琼脂糖凝胶电泳第27页
   ·统计学处理第27-28页
第3章 实验结果第28-49页
   ·SKOV3、SKVCR2.0 细胞一般生物学指标及药物敏感性检测.第28-33页
     ·SKOV3、SKVCR2.0 细胞倍增时间测定第28页
     ·Western Blotting 检测细胞P-gp、p53 蛋白表达第28-29页
     ·SKOV3、SKVCR2.0 细胞株的药物敏感性检测第29-33页
   ·SKOV3 细胞野生型p53,突变型p53 模型的构建及药敏检测第33-37页
     ·SKOV3-wtp53, SKOV3-175H 模型的构建第33-34页
     ·SKOV3, SKOV3-wtp53, SKOV3-175H 细胞的药物敏感性检测第34-37页
   ·SKVCR2.0 细胞野生型p53,突变型p53 模型的构建及药敏检测第37-42页
     ·SKVCR-wtp53,SKVCR-175H 模型的构建第37-38页
     ·SKVCR2.0,SKVCR-wtp53,SKVCR-175H 细胞的药物敏感性检测第38-42页
   ·不同P53 模型的耐药机制相关蛋白表达差异检测第42-46页
     ·TopoⅡα,P13K-Ⅲ和Beclin 1 蛋白检测第42-46页
   ·分割剂量照射与单次剂量照射P-GP 蛋白及MDR-1 基因检测.第46-49页
     ·分割与单次照射后P-gp 蛋白时程表达变化第46-47页
     ·分割与单次照射后MDR-1 基因检测第47-49页
第4章 讨 论第49-55页
   ·P-gp 糖蛋白表达对药物敏感的影响第49-50页
   ·p53 基因对MDR 表型的影响第50-52页
   ·p53 基因对耐药机制中相关蛋白表达的影响第52-53页
   ·放射治疗可抑制MDR1/P-gp 表达第53-54页
   ·研究展望第54-55页
第5章 结 论第55-56页
参考文献第56-65页
致谢第65-66页
攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果第66-67页
导师简介第67-68页
中文摘要第68-72页
Abstract第72-76页

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