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猪IFN-α基因与PPV VP2-JEV E共表达基因疫苗的构建及免疫原性的研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 文献综述第7-27页
 1 猪a干扰素概述第7-13页
   ·IFN的发现及命名第7页
   ·IFN的产生与分类第7-8页
   ·IFNa的基因及分子结构第8-9页
   ·IFNa的理化特性第9页
   ·IFNa的生物学活性和作用机理第9-12页
   ·IFNa的研究进展及应用第12-13页
 2 猪细小病毒病概述第13-20页
   ·猪细小病毒病的发生与流行第13-14页
   ·猪细小病毒的一般生物学特性第14页
   ·猪细小病毒分子生物学第14-16页
   ·猪细小病毒VP2基因及其编码蛋白的功能研究第16-17页
   ·猪细小病毒VP2基因及其编码蛋白的应用研究第17-20页
 3 猪乙型脑炎病毒病概述第20-26页
   ·猪乙型脑炎病毒病的发生与流行第20页
   ·猪乙型脑炎病毒的一般生物学特性第20-21页
   ·猪乙型脑炎病毒的分类和基因分型第21页
   ·猪乙型脑炎病毒的分子生物学第21-23页
   ·猪乙型脑炎病毒E基因及编码蛋白的研究进展第23-26页
 4 实验目的及意义第26-27页
第二章 猪IFN-a与PPV VP2-JEV E共表达基因疫苗的构建及免疫原性的研究第27-55页
 1 材料第27-28页
   ·实验材料第27页
   ·主要仪器第27-28页
 2 试验方法第28-39页
   ·IFN-a基因的分子克隆与序列测定第28-30页
     ·IFN-a基因的引物设计及合成第28页
     ·基因组DNA的提取第28页
     ·IFN-a基因的PCR第28-29页
     ·目的基因的回收第29页
     ·IFN-a基因的克隆及鉴定第29-30页
   ·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2的构建第30-34页
     ·质粒PcDNA3.1-E-VP2的鉴定第30-32页
     ·质粒pMD-IFNa和PcDNA3.1-E-VP2的酶切片段回收第32页
     ·连接及转化第32-33页
     ·重组质粒的鉴定第33-34页
   ·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2免疫原性研究第34-39页
     ·质粒DNA的大量抽提与纯化第34-35页
     ·质粒DNA的免疫第35-36页
     ·血样的采集第36页
     ·淋巴细胞数量的动态变化检测第36页
     ·MTT淋巴细胞增殖转化实验第36-37页
     ·PPV抗体检测第37-38页
     ·JEV抗体检测第38-39页
 3. 结果与分析第39-49页
   ·IFN-a基因的分子克隆与序列测定第39-41页
     ·IFN-a基因的PCR扩增第39页
     ·IFN-a克隆重组质粒的PCR及酶切鉴定第39-40页
     ·IFN-a克隆重组质粒的序列测定第40-41页
   ·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2的构建第41-44页
     ·质粒PcDNA3.1-E-VP2的鉴定第41-42页
     ·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2的鉴定第42-44页
   ·重组质粒PcDNA3.1-IFNa-E-VP2免疫原性研究第44-49页
     ·质粒免疫小鼠的临床表现第44页
     ·淋巴细胞数量的动态变化检测第44-46页
     ·MTT淋巴细胞增殖转化实验第46页
     ·PPV抗体检测第46-47页
     ·JEV抗体检测第47-49页
 4. 讨论第49-54页
   ·IFNa基因的克隆第49页
   ·病毒免疫原性基因的选择第49-50页
   ·重组质粒的构建第50-51页
   ·实验动物模型的选择第51页
   ·MTT法测定淋巴细胞增殖转化第51页
   ·重组质粒的免疫原性第51-52页
   ·IFNa的免疫增强效应第52-53页
   ·实验不足和展望第53-54页
 5. 结论第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61页

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