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中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1功能分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 文献综述第14-19页
   ·植物抗病相关转录因子研究进展第14-17页
     ·bZIP 类转录因子第14-15页
     ·AP2/EREBP 类转录因子第15页
     ·MYB 类转录因子第15-16页
     ·WRKY 类转录因子第16页
     ·NAC 类转录因子第16-17页
     ·Whirly 转录因子第17页
   ·研究目的与意义第17-19页
第二章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 的序列分析第19-23页
   ·材料与方法第19页
     ·VpRFP1 cDNA 序列和蛋白质序列BLAST 分析第19页
     ·核定位信号分析第19页
     ·保守结构域分析第19页
     ·多序列比对分析第19页
     ·基因定位定位和进化树分析第19页
   ·结果与分析第19-21页
     ·基因结构与定位分析第19-20页
     ·多序列比对与进化树分析第20-21页
   ·讨论第21-23页
第三章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 在大肠杆菌中的表达、纯化及多克隆抗体的制备第23-32页
   ·材料与方法第23-26页
     ·材料第23页
     ·方法第23-26页
   ·结果与分析第26-31页
     ·PCR 获得VpRFP1 基因的开放阅读框(ORF)序列第26页
     ·转录因子基因VpRFP1 原核表达载体的构建第26-27页
     ·转录因子VpRFP1 融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达第27-28页
     ·转录因子VpRFP1 融合蛋白表达形式的确定第28页
     ·转录因子VpRFP1 融合蛋白表达条件的优化第28-30页
     ·转录因子VpRFP1 融合蛋白的纯化第30-31页
     ·转录因子VpRFP1 多克隆抗血清的Western Blot 检测第31页
   ·讨论第31-32页
第四章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 表达模式分析第32-36页
   ·材料与方法第32-34页
     ·材料第32页
     ·方法第32-34页
   ·结果与分析第34-35页
     ·实时荧光定量PCR 检测葡萄叶片经病原菌诱导后VpRFP1 的表达变化第34页
     ·Western Blot 检测葡萄叶片经病原菌诱导后VpRFP1 的表达变化第34-35页
   ·讨论第35-36页
第五章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 的免疫亚细胞定位分析第36-38页
   ·材料与方法第36页
     ·试验材料第36页
     ·试验方法第36页
   ·结果与分析第36-37页
   ·讨论第37-38页
第六章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 的转录激活分析第38-44页
   ·材料与方法第38-40页
     ·试验材料第38-39页
     ·试验方法第39-40页
   ·结果与分析第40-43页
     ·中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因 VpRFP1 不同缺失片段的克隆第40-41页
     ·中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 不同缺失片段转录激活载体构建第41-42页
     ·中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 不同缺失片段的转录激活分析第42-43页
   ·讨论第43-44页
第七章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 在拟南芥中的过量表达第44-51页
   ·材料与方法第44-46页
     ·试验材料第44页
     ·试验方法第44-46页
   ·结果与分析第46-49页
     ·中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因 VpRFP1 过量表达载体的构建第46-47页
     ·转基因拟南芥T2 代的PCR-Southern Blot 检测第47页
     ·转基因拟南芥T2 代的Western Blot 检测第47-48页
     ·转基因拟南芥对白粉病的抗病性鉴定第48-49页
     ·转基因拟南芥对P. syringae pv. tomato DC3000 的抗病性鉴定第49页
   ·讨论第49-51页
第八章 利用VIGS 技术在番茄中干扰VpRFP1 的同源基因第51-59页
   ·材料与方法第51-52页
     ·试验材料第51页
     ·试验方法第51-52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·VIGS 载体构建第52-55页
     ·RT-PCR 检测转化植株的病毒分子第55-56页
     ·PCR-Southern 检测转化植株的病毒分子第56页
     ·目的基因干扰效果的检测第56-57页
     ·VIGS 干扰LeRFL1 后番茄抗病性鉴定第57页
     ·VIGS 干扰LeRFL1 后番茄中抗病相关基因的表达第57-58页
   ·讨论第58-59页
第九章 结论第59-60页
参考文献第60-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页

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