中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
研究背景和总体研究思路 | 第13-15页 |
一、膀胱尿路上皮癌基因表达谱的初步研究 | 第15-36页 |
引言 | 第15页 |
摘要 | 第15页 |
1.1 对象和方法 | 第15-22页 |
1.1.1 试剂与仪器 | 第15-16页 |
1.1.2 膀胱癌标本的获取 | 第16页 |
1.1.3 实验原理及步骤 | 第16-22页 |
1.2 结果 | 第22-29页 |
1.3 讨论 | 第29-35页 |
1.4 小结 | 第35-36页 |
二、MAP4K4在膀胱癌细胞株及膀胱癌组织中的表达 | 第36-55页 |
引言 | 第36页 |
摘要 | 第36页 |
2.1 材料 | 第36-38页 |
2.1.1 组织标本 | 第36页 |
2.1.2 主要试剂及耗材 | 第36-37页 |
2.1.3 主要仪器 | 第37-38页 |
2.2 方法 | 第38-45页 |
2.2.1 RT-PCR | 第38-40页 |
2.2.2 Western blot法检测膀胱癌及癌旁组织MAP4K4蛋白的表达 | 第40-43页 |
2.2.3 免疫组化法检测膀胱癌组织MAP4K4蛋白的表达 | 第43-45页 |
2.3 结果 | 第45-52页 |
2.3.1 膀胱癌及癌旁组织中MAP4K4 mRNA的表达 | 第45-47页 |
2.3.2 膀胱癌及癌旁组织中MAP4K4蛋白的表达 | 第47页 |
2.3.3 石蜡包埋膀胱尿路上皮癌组织中MAP4K4蛋白的表达 | 第47-52页 |
2.4 讨论 | 第52-54页 |
2.4.1 MAP4K4在膀胱癌和癌旁组织中的表达情况 | 第52页 |
2.4.2 MAP4K4在膀胱癌不同临床病理参数中的表达情况 | 第52-54页 |
2.5 小结 | 第54-55页 |
三、MAP4K4对膀胱癌细胞生物学功能的影响 | 第55-70页 |
引言 | 第55页 |
摘要 | 第55页 |
3.1 材料 | 第55-57页 |
3.1.1 病毒颗粒和细胞株 | 第55页 |
3.1.2 主要试剂 | 第55-56页 |
3.1.3 主要仪器 | 第56-57页 |
3.2 方法 | 第57-61页 |
3.2.1 细胞培养 | 第57页 |
3.2.2 慢病毒包装的质粒载体和4对干扰序列 | 第57-58页 |
3.2.3 嘌呤霉素浓度梯度测试 | 第58-59页 |
3.2.4 细胞转染 | 第59页 |
3.2.5 稳转细胞的MAP4K4基因mRNA表达qPCR检测 | 第59页 |
3.2.6 稳转细胞的MAP4K4基因蛋白表达Western blot检测 | 第59-60页 |
3.2.7 稳转细胞MTT法检测细胞增殖 | 第60页 |
3.2.8 稳转细胞Transwell法检测细胞侵袭 | 第60-61页 |
3.2.9 Annexin V/PI检测细胞凋亡 | 第61页 |
3.3 结果 | 第61-65页 |
3.3.1 MAP4K4靶向干扰后细胞形态学变化 | 第62页 |
3.3.2 qRT-PCR和Western-blot检测干扰效率 | 第62-63页 |
3.3.3 MTT结果 | 第63页 |
3.3.4 Transwell结果 | 第63-64页 |
3.3.5 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第64-65页 |
3.4 讨论 | 第65-69页 |
3.4.1 MAP4K4基因对T24膀胱癌细胞生物学活性的影响 | 第66页 |
3.4.2 MAP4K4在膀胱癌中可能的信号传导通路 | 第66-69页 |
3.5 小结 | 第69-70页 |
全文结论 | 第70-71页 |
论文创新点 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第78-79页 |
综述一 | 第79-86页 |
综述一参考文献 | 第84-86页 |
综述二 | 第86-95页 |
综述二参考文献 | 第92-95页 |
致谢 | 第95页 |