| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12页 |
| 第一章 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 芍药概述 | 第13页 |
| 1.2 芍药种子在解除休眠方面的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.3 植物激素在种子休眠与萌发中的作用机制 | 第14-17页 |
| 1.3.1 脱落酸在种子休眠与萌发中的作用机制 | 第14-15页 |
| 1.3.2 赤霉素在种子休眠与萌发中的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.3.3 生长素在种子休眠与萌发中的作用机制 | 第16-17页 |
| 1.3.4 其他植物激素在种子休眠与萌发中的作用机制 | 第17页 |
| 1.4 生长素响应基因的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4.1 生长素响应基因的生物信息学特征 | 第17页 |
| 1.4.2 生长素响应基因的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究的目的意义及技术路线 | 第18-20页 |
| 1.5.1 本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 1.5.2 本研究的主要内容和技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 PlSAURs基因表达分析 | 第20-26页 |
| 2.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 生化试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第20-21页 |
| 2.2.2 植物材料处理及获取 | 第21页 |
| 2.2.3 芍药种子总RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.4 反转录合成第一链cDNA | 第22-23页 |
| 2.2.5 实时荧光定量RT-PCR检测 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-25页 |
| 2.3.1 芍药种子总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.3.2 芍药种子反转录合成第一链cDNA | 第24页 |
| 2.3.3 PlSAURs在芍药种子不同时期中的表达 | 第24-25页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第25-26页 |
| 2.4.1 小结 | 第25页 |
| 2.4.2 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 PlSAURs基因的克隆及序列分析 | 第26-51页 |
| 3.1 试验材料 | 第26-27页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 3.1.2 菌株及生化试剂 | 第26页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第26页 |
| 3.1.4 培养基(液、固)配制 | 第26页 |
| 3.1.5 引物设计 | 第26-27页 |
| 3.2 试验方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 芍药种子总RNA的提取 | 第27页 |
| 3.2.2 反转录合成第一链cDNA | 第27页 |
| 3.2.3 PlSAURs基因PCR扩增 | 第27页 |
| 3.2.4 PCR产物的切胶回收 | 第27-28页 |
| 3.2.5 目的片段与克隆载体连接 | 第28页 |
| 3.2.6 连接产物转化大肠杆菌 | 第28页 |
| 3.2.7 筛取阳性克隆及菌落PCR验证 | 第28-29页 |
| 3.2.8 摇菌及菌液测定 | 第29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-49页 |
| 3.3.1 芍药PlSAURs基因的获得 | 第29-30页 |
| 3.3.2 菌落PCR检测 | 第30页 |
| 3.3.3 芍药PlSAURs基因核苷酸序列分析 | 第30-33页 |
| 3.3.4 芍药PlSAURs基因氨基酸序列分析 | 第33-38页 |
| 3.3.5 芍药PlSAURs基因编码的蛋白质结构分析 | 第38-49页 |
| 3.3.6 芍药PlSAURs基因的亚细胞定位预测 | 第49页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第49-51页 |
| 3.4.1 小结 | 第49-50页 |
| 3.4.2 讨论 | 第50-51页 |
| 第四章 PlSAURs基因表达载体的构建 | 第51-60页 |
| 4.1 试验材料 | 第51页 |
| 4.1.1 菌体及载体 | 第51页 |
| 4.1.2 酶及生化试剂 | 第51页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第51页 |
| 4.1.4 培养基(液、固)配制 | 第51页 |
| 4.2 试验方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 设计引物 | 第51-52页 |
| 4.2.2 重组子pGM-PlSAURs质粒提取 | 第52页 |
| 4.2.3 pBI121空载质粒提取 | 第52页 |
| 4.2.4 制备DNA目的片段 | 第52-53页 |
| 4.2.5 制备线性化表达载体 | 第53页 |
| 4.2.6 构建pBI121-PlSAURs表达载体 | 第53-54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-59页 |
| 4.3.1 DNA目的片段的制备 | 第56页 |
| 4.3.2 线性化表达载体的制备 | 第56-57页 |
| 4.3.3 表达载体pBI121-PlSAURs的构建及鉴定 | 第57-59页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第59-60页 |
| 4.4.1 小结 | 第59页 |
| 4.4.2 讨论 | 第59-60页 |
| 第五章 PlSAURs基因对拟南芥的转化 | 第60-67页 |
| 5.1 试验材料 | 第60页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第60页 |
| 5.1.2 菌株及生化试剂 | 第60页 |
| 5.1.3 培养基(液、固)及化学试剂配制 | 第60页 |
| 5.2 试验方法 | 第60-63页 |
| 5.2.1 农杆菌的转化及其鉴定 | 第60-61页 |
| 5.2.2 花序浸染法转化拟南芥 | 第61页 |
| 5.2.3 转基因拟南芥的鉴定 | 第61-63页 |
| 5.3 结果与分析 | 第63-65页 |
| 5.3.1 pBI121-PlSAURs农杆菌转化及鉴定 | 第63-64页 |
| 5.3.2 转基因拟南芥的获取 | 第64页 |
| 5.3.3 转基因拟南芥PCR检测 | 第64-65页 |
| 5.3.4 转基因拟南芥RT-PCR检测 | 第65页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第65-67页 |
| 5.4.1 小结 | 第65页 |
| 5.4.2 讨论 | 第65-67页 |
| 第六章 结论与展望 | 第67-69页 |
| 6.1 全文结论 | 第67页 |
| 6.1.1 芍药PlSAURs基因的表达特性 | 第67页 |
| 6.1.2 芍药PlSAURs基因的结构分析 | 第67页 |
| 6.1.3 芍药PlSAURs基因的功能分析 | 第67页 |
| 6.2 展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第75-76页 |
