| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 引言 | 第11-24页 |
| 1.1 盐胁迫对植物的危害 | 第11页 |
| 1.2 植物耐盐机理研究 | 第11-12页 |
| 1.3 盐胁迫应答调控网络 | 第12-15页 |
| 1.3.1 MAPK信号路径 | 第12-13页 |
| 1.3.2 Ca~(2+)介导的信号转导路径 | 第13-15页 |
| 1.3.3 ABA信号路径 | 第15页 |
| 1.4 植物耐盐基因 | 第15-23页 |
| 1.4.1 SnRK2激酶家族 | 第16-17页 |
| 1.4.2 CIPK激酶家族 | 第17-19页 |
| 1.4.3 CDPK激酶家族 | 第19-20页 |
| 1.4.4 C2H2类转录因子 | 第20-21页 |
| 1.4.5 WRKY类转录因子 | 第21-23页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 GhSnRK2.6基因克隆、家族分析及抗逆性研究 | 第24-48页 |
| 2.1 材料和方法 | 第24-30页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 植物材料培养与处理 | 第24-25页 |
| 2.1.3 载体与菌种 | 第25页 |
| 2.1.4 试验试剂与试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.5 试验所用仪器 | 第25页 |
| 2.1.6 棉花基因组DNA和总RNA提取 | 第25页 |
| 2.1.7 拟南芥基因组DNA和总RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.1.8 消化总RNA中基因组DNA及反转录 | 第26页 |
| 2.1.9 试验所需试剂和培养基配制 | 第26页 |
| 2.1.10 基因测序、拼接及基因组分析 | 第26页 |
| 2.1.11 载体构建 | 第26-27页 |
| 2.1.12 遗传转化 | 第27-28页 |
| 2.1.13 所用引物 | 第28-30页 |
| 2.2 结果与分析 | 第30-47页 |
| 2.2.1 基因全长克隆与生物信息学分析 | 第30-32页 |
| 2.2.2 亚细胞定位分析 | 第32-33页 |
| 2.2.3 转基因拟南芥与棉花获得与筛选 | 第33-35页 |
| 2.2.4 转基因拟南芥与转基因棉花耐盐性分析 | 第35-39页 |
| 2.2.5 不同棉种中SnRK2家族分析 | 第39-47页 |
| 2.3 小结 | 第47-48页 |
| 2.3.1 GhSnRK2.6过表达可提高转基因植株耐盐性 | 第47页 |
| 2.3.2 不同棉种中SnRK2家族基因具有高度保守性 | 第47页 |
| 2.3.3 GhSnRK2家族基因均参与盐胁迫应答过程 | 第47-48页 |
| 第三章 GhCIPK6参与棉花抗逆性的研究 | 第48-66页 |
| 3.1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 3.1.2 植物材料培养与处理 | 第48页 |
| 3.1.3 载体与菌种 | 第48页 |
| 3.1.4 试验试剂、试剂盒及所用仪器 | 第48页 |
| 3.1.5 棉花基因组DNA和总RNA提取 | 第48页 |
| 3.1.6 总RNA中基因组DNA消化及反转录 | 第48页 |
| 3.1.7 基因测序、拼接及分析 | 第48页 |
| 3.1.8 瞬时表达载体构建 | 第48-49页 |
| 3.1.9 遗传转化 | 第49页 |
| 3.1.10 所用引物 | 第49-50页 |
| 3.2 结果与分析 | 第50-64页 |
| 3.2.1 GhCIPK6瞬时表达载体构建及亚细胞定位分析 | 第50-51页 |
| 3.2.2 GhCIPK6与GhCBLs互作载体构建及BiFC分析 | 第51-52页 |
| 3.2.3 GhCIPK6转基因棉花耐盐性分析 | 第52-62页 |
| 3.2.4 GhCIPK6在棉花基因组中分析 | 第62-64页 |
| 3.3 小结 | 第64-66页 |
| 3.3.1 GhCIPK6通过维持细胞膜稳定提高转基因棉花耐盐性 | 第64-65页 |
| 3.3.2 GhCIPK6可能参与到多种胁迫应答路径中 | 第65页 |
| 3.3.3 GhCIPK6存在多个同源基因,功能可能存在一定差异 | 第65-66页 |
| 第四章 GhC2H2、GhCPK5与GhWRKY41转基因棉花获得及耐盐分析 | 第66-81页 |
| 4.1 材料与方法 | 第66-67页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第66页 |
| 4.1.2 植物材料培养与处理 | 第66页 |
| 4.1.3 瞬时表达载体载体构建 | 第66页 |
| 4.1.4 所用引物 | 第66-67页 |
| 4.2 结果与分析 | 第67-79页 |
| 4.2.1 GhC2H2转基因分析 | 第67-71页 |
| 4.2.2 GhCPK5转基因分析 | 第71-75页 |
| 4.2.3 GhWRKY41转基因分析 | 第75-79页 |
| 4.3 小结 | 第79-81页 |
| 4.3.1 GhC2H2可提高棉花耐盐性 | 第79-80页 |
| 4.3.2 GhCPK5可提高转基因棉花耐盐性 | 第80页 |
| 4.3.3 GhWRKY41可提高耐旱性与耐盐性 | 第80-81页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第81-84页 |
| 5.1 讨论 | 第81-82页 |
| 5.2 结论及展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-100页 |
| 致谢 | 第100-102页 |
| 附录 | 第102-128页 |
| 附录Ⅰ GhSnRK2s基因mRNA全长序列 | 第102-108页 |
| 附录Ⅱ GhSnRK2s基因DNA编码区序列 | 第108-124页 |
| 附录Ⅲ GhSnRK2s蛋白质氨基酸序列 | 第124-126页 |
| 附录Ⅳ 2014年GhC2H2转基因株系盐碱地生长情况 | 第126-128页 |
| 个人简介 | 第128-129页 |
