| 前言 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 中英缩略词表 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-31页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-29页 |
| 1.1.1 人类免疫缺陷病毒与艾滋病流行现状 | 第11-14页 |
| 1.1.2 病毒辅助因子与宿主限制因子相互作用的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.1.3 CUL4A-DDB1(DCAF1)E3泛素连接酶 | 第15-18页 |
| 1.1.4 病毒因子Vpx蛋白研究进展 | 第18-21页 |
| 1.1.5 SAMHD1蛋白研究现状 | 第21-23页 |
| 1.1.6 Vpr蛋白功能的研究进展 | 第23-25页 |
| 1.1.7 HLTF蛋白研究进展 | 第25-27页 |
| 1.1.8 锌离子及锌离子螯合剂TPEN | 第27-29页 |
| 1.2 主要研究内容及重要意义 | 第29-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-51页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第31-37页 |
| 2.1.1 感受态细胞株和细胞系 | 第31页 |
| 2.1.2 质粒构建 | 第31-33页 |
| 2.1.3 抗体 | 第33-34页 |
| 2.1.4 主要化学试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.5 引物合成和测序 | 第35-36页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-51页 |
| 2.2.2 一般PCR反应 | 第37页 |
| 2.2.3 氨基酸定点突变PCR反应 | 第37-39页 |
| 2.2.4 DNA凝胶回收 | 第39页 |
| 2.2.5 T4酶连接反应 | 第39-40页 |
| 2.2.6 试剂盒法提取质粒DNA（以无内毒素小提质粒为例） | 第40-41页 |
| 2.2.7 真核细胞培养 | 第41页 |
| 2.2.8 HEK 293T贴壁细胞Lipo2000转染法（以12孔板为例） | 第41-42页 |
| 2.2.9 收集分泌的病毒及检测方法 | 第42-43页 |
| 2.2.10 带有HA/Flag标签蛋白的免疫共沉淀实验 | 第43-44页 |
| 2.2.11 蛋白质免疫印迹法及其定量分析（Western Blot） | 第44-45页 |
| 2.2.12 细胞毒性分析 | 第45-47页 |
| 2.2.13 流式细胞分析仪检测G2周期阻滞 | 第47-48页 |
| 2.2.14 细胞核与细胞质分离实验（12孔板为例） | 第48-49页 |
| 2.2.15 蛋白结构模型模拟 | 第49页 |
| 2.2.16 数据分析 | 第49-51页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第51-101页 |
| 3.1 病毒蛋白Vpx锌结合功能区在其拮抗宿主限制因子SAMHD1中的作用机制 | 第51-70页 |
| 3.1.1 锌结合功能区在HIV/SIV Vpx蛋白进化过程中是高度保守的 | 第51-53页 |
| 3.1.2 锌离子结合区对Vpx降解人源SAMHD1蛋白的功能至关重要 | 第53-57页 |
| 3.1.3 锌离子结合功能区对Vpx_(mac)蛋白拮抗宿主限制因子SAMHD1促进慢病毒SIVmac在单核巨噬细胞内的复制能力具有重要作用 | 第57-63页 |
| 3.1.4 锌离子结合功能区影响Vpx功能的作用机制研究 | 第63-69页 |
| 3.1.5 实验结果讨论 | 第69-70页 |
| 3.1.6 小结 | 第70页 |
| 3.2 锌离子螯合剂TPEN抑制Vpx功能的作用机制研究 | 第70-84页 |
| 3.2.1 TPEN能够抑制Vpx诱导的SAMHD1的降解 | 第71-73页 |
| 3.2.2 TPEN抑制Vpx依赖的SIV病毒在巨噬细胞中感染能力 | 第73-78页 |
| 3.2.3 TPEN抑制Vpx与DCAF1之间结合 | 第78-83页 |
| 3.2.4 实验讨论 | 第83页 |
| 3.2.5 小结 | 第83-84页 |
| 3.3 锌离子结合区对Vpr挟持CRL4（DCAF1）E3连接酶具有重要作用 | 第84-92页 |
| 3.3.1 HHCH高保守功能区对Vpr降解HLTF蛋白至关重要 | 第85-87页 |
| 3.3.2 HHCH高保守功能区影响了Vpr与DCAF1的结合 | 第87-88页 |
| 3.3.3 HHCH功能区位点突变不影响Vpr在细胞内的定位 | 第88-89页 |
| 3.3.4 HHCH高保守功能区不影响Vpr二聚体/低聚体的形成 | 第89-91页 |
| 3.3.5 实验讨论 | 第91页 |
| 3.3.6 小结 | 第91-92页 |
| 3.4 锌离子螯合剂TPEN抑制Vpr功能的作用机制 | 第92-101页 |
| 3.4.1 TPEN抑制Vpr与DCAF1之间的结合 | 第92-93页 |
| 3.4.2 TPEN抑制Vpr诱导的HLTF的降解 | 第93-94页 |
| 3.4.3 TPEN抑制Vpr引起的细胞G2周期阻滞 | 第94-98页 |
| 3.4.5 实验讨论 | 第98-99页 |
| 3.4.6 小结 | 第99-101页 |
| 第四章 结论 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-117页 |
| 作者简介以及所取得的科研成果 | 第117-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
