中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-27页 |
1 猪a干扰素概述 | 第7-13页 |
·IFN的发现及命名 | 第7页 |
·IFN的产生与分类 | 第7-8页 |
·IFNa的基因及分子结构 | 第8-9页 |
·IFNa的理化特性 | 第9页 |
·IFNa的生物学活性和作用机理 | 第9-12页 |
·IFNa的研究进展及应用 | 第12-13页 |
2 猪细小病毒病概述 | 第13-20页 |
·猪细小病毒病的发生与流行 | 第13-14页 |
·猪细小病毒的一般生物学特性 | 第14页 |
·猪细小病毒分子生物学 | 第14-16页 |
·猪细小病毒VP2基因及其编码蛋白的功能研究 | 第16-17页 |
·猪细小病毒VP2基因及其编码蛋白的应用研究 | 第17-20页 |
3 猪乙型脑炎病毒病概述 | 第20-26页 |
·猪乙型脑炎病毒病的发生与流行 | 第20页 |
·猪乙型脑炎病毒的一般生物学特性 | 第20-21页 |
·猪乙型脑炎病毒的分类和基因分型 | 第21页 |
·猪乙型脑炎病毒的分子生物学 | 第21-23页 |
·猪乙型脑炎病毒E基因及编码蛋白的研究进展 | 第23-26页 |
4 实验目的及意义 | 第26-27页 |
第二章 猪IFN-a与PPV VP2-JEV E共表达基因疫苗的构建及免疫原性的研究 | 第27-55页 |
1 材料 | 第27-28页 |
·实验材料 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
2 试验方法 | 第28-39页 |
·IFN-a基因的分子克隆与序列测定 | 第28-30页 |
·IFN-a基因的引物设计及合成 | 第28页 |
·基因组DNA的提取 | 第28页 |
·IFN-a基因的PCR | 第28-29页 |
·目的基因的回收 | 第29页 |
·IFN-a基因的克隆及鉴定 | 第29-30页 |
·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2的构建 | 第30-34页 |
·质粒PcDNA3.1-E-VP2的鉴定 | 第30-32页 |
·质粒pMD-IFNa和PcDNA3.1-E-VP2的酶切片段回收 | 第32页 |
·连接及转化 | 第32-33页 |
·重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2免疫原性研究 | 第34-39页 |
·质粒DNA的大量抽提与纯化 | 第34-35页 |
·质粒DNA的免疫 | 第35-36页 |
·血样的采集 | 第36页 |
·淋巴细胞数量的动态变化检测 | 第36页 |
·MTT淋巴细胞增殖转化实验 | 第36-37页 |
·PPV抗体检测 | 第37-38页 |
·JEV抗体检测 | 第38-39页 |
3. 结果与分析 | 第39-49页 |
·IFN-a基因的分子克隆与序列测定 | 第39-41页 |
·IFN-a基因的PCR扩增 | 第39页 |
·IFN-a克隆重组质粒的PCR及酶切鉴定 | 第39-40页 |
·IFN-a克隆重组质粒的序列测定 | 第40-41页 |
·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2的构建 | 第41-44页 |
·质粒PcDNA3.1-E-VP2的鉴定 | 第41-42页 |
·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2的鉴定 | 第42-44页 |
·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2免疫原性研究 | 第44-49页 |
·质粒免疫小鼠的临床表现 | 第44页 |
·淋巴细胞数量的动态变化检测 | 第44-46页 |
·MTT淋巴细胞增殖转化实验 | 第46页 |
·PPV抗体检测 | 第46-47页 |
·JEV抗体检测 | 第47-49页 |
4. 讨论 | 第49-54页 |
·IFNa基因的克隆 | 第49页 |
·病毒免疫原性基因的选择 | 第49-50页 |
·重组质粒的构建 | 第50-51页 |
·实验动物模型的选择 | 第51页 |
·MTT法测定淋巴细胞增殖转化 | 第51页 |
·重组质粒的免疫原性 | 第51-52页 |
·IFNa的免疫增强效应 | 第52-53页 |
·实验不足和展望 | 第53-54页 |
5. 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |