前言 | 第4-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
英文缩写词 | 第18-19页 |
第1章 绪论 | 第19-21页 |
第2章 文献综述 | 第21-31页 |
2.1 胶质瘤治疗的现状 | 第21-23页 |
2.1.1 手术治疗 | 第21-22页 |
2.1.2 化学药物治疗 | 第22页 |
2.1.3 放射治疗 | 第22-23页 |
2.1.4 其他治疗 | 第23页 |
2.2 PARP-1 依赖的Parthanatos | 第23-27页 |
2.2.1 PARP-1 | 第24-25页 |
2.2.2 PAR | 第25-26页 |
2.2.3 AIF | 第26-27页 |
2.3 JNK | 第27-29页 |
2.4 ROS | 第29页 |
2.5 ROS、JNK与Parthanatos研究现状 | 第29-31页 |
第3章 实验材料与方法 | 第31-51页 |
3.1 主要器材与试剂 | 第31-34页 |
3.1.1 主要实验器材 | 第31-32页 |
3.1.2 主要实验试剂 | 第32-34页 |
3.2 细胞系及细胞培养 | 第34页 |
3.3 实验液体及配制方法 | 第34-35页 |
3.4 细胞复苏、传代及冻存 | 第35-36页 |
3.5 实验技术 | 第36-51页 |
3.5.1 MTT法检测细胞生存活性 | 第36-37页 |
3.5.2 乳酸脱氢酶释放细胞死亡实验 | 第37-38页 |
3.5.3 流式细胞术评估细胞死亡和检测线粒体膜电位 | 第38-41页 |
3.5.4 细胞内ROS水平和线粒体过氧化物检测 | 第41-42页 |
3.5.5 免疫细胞化学染色 | 第42-43页 |
3.5.6 小干扰RNA转染(si RNA) | 第43-44页 |
3.5.7 凝胶电泳和免疫蛋白印迹法 | 第44-49页 |
3.5.8 统计学分析 | 第49-51页 |
第4章 实验结果 | 第51-85页 |
4.1 H_2O_2诱导胶质瘤细胞死亡 | 第51-53页 |
4.1.1 MTT法检测H_2O_2作用的胶质瘤细胞生存活性变化 | 第51-52页 |
4.1.2 LDH法检测H_2O_2导致胶质瘤细胞死亡 | 第52-53页 |
4.2 H_2O_2诱导胶质瘤细胞Parthanatos | 第53-66页 |
4.2.1 免疫蛋白印迹法检测胶质瘤细胞PAR聚合物、PARP-1、AIF表达变化 | 第53-57页 |
4.2.2 荧光显微镜观察免疫细胞化学染色后胶质瘤细胞AIF胞浆、胞核的变化 | 第57页 |
4.2.3 流式细胞术检测胶质瘤细胞线立体膜电位的变化 | 第57-58页 |
4.2.4 3AB预处理后MTT法检测胶质瘤细胞生存活性变化 | 第58-59页 |
4.2.5 3AB预处理后流式细胞术检测胶质瘤细胞存活率变化 | 第59-60页 |
4.2.6 3AB预处理后免疫蛋白印迹法检测胶质瘤细胞PAR聚合物、PARP-1、AIF的变化 | 第60-61页 |
4.2.7 3AB预处理后流式细胞术检测线立体膜电位的变化 | 第61-62页 |
4.2.8 PARP-1 Si RNA转染后免疫蛋白印迹检测细胞内PARP-1、PAR聚合物、AIF的变化 | 第62-64页 |
4.2.9 PARP-1 Si RNA转染后MTT法检测胶质瘤细胞生存活性变化 | 第64-65页 |
4.2.10 PARP-1 Si RNA转染后流式细胞术检测胶质瘤细胞存活率变化 | 第65-66页 |
4.3 细胞内的ROS有助于胶质瘤细胞Parthanatos | 第66-74页 |
4.3.1 DCFH- DA染色后观察H_2O_2作用的胶质瘤细胞荧光亮度变化 | 第66-67页 |
4.3.2 荧光密度统计分析H_2O_2作用的胶质瘤细胞内ROS水平变化 | 第67-68页 |
4.3.3 Mito SOX探针染色后观察H_2O_2作用的胶质瘤细胞荧光亮度变化 | 第68页 |
4.3.4 荧光密度统计分析H_2O_2作用的胶质瘤细胞内线粒体过氧化物变化 | 第68-69页 |
4.3.5 NAC预处理后荧光密度分析胶质瘤细胞内ROS的水平变化 | 第69-70页 |
4.3.6 NAC预处理后MTT法检测胶质瘤细胞生存活性变化 | 第70页 |
4.3.7 NAC预处理后流式细胞术检测胶质瘤细胞存活率变化 | 第70-72页 |
4.3.8 NAC预处理后免疫蛋白印迹法检测胶质瘤细胞内PARP-1、PAR聚合物、AIF的变化 | 第72-73页 |
4.3.9 NAC预处理后流式细胞术检测胶质瘤细胞内线粒体膜电位变化 | 第73-74页 |
4.4 ROS激活JNK调节胶质瘤细胞Parthanatos | 第74-83页 |
4.4.1 免疫蛋白印迹法检测H_2O_2作用的胶质瘤细胞JNK磷酸化水平的变化 | 第74-75页 |
4.4.2 NAC预处理后免疫蛋白印迹法检测细胞内JNK磷酸化水平的变化 | 第75-76页 |
4.4.3 SP600125预处理后免疫蛋白印迹法检测细胞内JNK磷酸化水平的变化 | 第76-77页 |
4.4.4 SP600125预处理后MTT法检测胶质瘤细胞生存活性的变化 | 第77-78页 |
4.4.5 SP600125预处理后流式细胞术检测胶质瘤细胞存活率的变化 | 第78-79页 |
4.4.6 SP600125预处理后免疫蛋白印迹法检测胶质瘤细胞内PARP-1、PAR聚合物和AIF的变化 | 第79-80页 |
4.4.7 JNK Si RNA转染后免疫蛋白印迹法检胶质瘤细胞内JNK磷酸化水平变化 | 第80-81页 |
4.4.8 JNK Si RNA转染后免疫蛋白印迹检测胶质瘤细胞PARP-1、PAR聚合物和AIF的变化 | 第81-83页 |
4.5 JNK通过调节线粒体过氧化物调节细胞内ROS水平 | 第83-85页 |
4.5.1 SP600125预处理后胶质瘤细胞内ROS水平变化 | 第83-84页 |
4.5.2 SP600125预处理后胶质瘤细胞内线粒体过氧化物变化 | 第84-85页 |
第5章 讨论 | 第85-91页 |
第6章 结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-111页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第111-113页 |
致谢 | 第113页 |