摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-13页 |
1.1 蒙古冰草及研究现状 | 第10页 |
1.2 P5CS研究进展 | 第10-11页 |
1.3 荧光定量PCR及内参基因 | 第11-13页 |
1.3.1 荧光定量PCR | 第11页 |
1.3.2 内参基因 | 第11-13页 |
1.4 本研究目的与意义 | 第13页 |
2 材料与方法 | 第13-20页 |
2.1 实验材料的培养与处理 | 第13-14页 |
2.2 实验仪器和试剂 | 第14页 |
2.2.1 主要的实验仪器 | 第14页 |
2.2.2 主要实验试剂 | 第14页 |
2.3 实验方法 | 第14-19页 |
2.3.1 蒙古冰草叶片中脯氨酸含量的测定 | 第14-15页 |
2.3.2 蒙古冰草叶片总RNA的提取和检测 | 第15页 |
2.3.3 cDNA的合成 | 第15-16页 |
2.3.4 引物设计 | 第16-17页 |
2.3.5 候选内参基因的普通PCR | 第17-18页 |
2.3.6 候选内参基因的荧光定量PCR | 第18页 |
2.3.7 蒙古冰草P5CS基因荧光定量PCR反应 | 第18-19页 |
2.4 数据分析 | 第19-20页 |
2.4.1 候选内参基因熔解曲线、扩增曲线和扩增效率分析 | 第19页 |
2.4.2 geNorm分析 | 第19-20页 |
2.4.3 NormFinder分析 | 第20页 |
2.4.4 叶片中游离脯氨酸含量结果分析 | 第20页 |
2.4.5 P5CS的表达量及其与脯氨酸含量的相关性分析 | 第20页 |
3 结果与分析 | 第20-28页 |
3.1 蒙古冰草叶片中脯氨酸的含量 | 第20-21页 |
3.2 蒙古冰草叶片总RNA提取 | 第21页 |
3.3 候选内参基因的普通PCR电泳检测 | 第21-22页 |
3.4 候选内参基因荧光定量PCR数据分析结果 | 第22-27页 |
3.4.1 内参基因的特异性表达 | 第22-25页 |
3.4.2 geNorm分析 | 第25-26页 |
3.4.3 NormFinder分析 | 第26页 |
3.4.4 蒙古冰草内参基因综合分析结果 | 第26-27页 |
3.5 P5CS基因表达分析 | 第27-28页 |
3.5.1 P5CS基因表达分析 | 第27页 |
3.5.2 P5CS基因的表达与脯氨酸含量的相关性 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-31页 |
4.1 内参基因的筛选 | 第28-29页 |
4.2 干旱胁迫下蒙古冰草叶片中脯氨酸含量变化分析 | 第29-30页 |
4.3 蒙古冰草干旱胁迫下P5CS基因的定量表达与叶片中脯氨酸含量的关系 | 第30-31页 |
5 结论 | 第31-32页 |
致谢 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-39页 |
附录 | 第39-42页 |
作者简介 | 第42页 |