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JNK在氧化应激导致胶质瘤细胞Parthanatos中的作用及机制研究

前言第4-7页
中文摘要第7-10页
Abstract第10-13页
英文缩写词第18-19页
第1章 绪论第19-21页
第2章 文献综述第21-31页
    2.1 胶质瘤治疗的现状第21-23页
        2.1.1 手术治疗第21-22页
        2.1.2 化学药物治疗第22页
        2.1.3 放射治疗第22-23页
        2.1.4 其他治疗第23页
    2.2 PARP-1 依赖的Parthanatos第23-27页
        2.2.1 PARP-1第24-25页
        2.2.2 PAR第25-26页
        2.2.3 AIF第26-27页
    2.3 JNK第27-29页
    2.4 ROS第29页
    2.5 ROS、JNK与Parthanatos研究现状第29-31页
第3章 实验材料与方法第31-51页
    3.1 主要器材与试剂第31-34页
        3.1.1 主要实验器材第31-32页
        3.1.2 主要实验试剂第32-34页
    3.2 细胞系及细胞培养第34页
    3.3 实验液体及配制方法第34-35页
    3.4 细胞复苏、传代及冻存第35-36页
    3.5 实验技术第36-51页
        3.5.1 MTT法检测细胞生存活性第36-37页
        3.5.2 乳酸脱氢酶释放细胞死亡实验第37-38页
        3.5.3 流式细胞术评估细胞死亡和检测线粒体膜电位第38-41页
        3.5.4 细胞内ROS水平和线粒体过氧化物检测第41-42页
        3.5.5 免疫细胞化学染色第42-43页
        3.5.6 小干扰RNA转染(si RNA)第43-44页
        3.5.7 凝胶电泳和免疫蛋白印迹法第44-49页
        3.5.8 统计学分析第49-51页
第4章 实验结果第51-85页
    4.1 H_2O_2诱导胶质瘤细胞死亡第51-53页
        4.1.1 MTT法检测H_2O_2作用的胶质瘤细胞生存活性变化第51-52页
        4.1.2 LDH法检测H_2O_2导致胶质瘤细胞死亡第52-53页
    4.2 H_2O_2诱导胶质瘤细胞Parthanatos第53-66页
        4.2.1 免疫蛋白印迹法检测胶质瘤细胞PAR聚合物、PARP-1、AIF表达变化第53-57页
        4.2.2 荧光显微镜观察免疫细胞化学染色后胶质瘤细胞AIF胞浆、胞核的变化第57页
        4.2.3 流式细胞术检测胶质瘤细胞线立体膜电位的变化第57-58页
        4.2.4 3AB预处理后MTT法检测胶质瘤细胞生存活性变化第58-59页
        4.2.5 3AB预处理后流式细胞术检测胶质瘤细胞存活率变化第59-60页
        4.2.6 3AB预处理后免疫蛋白印迹法检测胶质瘤细胞PAR聚合物、PARP-1、AIF的变化第60-61页
        4.2.7 3AB预处理后流式细胞术检测线立体膜电位的变化第61-62页
        4.2.8 PARP-1 Si RNA转染后免疫蛋白印迹检测细胞内PARP-1、PAR聚合物、AIF的变化第62-64页
        4.2.9 PARP-1 Si RNA转染后MTT法检测胶质瘤细胞生存活性变化第64-65页
        4.2.10 PARP-1 Si RNA转染后流式细胞术检测胶质瘤细胞存活率变化第65-66页
    4.3 细胞内的ROS有助于胶质瘤细胞Parthanatos第66-74页
        4.3.1 DCFH- DA染色后观察H_2O_2作用的胶质瘤细胞荧光亮度变化第66-67页
        4.3.2 荧光密度统计分析H_2O_2作用的胶质瘤细胞内ROS水平变化第67-68页
        4.3.3 Mito SOX探针染色后观察H_2O_2作用的胶质瘤细胞荧光亮度变化第68页
        4.3.4 荧光密度统计分析H_2O_2作用的胶质瘤细胞内线粒体过氧化物变化第68-69页
        4.3.5 NAC预处理后荧光密度分析胶质瘤细胞内ROS的水平变化第69-70页
        4.3.6 NAC预处理后MTT法检测胶质瘤细胞生存活性变化第70页
        4.3.7 NAC预处理后流式细胞术检测胶质瘤细胞存活率变化第70-72页
        4.3.8 NAC预处理后免疫蛋白印迹法检测胶质瘤细胞内PARP-1、PAR聚合物、AIF的变化第72-73页
        4.3.9 NAC预处理后流式细胞术检测胶质瘤细胞内线粒体膜电位变化第73-74页
    4.4 ROS激活JNK调节胶质瘤细胞Parthanatos第74-83页
        4.4.1 免疫蛋白印迹法检测H_2O_2作用的胶质瘤细胞JNK磷酸化水平的变化第74-75页
        4.4.2 NAC预处理后免疫蛋白印迹法检测细胞内JNK磷酸化水平的变化第75-76页
        4.4.3 SP600125预处理后免疫蛋白印迹法检测细胞内JNK磷酸化水平的变化第76-77页
        4.4.4 SP600125预处理后MTT法检测胶质瘤细胞生存活性的变化第77-78页
        4.4.5 SP600125预处理后流式细胞术检测胶质瘤细胞存活率的变化第78-79页
        4.4.6 SP600125预处理后免疫蛋白印迹法检测胶质瘤细胞内PARP-1、PAR聚合物和AIF的变化第79-80页
        4.4.7 JNK Si RNA转染后免疫蛋白印迹法检胶质瘤细胞内JNK磷酸化水平变化第80-81页
        4.4.8 JNK Si RNA转染后免疫蛋白印迹检测胶质瘤细胞PARP-1、PAR聚合物和AIF的变化第81-83页
    4.5 JNK通过调节线粒体过氧化物调节细胞内ROS水平第83-85页
        4.5.1 SP600125预处理后胶质瘤细胞内ROS水平变化第83-84页
        4.5.2 SP600125预处理后胶质瘤细胞内线粒体过氧化物变化第84-85页
第5章 讨论第85-91页
第6章 结论第91-93页
参考文献第93-111页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第111-113页
致谢第113页

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