高表达耐热链霉菌acyB基因及其固定化发酵生产AIV研究
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 泰乐菌素简介 | 第10-12页 |
| 1.1.1 泰乐菌素的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.2 泰勒菌素的应用 | 第11-12页 |
| 1.1.3 泰乐菌素的应用局限性 | 第12页 |
| 1.2 乙酰异戊酰泰乐菌素的研究现状 | 第12-17页 |
| 1.2.1 乙酰异戊酰泰乐菌素的理化性质 | 第14页 |
| 1.2.2 乙酰异戊酰泰乐菌素的作用机理 | 第14页 |
| 1.2.3 乙酰异戊酰泰乐菌素的合成进展 | 第14-17页 |
| 1.3 固定化细胞技术概述 | 第17-21页 |
| 1.3.1 固定化方法 | 第17-19页 |
| 1.3.2 固定化材料 | 第19-20页 |
| 1.3.3 固定化技术在链霉菌上的应用 | 第20-21页 |
| 1.4 课题研究的目的、意义及研究内容 | 第21-23页 |
| 1.4.1 课题研究的目的和意义 | 第21页 |
| 1.4.2 课题研究的内容 | 第21-23页 |
| 第二章 耐热链霉菌acyB基因的高表达 | 第23-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 菌株及其保藏 | 第23-24页 |
| 2.1.2 质粒 | 第24页 |
| 2.1.3 PCR引物 | 第24-25页 |
| 2.1.4 培养基和试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 耐热链霉菌总DNA及质粒的提取 | 第27-29页 |
| 2.2.2 AcyB基因的克隆及重组质粒的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.3 重组菌株的构建 | 第32-35页 |
| 2.2.4 重组菌株的筛选和鉴定 | 第35-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-47页 |
| 2.3.1 总DNA及质粒提取验证 | 第37-38页 |
| 2.3.2 重组质粒RB201和RB139的确定 | 第38-41页 |
| 2.3.3 耐热链霉菌接合转移法的确定 | 第41-42页 |
| 2.3.4 耐受性分析 | 第42-45页 |
| 2.3.5 目标基因高表达对产物的影响 | 第45-47页 |
| 2.4 本章小结 | 第47-49页 |
| 第三章 耐热链霉菌固定化材料的选择 | 第49-59页 |
| 3.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 3.1.1 固定化材料 | 第49页 |
| 3.1.2 试剂 | 第49-50页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-53页 |
| 3.2.1 材料的处理 | 第50-51页 |
| 3.2.2 PUF材料改性 | 第51页 |
| 3.2.3 菌体和孢子的制备 | 第51-52页 |
| 3.2.4 耐热链霉菌固定化。 | 第52页 |
| 3.2.5 固定量和产物AIV浓度测定 | 第52-53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-57页 |
| 3.3.1 不同固定化载体对固定量的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.2 不同改性后的PUF材料对固定量的影响 | 第54-56页 |
| 3.3.3 最佳固定化时间的确定 | 第56-57页 |
| 3.4 本章小结 | 第57-59页 |
| 第四章 耐热链霉菌的发酵工艺研究 | 第59-67页 |
| 4.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 4.1.1 菌株及固定化载体 | 第59页 |
| 4.1.2 培养基和试剂 | 第59页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第59-60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-61页 |
| 4.2.1 发酵培养方式 | 第60页 |
| 4.2.2 发酵结果检测 | 第60-61页 |
| 4.3 实验结果 | 第61-66页 |
| 4.3.1 发酵中间体测定分析 | 第61-62页 |
| 4.3.2 发酵产物测定分析 | 第62-63页 |
| 4.3.3 发酵时间与产物AIV浓度的关系 | 第63-64页 |
| 4.3.4 实验结果 | 第64-66页 |
| 4.4 本章小结 | 第66-67页 |
| 第五章 结论与展望 | 第67-68页 |
| 5.1 结论 | 第67页 |
| 5.2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
