摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
目录 | 第9-12页 |
0 前言 | 第12-30页 |
0.1 抗细菌感染药物研究现状 | 第12-13页 |
0.2 细菌群体感应系统概述 | 第13-22页 |
0.2.1 革兰氏阴性菌 AHL 群体感应系统 | 第14-19页 |
0.2.2 革兰氏阳性菌群体感应系统 | 第19-20页 |
0.2.3 细菌种间 AI-2 群体感应系统 | 第20-21页 |
0.2.4 AI-3 群体感应系统 | 第21-22页 |
0.3 细菌群体感应抑制剂的筛选 | 第22-28页 |
0.3.1 细菌群体感应抑制剂的筛选方法 | 第22-24页 |
0.3.2 天然产物来源的细菌群体感应抑制剂 | 第24-27页 |
0.3.3 合成化合物来源的细菌群体感应抑制剂 | 第27-28页 |
0.3.4 细菌群体感应淬灭酶 | 第28页 |
0.4 以干扰细菌群体感应系统为靶标开发新型抗菌药物 | 第28-29页 |
0.5 本文的研究内容及意义 | 第29-30页 |
1 海洋微生物产生的群体感应抑制剂的筛选及其活性评价 | 第30-60页 |
1.1 实验材料、仪器及试剂 | 第30-34页 |
1.1.1 实验样品及试剂来源 | 第30-31页 |
1.1.2 主要实验仪器 | 第31页 |
1.1.3 培养基与实验用溶液的配置 | 第31-33页 |
1.1.4 筛选模型与使用菌株 | 第33-34页 |
1.2 实验方法与步骤 | 第34-41页 |
1.2.1 采集样品 | 第34页 |
1.2.2 样品处理 | 第34页 |
1.2.3 海洋微生物发酵粗提物的制备 | 第34-35页 |
1.2.4 细菌群体感应抑制剂筛选方法 | 第35页 |
1.2.5 生物自显影 TLC-CV026 检测方法 | 第35页 |
1.2.6 真菌基因组的提取 | 第35-36页 |
1.2.7 CaCl2法制备大肠杆菌 DH5α感受态细胞 | 第36页 |
1.2.8 质粒的提取 | 第36页 |
1.2.9 海洋真菌 QF046 的种属鉴定 | 第36-37页 |
1.2.10 化合物的分离纯化 | 第37-38页 |
1.2.11 细菌生长曲线的绘制 | 第38页 |
1.2.12 紫色杆菌紫色菌素产量的检测 | 第38-39页 |
1.2.13 紫色杆菌 QS 调控基因表达的检测 (RT-PCR) | 第39-41页 |
1.3 实验结果 | 第41-59页 |
1.3.1 样品采集 | 第41页 |
1.3.2 海洋真菌、放线菌及酵母菌菌株的分离纯化 | 第41-42页 |
1.3.3 抗革兰氏阴性菌株群体感应活性菌株的筛选 | 第42页 |
1.3.4 真菌 QF046 活性成分的初步分析及其与已发现活性化合物的排重 | 第42-45页 |
1.3.5 基于 18S rDNA 序列的真菌 QF046 种属鉴定及其系统发育进化树 | 第45-47页 |
1.3.6 真菌 QF046 产生的群体感应抑制剂的追踪与分离纯化 | 第47-51页 |
1.3.7 化合物 LM05 的 HPLC 纯度分析与初步活性检测 | 第51-52页 |
1.3.8 活性化合物 LM05 的结构解析 | 第52-56页 |
1.3.9 化合物 LM05 的活性分析 | 第56-59页 |
1.4 小结与讨论 | 第59-60页 |
2 中药中细菌群体感应抑制剂的筛选及其活性评价 | 第60-81页 |
2.1 实验材料、仪器及试剂 | 第60-62页 |
2.1.1 实验材料 | 第60页 |
2.1.2 实验仪器 | 第60-61页 |
2.1.3 实验用培养基与试剂 | 第61-62页 |
2.1.4 筛选模型与使用菌株 | 第62页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第62-65页 |
2.2.1 中药材提取物的制备 | 第62页 |
2.2.2 中药丁香的处理方法 | 第62页 |
2.2.3 化合物对细菌最小抑菌浓度 MIC 的检测 | 第62-63页 |
2.2.4 铜绿假单胞菌弹性蛋白酶活性的检测 | 第63页 |
2.2.5 铜绿假单胞菌绿脓菌素产量的检测 | 第63页 |
2.2.6 铜绿假单胞菌生物被膜的定量检测 | 第63-64页 |
2.2.7 铜绿假单胞菌 swarming 运动的检测 | 第64页 |
2.2.8 丁香酚对大肠杆菌异源表达的 las 系统和 pqs 系统影响的检测 | 第64-65页 |
2.2.9 铜绿假单胞菌 QS 调控基因表达的检测(RT-PCR) | 第65页 |
2.3 实验结果 | 第65-79页 |
2.3.1 抗细菌群体感应中药粗提物的初步筛选 | 第65-66页 |
2.3.2 丁香粗提物活性的模型检测 | 第66-67页 |
2.3.3 丁香粗提物的活性成分分析 | 第67-69页 |
2.3.4 丁香酚为丁香粗提物活性成分的进一步验证 | 第69-70页 |
2.3.5 丁香抗细菌群体感应活性成分丁香酚的活性评价 | 第70-79页 |
2.4 小结与讨论 | 第79-81页 |
3 丁香酚及其结构类似物抗细菌群体感应的活性比较 | 第81-92页 |
3.1 实验材料、仪器及试剂 | 第81页 |
3.2 实验方法与步骤 | 第81页 |
3.3 实验结果 | 第81-91页 |
3.3.1 丁香粗提物中另一个抗细菌群体感应抑制剂的发现与分离纯化 | 第81-85页 |
3.3.2 乙酸丁香酚酯与丁香酚的活性比较 | 第85-90页 |
3.3.3 丁香酚甲醚与丁香酚的活性比较 | 第90-91页 |
3.4 小结与讨论 | 第91-92页 |
4 总结与展望 | 第92-94页 |
4.1 成果总结 | 第92-93页 |
4.2 展望 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
个人简介 | 第100页 |
在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第100-101页 |