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松落针病病原的快速分子检测技术研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
前言第9-10页
1 文献综述第10-22页
   ·松落针病研究现状第10-11页
   ·真菌分类鉴定的研究现状第11-12页
   ·散斑壳属真菌发病规律及生物学特性研究现状第12-13页
   ·传统的病原真菌检测诊断技术第13-16页
     ·形态学诊断检验第13页
     ·分离培养检验第13-15页
     ·过筛检验第15页
     ·比重检验第15页
     ·染色检验第15页
     ·洗涤检验第15-16页
     ·保湿萌芽检验第16页
   ·分子生物学技术在病原菌检测鉴定上的应用现状第16-19页
   ·引物设计的原理及原则第19-22页
     ·引物设计原理第19页
     ·引物设计原则第19-21页
     ·常用引物设计软件第21-22页
   ·研究意义与创新第22页
2 试验材料与方法第22-29页
   ·试验区概况第22-23页
   ·样品采集及预处理第23页
   ·试验方法第23-29页
     ·病原菌的分离与鉴定第23页
     ·病原菌的DNA提取及ITS区测序第23-25页
     ·特异引物设计筛选及PCR反应体系优化第25-26页
     ·基因组DNA提取第26-29页
     ·特异引物PCR扩增及测序第29页
3 结果及分析第29-41页
   ·病原菌分离鉴定及ITS区测序第29-32页
     ·松针散斑壳形态鉴定第29-30页
     ·形态鉴定分析第30-31页
     ·松针散斑壳DNA提取及ITS测序第31页
     ·测序结果分析第31-32页
   ·引物设计结果及筛选第32-34页
   ·PCR反应体系优化第34-36页
     ·引物退火温度优化第34页
     ·PCR反应体系优化第34-35页
     ·PCR反应优化分析第35-36页
   ·总DNA提取第36-37页
     ·总DNA提取效果第36页
     ·DNA提取分析第36-37页
   ·特异扩增效果及测序第37-41页
     ·扩增及测序结果第37-39页
     ·试验采样分析第39-40页
     ·扩增试验分析第40页
     ·测序结果分析第40-41页
4 结论与讨论第41-43页
   ·结论第41页
   ·讨论第41-43页
参考文献第43-48页
附录1:DNAStar设计引物第48-49页
附录2:PCR产物测序结果第49-60页
附录3:胶回收产物测序结果第60-68页
致谢第68页

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