| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1 精原干细胞的研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1 SSCs的来源与精子发生 | 第10页 |
| 1.2 SSCs的增殖方式 | 第10-11页 |
| 1.3 SSCs增殖与分化的调节 | 第11-12页 |
| 1.3.1 激素与维生素对SSCs增殖与分化的调节 | 第11页 |
| 1.3.2 外源因子与基因表达对SSCs增殖与分化的调节 | 第11-12页 |
| 1.4 SSCs的生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.4.1 SSCs的数量 | 第12页 |
| 1.4.2 SSCs的形态学特征 | 第12-13页 |
| 1.4.3 SSCs的细胞周期 | 第13页 |
| 1.4.4 SSCs的碱性磷酸酶(AKP)活性 | 第13页 |
| 1.4.5 SSCs的分子标记 | 第13页 |
| 1.5 SSCs的应用前景 | 第13-14页 |
| 1.5.1 SSCs的冷冻保存 | 第13-14页 |
| 1.5.2 SSCs的移植 | 第14页 |
| 1.5.3 SSCs与转基因 | 第14页 |
| 2 SSCs的分离纯化与体外培养的研究进展 | 第14-17页 |
| 2.1 SSCs的分离纯化 | 第14-15页 |
| 2.2 SSCs的体外培养 | 第15-17页 |
| 2.2.1 温度对SSCs的体外培养的影响 | 第15-16页 |
| 2.2.2 基础培养基对SSCs的体外培养的影响 | 第16页 |
| 2.2.3 血清对SSCs的体外培养的影响 | 第16页 |
| 2.2.4 饲养层对SSCs的体外培养的影响 | 第16-17页 |
| 2.2.5 细胞因子对SSCs的体外培养的影响 | 第17页 |
| 2.3 SSCs的建系 | 第17页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 试验部分 | 第18-38页 |
| 第一部分 材料与方法 | 第18-26页 |
| 1 试验材料 | 第18-20页 |
| 1.1 试验番鸭胚胎 | 第18页 |
| 1.2 试验主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 1.3 试验主要试剂 | 第19页 |
| 1.4 试验主要试剂配制 | 第19-20页 |
| 2 试验方法 | 第20-26页 |
| 2.1 番鸭SSCs的分离与纯化 | 第20页 |
| 2.1.1 番鸭SSCs的分离 | 第20页 |
| 2.1.2 差速贴壁法分离纯化SSCs | 第20页 |
| 2.2 番鸭胚胎成纤维细胞(DEF)饲养层的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.1 番鸭DEF的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.2 番鸭DEF的传代 | 第21页 |
| 2.2.3 番鸭DEF饲养层的制备 | 第21页 |
| 2.3 番鸭Sertoli细胞饲养层的制备 | 第21-22页 |
| 2.3.1 番鸭Sertoli细胞的分离与纯化 | 第21页 |
| 2.3.2 番鸭Sertoli细胞饲养层的制备 | 第21-22页 |
| 2.4 番鸭SSCs体外培养体系的优化 | 第22-23页 |
| 2.4.1 饲养层对SSCs体外培养效果的影响 | 第22页 |
| 2.4.2 血清对SSCs体外培养效果的影响 | 第22页 |
| 2.4.3 细胞因子对SSCs体外培养效果的影响 | 第22-23页 |
| 2.5 番鸭SSCs的培养 | 第23页 |
| 2.5.1 SSCs的原代培养 | 第23页 |
| 2.5.2 SSCs的传代培养 | 第23页 |
| 2.6 番鸭SSCs的鉴定 | 第23-26页 |
| 2.6.1 形态学鉴定 | 第23页 |
| 2.6.2 碱性磷酸酶染色 | 第23-24页 |
| 2.6.3 特异表达基因的RT-PCR鉴定 | 第24-26页 |
| 2.7 数据统计 | 第26页 |
| 第二部分 结果与分析 | 第26-34页 |
| 1 分离、纯化的番鸭SSCs | 第26页 |
| 2 饲养层的制备 | 第26-27页 |
| 3 饲养层对番鸭SSCs体外培养效果的影响 | 第27-29页 |
| 4 血清对番鸭SSCs体外培养效果的影响 | 第29-30页 |
| 5 细胞因子对SSCs体外培养效果的影响 | 第30-32页 |
| 5.1 LIF对SSCs体外培养效果的影响 | 第30-31页 |
| 5.2 bFGF对SSCs体外培养效果的影响 | 第31页 |
| 5.3 SCF对SSCs体外培养效果的影响 | 第31-32页 |
| 5.4 GDNF对SSCs体外培养效果的影响 | 第32页 |
| 6 SSCs的鉴定 | 第32-34页 |
| 6.1 SSCs的形态学鉴定 | 第32-33页 |
| 6.2 SSCs的碱性磷酸酶染色 | 第33页 |
| 6.3 SSCs特异表达基因的鉴定 | 第33-34页 |
| 第三部分 讨论 | 第34-37页 |
| 1 两步酶消化法与差速贴壁法相结合分离、纯化番鸭SSCs | 第34页 |
| 2 饲养层对番鸭SSCs体外培养效果的影响 | 第34-35页 |
| 3 血清对番鸭SSCs体外培养效果的影响 | 第35-36页 |
| 4 细胞因子对番鸭SSCs体外培养效果的影响 | 第36-37页 |
| 5 番鸭SSCs的鉴定 | 第37页 |
| 第四部分 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 附录 | 第45页 |
