CONTENTS | 第5-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-18页 |
1.1 禽类T淋巴细胞表面主要CD分子概述 | 第11-12页 |
1.1.1 CD3分子 | 第11页 |
1.1.2 CD4分子 | 第11-12页 |
1.1.3 CD8分子 | 第12页 |
1.2 禽类CD3分子研究进展 | 第12-14页 |
1.2.1 CD3基因结构的研究 | 第12-13页 |
1.2.2 CD3分子结构的研究 | 第13页 |
1.2.3 CD3分子功能的研究 | 第13-14页 |
1.2.4 禽CD3+T细胞发育及分布 | 第14页 |
1.3 各种CD分子的单克隆抗体的应用 | 第14-15页 |
1.3.1 CD单抗在理论研究中的应用 | 第14-15页 |
1.3.2 CD单抗在检测技术中的应用 | 第15页 |
1.4 DNA免疫制备单克隆抗体的研究进展 | 第15-17页 |
1.4.1 DNA免疫的机制 | 第16页 |
1.4.2 DNA免疫的方法 | 第16页 |
1.4.3 DNA免疫的优点 | 第16-17页 |
1.4.4 DNA免疫的应用前景 | 第17页 |
1.5 研究的目的及意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-32页 |
2.1 试验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 细胞及菌株 | 第18页 |
2.1.2 试验动物 | 第18页 |
2.1.3 试剂 | 第18-19页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第19页 |
2.1.5 细胞培养溶液 | 第19-20页 |
2.1.6 主要仪器 | 第20页 |
2.2 试验方法 | 第20-32页 |
2.2.1 鹅CD3ε基因的克隆与分析 | 第20-22页 |
2.2.2 鹅CDε胞外区基因的克隆、原核表达及抗原性鉴定 | 第22-25页 |
2.2.3 兔抗鹅CD3ε胞外区多克隆抗体的制备与鉴定 | 第25页 |
2.2.4 鹅CD3ε胞外区单克隆抗体的制备 | 第25-29页 |
2.2.5 鹅CD3ε胞外区单克隆抗体的鉴定 | 第29-30页 |
2.2.6 鹅CD3ε胞外区单克隆抗体的初步应用 | 第30-32页 |
3 结果 | 第32-50页 |
3.1 鹅CD3ε基因的克隆及生物信息学分析 | 第32-36页 |
3.1.1 鹅CD3ε基因的克隆 | 第32-33页 |
3.1.2 鹅CD3ε基因的生物信息学分析 | 第33-36页 |
3.2 鹅CD3ε胞外区基因的克隆、原核表达及抗原性鉴定 | 第36-38页 |
3.2.1 鹅CD3ε胞外区基因的扩增与鉴定 | 第36-37页 |
3.2.2 鹅CD3ω胞外区基因原核表达载体构建 | 第37页 |
3.2.3 鹅CD3ε胞外区基因在大肠杆菌中的诱导表达及蛋白纯化 | 第37-38页 |
3.3 兔抗鹅CD3ε胞外区多克隆抗体的制备、鉴定及纯化 | 第38-40页 |
3.3.1 兔抗鹅CD3ε胞外区多克隆抗体效价的检测 | 第38-39页 |
3.3.2 兔抗鹅CD3ε胞外区多克隆抗体的纯化及其Western blot鉴定 | 第39页 |
3.3.3 兔抗鹅CD3ε胞外区多克隆抗体的间接免疫荧光分析 | 第39-40页 |
3.4 抗鹅CD3ε链胞外区蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第40-46页 |
3.4.1 抗鹅CD3ε链胞外区蛋白单克隆抗体的制备 | 第40-42页 |
3.4.2 杂交瘤细胞的鉴定 | 第42-46页 |
3.5 抗鹅CD3ω链胞外区蛋白单克隆抗体的初步应用 | 第46-50页 |
3.5.1 流式细胞术检测鹅CD3~+T淋巴细胞 | 第46-47页 |
3.5.2 激光共聚焦法检测鹅CD3~+T淋巴细胞 | 第47-50页 |
4 讨论 | 第50-54页 |
4.1 东北白鹅CD3分子ε链的克隆与分析 | 第50-51页 |
4.1.1 东北白鹅CD3分子£链的克隆 | 第50页 |
4.1.2 东北白鹅CD3ε ORF的序列分析 | 第50-51页 |
4.2 东北白鹅CD3ε胞外区的表达及多克隆抗体的制备 | 第51页 |
4.3 单克隆抗体制备 | 第51-52页 |
4.3.1 免疫原的选择 | 第51-52页 |
4.3.2 杂交瘤细胞株的筛选方法 | 第52页 |
4.4 单克隆抗体的初步应用 | 第52-54页 |
4.4.1 流式细胞术检测鹅CD3~+T淋巴细胞 | 第52-53页 |
4.4.2 激光共聚焦法检测鹅CD3~+T淋巴细胞 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |