摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-10页 |
第1章 绪论 | 第10-16页 |
1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第10-12页 |
1.2 ASPP 蛋白家族研究概况 | 第12-14页 |
1.3 课题主要研究内容 | 第14-15页 |
1.4 技术路线图 | 第15-16页 |
第2章 材料与方法 | 第16-35页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第16-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第16页 |
2.1.2 实验试剂 | 第16-21页 |
2.1.3 实验仪器 | 第21-22页 |
2.2 实验方法和步骤 | 第22-35页 |
2.2.1 细胞复苏与传代培养 | 第22页 |
2.2.2 质粒提取与纯化 | 第22-24页 |
2.2.3 细胞质粒转染 | 第24页 |
2.2.4 细胞总蛋白提取 | 第24-25页 |
2.2.5 Brad-ford 法蛋白质浓度测定 | 第25-26页 |
2.2.6 细胞免疫荧光染色 | 第26-27页 |
2.2.7 蛋白质免疫印迹 | 第27-28页 |
2.2.8 细胞总 RNA 提取 | 第28-29页 |
2.2.9 半定量 RT-PCR | 第29页 |
2.2.10 Annexin V-FITC PI 染色法检测凋亡 | 第29-30页 |
2.2.11 PI 染色流式检测细胞周期 | 第30-31页 |
2.2.12 Luciferase reporter assay protocol | 第31-32页 |
2.2.13 IP(免疫共沉淀) | 第32-35页 |
第3章 iASPP 剪切对细胞凋亡和细胞周期的调控作用 | 第35-41页 |
3.1 iASPP 剪切对细胞凋亡的影响 | 第35-37页 |
3.2 iASPP 剪切对细胞周期的调控作用 | 第37-38页 |
3.3 NF-κB 抑制剂处理检测细胞凋亡 | 第38-39页 |
3.4 本章小结 | 第39-41页 |
第4章 iASPP 剪切对细胞凋亡调控的机制研究 | 第41-49页 |
4.1 iASPP 剪切对 iASPP 细胞内定位的影响 | 第41-44页 |
4.1.1 凋亡刺激促进 iASPP 进入细胞核 | 第41-42页 |
4.1.2 Caspase 剪切对 iASPP 在细胞内定位的影响 | 第42-44页 |
4.2 iASPP 剪切对 NF-κB 转录活性的影响 | 第44-45页 |
4.3 NF-κB 下游凋亡增殖相关基因表达水平检测 | 第45-48页 |
4.3.1 凋亡相关基因表达水平检测 | 第46-47页 |
4.3.2 细胞周期相关基因表达水平检测 | 第47-48页 |
4.4 本章小结 | 第48-49页 |
讨论 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第58-60页 |
致谢 | 第60页 |