| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 引言 | 第9-15页 |
| §1.1 EMT概念的提出 | 第9-11页 |
| 1.1.1 EMT参与早期胚胎发育过程 | 第10页 |
| 1.1.2 EMT与伤口愈合、细胞的纤维化 | 第10页 |
| 1.1.3 EMT与肿瘤侵袭和转移 | 第10-11页 |
| §1.2 肿瘤转移过程中EMT的分子作用机制 | 第11-13页 |
| 1.2.1 蛋白分子 | 第12页 |
| 1.2.2 生长因子和转录调节因子 | 第12-13页 |
| §1.3 本文主要内容 | 第13-15页 |
| 第二章 MicroRNA与癌症的研究进展 | 第15-24页 |
| §2.1 microRNAs的发现和作用机制 | 第15-17页 |
| 2.1.1 miRNAs的发现 | 第15-16页 |
| 2.1.2 microRNAs的加工产生和作用机制 | 第16-17页 |
| §2.2 癌症中miRNAs的异常表达 | 第17-19页 |
| 2.2.1 肿瘤组织中miRNA的差异表达的检测 | 第17-19页 |
| 2.2.2 miRNA的致癌和抑癌作用 | 第19页 |
| §2.3 与癌症细胞EMT过程相关miRNA的研究 | 第19-24页 |
| 2.3.1 调控癌细胞分离、侵润运动能力的miRNAs | 第21页 |
| 2.3.2 调控血管生成因子VEGF的miRNAs | 第21-22页 |
| 2.3.3 调控癌细胞血液循环的miRNAs | 第22页 |
| 2.3.4 调控癌细胞增殖生长的miRNAs | 第22-23页 |
| 2.3.5 调控癌细胞粘附机制的miRNAs | 第23-24页 |
| 第三章 靶调控CDHl的相关microRNA研究 | 第24-34页 |
| §3.1 EMT过程的标志性钙黏蛋白——E-cadherin | 第24-26页 |
| 3.1.1 E-cadherin蛋白的结构和作用功能 | 第25页 |
| 3.1.2 E-cadherin蛋白调控癌细胞侵袭和转移 | 第25-26页 |
| §3.2 靶调控CDH1的microRNAs的预测 | 第26-30页 |
| 3.2.1 miRNAs靶预测方法 | 第26页 |
| 3.2.2 预测靶调控CDH1的miRNAs | 第26-30页 |
| §3.3 在癌症中miR-106a、miR-376a、miR-485-5p研究进展 | 第30-34页 |
| 3.3.1 miR-106a的研究进展 | 第30-31页 |
| 3.3.2 miR-376a的研究进展 | 第31-32页 |
| 3.3.3 miR-485-5p的研究进展 | 第32-34页 |
| 第四章 实验材料和方法 | 第34-49页 |
| §4.1 实验材料 | 第34-38页 |
| 4.1.1 主要试剂和仪器设备 | 第34-35页 |
| 4.1.2 溶液配制 | 第35-37页 |
| 4.1.3 实验细胞系和质粒 | 第37-38页 |
| §4.2 实验方法 | 第38-49页 |
| 4.2.1 构建含有目的片段的报告质粒 | 第38-44页 |
| 4.2.2 细胞的培养与传代、复苏与冻存 | 第44-45页 |
| 4.2.3 双荧光素酶检测 | 第45-49页 |
| 第五章 实验结果与分析 | 第49-62页 |
| §5.1 目的片段PCR凝胶结果 | 第49-50页 |
| §5.2 重组质粒DNA鉴定 | 第50-53页 |
| 5.2.1 重组质粒测序鉴定 | 第50-52页 |
| 5.2.2 重组质粒酶切跑胶检测 | 第52-53页 |
| §5.3 双荧光素酶检测实验结果 | 第53-59页 |
| §5.4 肿瘤细胞中miRNAs参与EMT调控的生物学通路 | 第59-62页 |
| 5.4.1 已证实的miRNAs调控CDH1的生物路径 | 第59-60页 |
| 5.4.2 本文预测的miRNA调控肿瘤细胞EMT生物路径 | 第60-62页 |
| 总结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
