| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.1 研究背景 | 第13-15页 |
| 1.2 脂肪组织和脂肪细胞的分化研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 脂肪组织的分类 | 第15页 |
| 1.2.2 脂肪细胞增殖与分化 | 第15-21页 |
| 1.3 脂肪细胞甘油三脂脂解的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3.1 脂肪酶与甘油三酯水解 | 第22-23页 |
| 1.3.2 PAT 家族蛋白与甘油三酯水解 | 第23-24页 |
| 1.3.3 调控甘油三酯水解的主要通路 | 第24页 |
| 1.4 表达载体系统研究进展 | 第24-26页 |
| 1.4.1 非病毒表达载体系统 | 第24-25页 |
| 1.4.2 病毒表达载体系统 | 第25-26页 |
| 1.5 RNA 干扰研究进展 | 第26-27页 |
| 1.6 本研究的目标、意义和内容 | 第27-28页 |
| 1.6.1 研究目标和意义 | 第27页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 牛 ATGL 基因在牛脂肪细胞分化过程的中基因表达规律研究 | 第28-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第28-30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 2.2 结果 | 第30-32页 |
| 2.2.1 牛前体脂肪细胞形态学观察 | 第30页 |
| 2.2.2 油红 O 染色结果 | 第30-31页 |
| 2.2.3 Real-Time PCR 引物检测 | 第31-32页 |
| 2.2.4 ATGL 基因在脂肪细胞不同时间段的表达规律 | 第32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 牛 ATGL 基因重组腺病毒过表达载体的构建与鉴定 | 第34-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第34-37页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第34-37页 |
| 3.2 结果 | 第37-39页 |
| 3.2.1 ATGL 过表达载体的构建与鉴定 | 第37-39页 |
| 3.3 讨论 | 第39页 |
| 3.4 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 牛 ATGL 基因 shRNA 序列的筛选及其腺病毒载体的构建与鉴定 | 第40-48页 |
| 4.1 材料与方法 | 第40-43页 |
| 4.1.1 材料 | 第40页 |
| 4.1.2 方法 | 第40-43页 |
| 4.2 结果 | 第43-46页 |
| 4.2.1 shRNA 检测及 pENTR-U6-shRNA 表达载体构建 | 第43-44页 |
| 4.2.2 Ad-shRNA 病毒重组子的构建及鉴定 | 第44-45页 |
| 4.2.3 Ad-shRNA 腺病毒的包装、扩增及滴度测定 | 第45页 |
| 4.2.4 AD-shRNA 病毒有效性鉴定和筛选 | 第45-46页 |
| 4.3 讨论 | 第46-47页 |
| 4.4 小结 | 第47-48页 |
| 第五章 牛 ATGL 基因对牛脂肪细胞中甘油三脂积累的影响 | 第48-64页 |
| 5.1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第48页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 5.2 结果 | 第50-60页 |
| 5.2.1 Real-time PCR 引物检测 | 第50-51页 |
| 5.2.2 ATGL 重组腺病毒表达载体和干扰载体侵染和细胞形态学观察 | 第51-53页 |
| 5.2.3 ATGL 腺病毒处理后甘油三脂检测 | 第53-54页 |
| 5.2.4 脂肪细胞分化相关基因的 mRNA 表达情况 | 第54-56页 |
| 5.2.5 脂肪合成相关基因的 mRNA 表达情况 | 第56-59页 |
| 5.2.6 脂肪代谢相关基因的 mRNA 表达情况 | 第59-60页 |
| 5.3 讨论 | 第60-63页 |
| 5.3.1 下调 ATGL 表达量使脂肪细胞中甘油三酯的量增多、脂滴变明显 | 第60-61页 |
| 5.3.2 上调 ATGL 表达量使脂肪细胞中甘油三酯的量减少、脂滴数目变少 | 第61页 |
| 5.3.3 牛 ATGL 基因对脂肪细胞分化相关基因的调控作用分析 | 第61-62页 |
| 5.3.4 牛 ATGL 基因对脂肪合成与代谢相关基因的调控作用分析 | 第62-63页 |
| 5.4 小结 | 第63-64页 |
| 第六章 结论 | 第64-66页 |
| 6.1 实验结论 | 第64-65页 |
| 6.2 创新点 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 附录 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 作者简介 | 第86-87页 |
| 个人基本情况 | 第86页 |
| 学习经历 | 第86页 |
| 攻读博士学位期间发表文章情况 | 第86-87页 |
| 攻读博士学位期间获奖情况 | 第87页 |
