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双酚A对稀有鮈鲫卵巢类固醇激素合成酶基因DNA甲基化影响的研究

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 文献综述第12-21页
    1.1 双酚A(BPA)第12-14页
        1.1.1 BPA简介第12页
        1.1.2 环境中的BPA第12-13页
        1.1.3 BPA的毒理效应第13-14页
    1.2 鱼类类固醇激素及其功能第14-17页
        1.2.1 鱼类重要的类固醇激素第14-15页
        1.2.2 类固醇激素合成酶基因第15-17页
    1.3 雌激素受体(ER)第17-18页
        1.3.1 ER的分子结构第17页
        1.3.2 ER作用机制第17-18页
        1.3.3 硬骨鱼类中ER研究进展第18页
    1.4 DNA甲基化第18-19页
        1.4.1 DNA甲基化及其调控机制第18-19页
        1.4.2 鱼类中DNA甲基化研究进展第19页
    1.5 试验动物稀有鮈鲫第19-20页
    1.6 研究目的与意义第20-21页
第二章 BPA对稀有鮈鲫类固醇激素合成的影响第21-31页
    2.1 试验材料第21页
        2.1.1 试验动物第21页
        2.1.2 主要试验仪器和试剂第21页
        2.1.3 主要溶液及其配制第21页
    2.2 试验方法第21-24页
        2.2.1 BPA暴露试验第21-22页
        2.2.2 形态学指标和卵巢组织学观察第22页
        2.2.3 血清中类固醇激素含量测定第22页
        2.2.4 总RNA的提取第22页
        2.2.5 cDNA的合成第22页
        2.2.6 定量引物设计与合成第22-23页
        2.2.7 qRT-PCR检测类固醇激素合成基因和雌激素受体基因的mRNA表达第23-24页
        2.2.8 数据处理分析第24页
    2.3 结果第24-28页
        2.3.1 BPA对稀有鮈鲫形态学指标的影响第24-25页
        2.3.2 BPA对稀有鮈鲫卵巢发育的影响第25-26页
        2.3.3 BPA对稀有鮈鲫血清中性激素水平的影响第26-27页
        2.3.4 BPA对卵巢类固醇合成基因mRNA表达的影响第27-28页
        2.3.5 BPA对卵巢ER基因mRNA表达的影响第28页
    2.4 讨论第28-30页
        2.4.1 BPA对卵巢发育的影响第28-29页
        2.4.2 BPA对类固醇激素合成的影响第29-30页
    2.5 小结第30-31页
第三章 BPA对稀有鮈鲫类固醇合成酶基因DNA甲基化的影响第31-51页
    3.1 试验材料第31页
        3.1.1 试验动物第31页
        3.1.2 主要试验仪器和试剂第31页
        3.1.3 主要溶液及其配制第31页
    3.2 试验方法第31-37页
        3.2.1 组织样品的采集第31页
        3.2.2 cyp11a1基因5’侧翼序列的克隆第31-33页
        3.2.3 染色质免疫共沉淀第33-34页
        3.2.4 DNA甲基化的检测第34-36页
        3.2.5 基因表达的检测第36-37页
        3.2.6 数据处理与分析第37页
    3.3 结果第37-47页
        3.3.1 类固醇合成基因5’侧翼分析第37-39页
        3.3.2 ER与类固醇合成基因5’侧翼区ERE的相互作用第39-41页
        3.3.3 BPA对类固醇合成酶基因5’侧翼甲基化水平的影响第41-45页
        3.3.4 BPA对甲基化转移酶基因和甲基化CpG结合蛋白基因表达的影响第45页
        3.3.5 DNA甲基化与类固醇合成酶基因表达的相关性分析第45-47页
    3.4 讨论第47-50页
        3.4.1 cyp11a1基因的5’侧翼分析第47-48页
        3.4.2 BPA对ERE-ER相互作用的影响第48页
        3.4.3 DNA甲基化调控类固醇合成酶基因的表达第48-50页
    3.5 小结第50-51页
结论和创新点第51-52页
    结论第51页
    创新点第51-52页
参考文献第52-63页
缩略词第63-64页
附录第64-73页
致谢第73-74页
作者简介第74页

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