| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 符号说明 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 1 研究背景、基础和目的意义 | 第9-10页 |
| 2 主要研究内容 | 第10页 |
| 3 拟解决的问题 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 分类 | 第12页 |
| 2 形态结构 | 第12-14页 |
| 3 理化学特性 | 第14页 |
| 4 核酸和基因组结构及其作用 | 第14-17页 |
| 5 ENTV与JSRV/ERVs | 第17页 |
| 6 病原性及其致病机制 | 第17-20页 |
| 7 生态学及其诊断 | 第20-21页 |
| 8 培养 | 第21-22页 |
| 第二章 山羊地方性鼻内腺瘤病毒ENTV cDNA文库的构建及基因组解读 | 第22-46页 |
| 1 材料与方法 | 第22-32页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·病毒、菌株及克隆载体 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·生物信息学相关软件与资源 | 第24页 |
| ·引物一览表 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-32页 |
| ·引物设计 | 第24-25页 |
| ·病毒样品的纯化 | 第25页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·病毒基因组的RT-PCR分段扩增 | 第26-29页 |
| ·病毒各基因扩增产物的TA克隆 | 第29-31页 |
| ·各基因片段的重组质粒的初步鉴定 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-42页 |
| ·病毒基因组的RT-PCR分段扩增 | 第33页 |
| ·病毒cDNA文库的构建 | 第33-42页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第34-35页 |
| ·ENTV全基因的拼接及序列解读 | 第35-40页 |
| ·ENTV的系统发育 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| ·山羊地方性鼻内腺瘤病毒ENTV全基因组cDNA克隆策略的探讨 | 第42-43页 |
| ·国内首次报道山羊ENTV的全序列 | 第43页 |
| ·ENTV与JSRV及ERVs | 第43-44页 |
| 4 小结 | 第44-46页 |
| 第三章 山羊地方性鼻内肿瘤病毒ENTV功能基因的分子克隆及初步表达研究 | 第46-66页 |
| 1 材料与方法 | 第46-55页 |
| ·材料 | 第46-48页 |
| ·基因、菌株及载体 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-48页 |
| ·主要仪器设备 | 第48页 |
| ·引物一览表 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-55页 |
| ·ENTV gag、env、SU、TM、SD编码区的分子克隆 | 第48-49页 |
| ·pET-gag原核重组表达载体的构建 | 第49-51页 |
| ·pET-gag重组原核表达质粒的诱导表达及检测 | 第51-53页 |
| ·pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM、pEGFP-SD重组表达质粒的构建 | 第53页 |
| ·pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM、pEGFP-SD重组质粒的真核表达 | 第53-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-62页 |
| ·重组克隆质粒pMD-gag、pMD-env、pMD-SU、pMD-TM、pMD-SD的鉴定 | 第55-57页 |
| ·pMD-gag、pMD-env、pMD-SU、pMD-TM、pMD-SD质粒PCR鉴定 | 第55-56页 |
| ·pMD-env、pMD-SU、pMD-TM、pMD-SD质粒酶切鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组原核表达载体pET-gag的鉴定 | 第57-58页 |
| ·pET-gag质粒PCR鉴定 | 第57-58页 |
| ·pET-gag质粒酶切鉴定 | 第58页 |
| ·pET-gag的诱导表达 | 第58-59页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第58-59页 |
| ·重组gag蛋白与患羊血清的酶联免疫反应 | 第59页 |
| ·重组表达质粒pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM、pEGFP-SD的鉴定 | 第59-61页 |
| ·pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM、pEGFP-SD质粒PCR鉴定 | 第59-60页 |
| ·pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM、pEGFP-SD质粒酶切鉴定 | 第60-61页 |
| ·重组表达质粒pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM、pEGFP-SD的转染 | 第61-62页 |
| ·pEGFP-env、pEGFP-SU、pEGFP-TM、pEGFP-SD转录子的RT-PCR检测 | 第62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| ·关于gag的功能 | 第62-63页 |
| ·关于env的功能 | 第63-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第75页 |
