松落针病病原的快速分子检测技术研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·松落针病研究现状 | 第10-11页 |
| ·真菌分类鉴定的研究现状 | 第11-12页 |
| ·散斑壳属真菌发病规律及生物学特性研究现状 | 第12-13页 |
| ·传统的病原真菌检测诊断技术 | 第13-16页 |
| ·形态学诊断检验 | 第13页 |
| ·分离培养检验 | 第13-15页 |
| ·过筛检验 | 第15页 |
| ·比重检验 | 第15页 |
| ·染色检验 | 第15页 |
| ·洗涤检验 | 第15-16页 |
| ·保湿萌芽检验 | 第16页 |
| ·分子生物学技术在病原菌检测鉴定上的应用现状 | 第16-19页 |
| ·引物设计的原理及原则 | 第19-22页 |
| ·引物设计原理 | 第19页 |
| ·引物设计原则 | 第19-21页 |
| ·常用引物设计软件 | 第21-22页 |
| ·研究意义与创新 | 第22页 |
| 2 试验材料与方法 | 第22-29页 |
| ·试验区概况 | 第22-23页 |
| ·样品采集及预处理 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-29页 |
| ·病原菌的分离与鉴定 | 第23页 |
| ·病原菌的DNA提取及ITS区测序 | 第23-25页 |
| ·特异引物设计筛选及PCR反应体系优化 | 第25-26页 |
| ·基因组DNA提取 | 第26-29页 |
| ·特异引物PCR扩增及测序 | 第29页 |
| 3 结果及分析 | 第29-41页 |
| ·病原菌分离鉴定及ITS区测序 | 第29-32页 |
| ·松针散斑壳形态鉴定 | 第29-30页 |
| ·形态鉴定分析 | 第30-31页 |
| ·松针散斑壳DNA提取及ITS测序 | 第31页 |
| ·测序结果分析 | 第31-32页 |
| ·引物设计结果及筛选 | 第32-34页 |
| ·PCR反应体系优化 | 第34-36页 |
| ·引物退火温度优化 | 第34页 |
| ·PCR反应体系优化 | 第34-35页 |
| ·PCR反应优化分析 | 第35-36页 |
| ·总DNA提取 | 第36-37页 |
| ·总DNA提取效果 | 第36页 |
| ·DNA提取分析 | 第36-37页 |
| ·特异扩增效果及测序 | 第37-41页 |
| ·扩增及测序结果 | 第37-39页 |
| ·试验采样分析 | 第39-40页 |
| ·扩增试验分析 | 第40页 |
| ·测序结果分析 | 第40-41页 |
| 4 结论与讨论 | 第41-43页 |
| ·结论 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录1:DNAStar设计引物 | 第48-49页 |
| 附录2:PCR产物测序结果 | 第49-60页 |
| 附录3:胶回收产物测序结果 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68页 |