| 内容提要 | 第1-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·自噬 | 第10-18页 |
| ·概述 | 第10-11页 |
| ·自噬的分类 | 第11-12页 |
| ·自噬的功能 | 第12页 |
| ·自噬的分子机制与调节通路 | 第12-13页 |
| ·自噬与凋亡 | 第13-15页 |
| ·自噬与肿瘤 | 第15-16页 |
| ·自噬与电离辐射 | 第16-18页 |
| ·Beclin1 基因 | 第18-22页 |
| ·概述 | 第18页 |
| ·Beclin1 与自噬 | 第18-19页 |
| ·Beclin1 与Bcl-2 | 第19-20页 |
| ·Beclin1 与肿瘤 | 第20-21页 |
| ·Beclin 1 基因在辐射诱导的自噬性细胞死亡中的作用 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-34页 |
| 1 主要试剂及器材 | 第22-24页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| 2 细胞培养 | 第24页 |
| ·细胞株 | 第24页 |
| ·细胞冻存及复苏 | 第24页 |
| 3 照射条件 | 第24页 |
| 4 电离辐射诱导自噬模型的构建与检测 | 第24-25页 |
| ·试剂配制 | 第24-25页 |
| ·操作步骤 | 第25页 |
| 5 Beclin1 过表达载体的构建 | 第25-31页 |
| ·主要材料 | 第25页 |
| ·主要方法 | 第25-31页 |
| 6 Beclin1 过表达细胞模型的建立 | 第31页 |
| 7 Beclin1 基因干扰细胞模型的建立 | 第31-32页 |
| ·试剂的配制 | 第31页 |
| ·磷酸钙共沉淀法转染 | 第31-32页 |
| 8 模型细胞生长曲线的绘制 | 第32页 |
| 9 蛋白质免疫印记法(Western Blot) | 第32-33页 |
| ·总蛋白提取 | 第32页 |
| ·蛋白浓度测定-标准曲线法 | 第32-33页 |
| ·Western Blot | 第33页 |
| 10 数据处理 | 第33-34页 |
| 第3章 实验结果 | 第34-50页 |
| 1 电离辐射诱导自噬的检测 | 第34-35页 |
| ·模型MCF7-PQN-GFP-LC3 的构建 | 第34页 |
| ·电离辐射下自噬的检测 | 第34-35页 |
| 2 电离辐射后Beclin1 基因的表达变化 | 第35-40页 |
| ·不同剂量下Beclin1 基因mRNA 水平的时程变化 | 第35-36页 |
| ·不同时间点Beclin1 基因mRNA 水平的量效变化 | 第36-38页 |
| ·Beclin1 基因在蛋白水平的检测 | 第38-40页 |
| 3 Beclin1 表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·人源Beclin1 基因片段的PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·pcDNA3.1(-)/Beclin1 重组质粒的构建 | 第41-42页 |
| 4 Beclin1 过表达模型的检测 | 第42-44页 |
| ·人卵巢癌SKOV3 细胞G418 的筛选浓度 | 第42页 |
| ·SKOV3-Beclin1 过表达模型的Western Blot 检测 | 第42-44页 |
| 5 Beclin1 基因沉默模型的检测 | 第44-45页 |
| ·人卵巢癌SKOV3 细胞puro 的筛选浓度 | 第44页 |
| ·SKOV3-Beclin1Ri 干扰模型的Western Blot 检测 | 第44-45页 |
| 6 Beclin1 基因对细胞生长影响 | 第45-47页 |
| ·Beclin1 过表达对SKOV3 生长的抑制作用 | 第45-46页 |
| ·Beclin1 干扰对SKOV3 生长的促进作用 | 第46-47页 |
| 7 模型细胞中电离辐射对Beclin1 基因表达的影响 | 第47-50页 |
| ·Beclin1 基因过表达后电离辐射对Beclin1 基因表达的影响. | 第47-48页 |
| ·Beclin1 基因干扰后电离辐射对Beclin1 基因表达的影 | 第48-50页 |
| 讨论 | 第50-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 导师简介 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 中文摘要 | 第63-65页 |
| Abstract | 第65-67页 |
