摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 前言 | 第10-25页 |
1.1 对虾白斑综合症病毒的研究概况 | 第10-11页 |
1.1.1 对虾白斑综合症病毒的发现及其命名 | 第10页 |
1.1.2 对虾白斑综合症病毒的大小和形态结构 | 第10-11页 |
1.2 对虾白斑综合症病毒(WSSV)基因组学研究概况 | 第11-15页 |
1.2.1 WSSV全基因组序列的测定 | 第11-13页 |
1.2.2 对虾白斑综合症病毒基因组的转录和调控 | 第13-15页 |
1.3 对虾白斑综合症病毒蛋白的功能研究 | 第15-18页 |
1.3.1 结构蛋白 | 第15-16页 |
1.3.2 对虾白斑综合症病毒极早期蛋白的研究现状 | 第16-18页 |
1.4 蛋白质磷酸化修饰的研究 | 第18-21页 |
1.4.1 蛋白质磷酸化简介 | 第18页 |
1.4.2 蛋白质磷酸化的主要类型及功能 | 第18-19页 |
1.4.3 研究蛋白质磷酸化的相关方法 | 第19-21页 |
1.5 蛋白激酶 | 第21-23页 |
1.5.1 蛋白激酶的结构 | 第21-22页 |
1.5.2 蛋白激酶分类 | 第22-23页 |
1.5.3 WSSV编码的蛋白激酶 | 第23页 |
1.6 本论文研究的内容、目的和意义 | 第23-25页 |
2 实验材料与方法 | 第25-37页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 实验动物 | 第25页 |
2.1.2 细胞及培养基 | 第25页 |
2.1.3 质粒与菌株 | 第25页 |
2.1.4 抗体 | 第25-26页 |
2.1.5 其他试剂 | 第26页 |
2.1.6 引物合成及测序 | 第26-27页 |
2.2 主要仪器 | 第27-28页 |
2.3 常用溶液和培养基的配置 | 第28-30页 |
2.4 实验方法 | 第30-37页 |
2.4.1 WSSV病毒粒子的增殖和纯化 | 第30页 |
2.4.2 病毒膜蛋白和核衣壳蛋白的制备 | 第30-31页 |
2.4.3 WSSV基因组的提取 | 第31页 |
2.4.4 克隆的构建 | 第31-34页 |
2.4.5 重组质粒的原核表达 | 第34-35页 |
2.4.6 Western Blot分析 | 第35页 |
2.4.7 重组质粒的真核表达 | 第35-36页 |
2.4.8 细胞的固定和免疫荧光 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-55页 |
3.1 WSV083能否介导VP28/VP19的磷酸化 | 第37-41页 |
3.1.1 VP28/VP19的磷酸化修饰 | 第37-38页 |
3.1.2 WSV083体外不能介导VP28和VP19的磷酸化修饰 | 第38-41页 |
3.2 WSV083的自身磷酸化 | 第41-44页 |
3.2 1 WSV083的磷酸化修饰 | 第41页 |
3.2.2 WSV083的自身磷酸化修饰 | 第41-44页 |
3.3 WSV083磷酸化位点的分析 | 第44-53页 |
3.3.1 WSV083磷酸化位点的初筛 | 第44-49页 |
3.3.2 WSV083的定点突变 | 第49-53页 |
3.4 WSV083的细胞定位分析 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
致谢 | 第64页 |