快速灵敏检测热原的稳定细胞系的开发与研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-35页 |
| 1.1 选题的背景和意义 | 第13-15页 |
| 1.1.1 选题背景 | 第13-14页 |
| 1.1.2 选题意义 | 第14-15页 |
| 1.2 文献综述 | 第15-33页 |
| 1.2.1 热原简介 | 第15-19页 |
| 1.2.2 热原检测方法 | 第19-23页 |
| 1.2.3 细胞系检测法的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.2.4 热原反应的分子机理 | 第24-30页 |
| 1.2.5 荧光素酶报告系统 | 第30-33页 |
| 1.2.6 慢病毒系统 | 第33页 |
| 1.3 研究内容与预期结果 | 第33-35页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第33-34页 |
| 1.3.2 预期结果 | 第34-35页 |
| 第2章 稳定细胞系的开发与研究 | 第35-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第35页 |
| 2.1.2 质粒 | 第35页 |
| 2.1.3 常用试剂配制 | 第35-36页 |
| 2.1.4 抗体与其它试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-44页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.2.2 瞬时转染 | 第39-40页 |
| 2.2.3 双荧光素酶报告基因实验 | 第40页 |
| 2.2.4 慢病毒载体的构建 | 第40页 |
| 2.2.5 慢病毒的包装和筛选 | 第40-41页 |
| 2.2.6 单克隆细胞的分选和选择 | 第41-42页 |
| 2.2.7 RNA提取和反转 | 第42-43页 |
| 2.2.8 内毒素刺激实验 | 第43页 |
| 2.2.9 酵母多糖刺激实验 | 第43页 |
| 2.2.10 流式细胞术 | 第43页 |
| 2.2.11 LAL实验 | 第43-44页 |
| 2.2.12 数据分析 | 第44页 |
| 2.3 实验结果 | 第44-55页 |
| 2.3.1 细胞表面TLR4的表达 | 第44-45页 |
| 2.3.2 不同细胞对LPS应答的反应 | 第45-46页 |
| 2.3.3 慢病毒质粒的构建 | 第46-47页 |
| 2.3.4 慢病毒系统构建稳定细胞系 | 第47-48页 |
| 2.3.5 报告细胞的筛选和活性测定 | 第48-51页 |
| 2.3.6 NF-κB/IFN-β基因的验证 | 第51-52页 |
| 2.3.7 报告细胞与LAL的比较 | 第52-53页 |
| 2.3.8 报告细胞高表达TLR4 | 第53-54页 |
| 2.3.9 酵母多糖刺激报告细胞 | 第54-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-59页 |
| 第3章 总结与展望 | 第59-63页 |
| 3.1 总结 | 第59-60页 |
| 3.2 展望 | 第60-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 在读期间发表论文及其他研究成果 | 第73页 |
| 待发表论文及其他研究成果 | 第73页 |
| 硕士期间获得的奖励 | 第73页 |
