摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-19页 |
·植物抗病相关转录因子研究进展 | 第14-17页 |
·bZIP 类转录因子 | 第14-15页 |
·AP2/EREBP 类转录因子 | 第15页 |
·MYB 类转录因子 | 第15-16页 |
·WRKY 类转录因子 | 第16页 |
·NAC 类转录因子 | 第16-17页 |
·Whirly 转录因子 | 第17页 |
·研究目的与意义 | 第17-19页 |
第二章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 的序列分析 | 第19-23页 |
·材料与方法 | 第19页 |
·VpRFP1 cDNA 序列和蛋白质序列BLAST 分析 | 第19页 |
·核定位信号分析 | 第19页 |
·保守结构域分析 | 第19页 |
·多序列比对分析 | 第19页 |
·基因定位定位和进化树分析 | 第19页 |
·结果与分析 | 第19-21页 |
·基因结构与定位分析 | 第19-20页 |
·多序列比对与进化树分析 | 第20-21页 |
·讨论 | 第21-23页 |
第三章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 在大肠杆菌中的表达、纯化及多克隆抗体的制备 | 第23-32页 |
·材料与方法 | 第23-26页 |
·材料 | 第23页 |
·方法 | 第23-26页 |
·结果与分析 | 第26-31页 |
·PCR 获得VpRFP1 基因的开放阅读框(ORF)序列 | 第26页 |
·转录因子基因VpRFP1 原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
·转录因子VpRFP1 融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第27-28页 |
·转录因子VpRFP1 融合蛋白表达形式的确定 | 第28页 |
·转录因子VpRFP1 融合蛋白表达条件的优化 | 第28-30页 |
·转录因子VpRFP1 融合蛋白的纯化 | 第30-31页 |
·转录因子VpRFP1 多克隆抗血清的Western Blot 检测 | 第31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
第四章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 表达模式分析 | 第32-36页 |
·材料与方法 | 第32-34页 |
·材料 | 第32页 |
·方法 | 第32-34页 |
·结果与分析 | 第34-35页 |
·实时荧光定量PCR 检测葡萄叶片经病原菌诱导后VpRFP1 的表达变化 | 第34页 |
·Western Blot 检测葡萄叶片经病原菌诱导后VpRFP1 的表达变化 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
第五章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 的免疫亚细胞定位分析 | 第36-38页 |
·材料与方法 | 第36页 |
·试验材料 | 第36页 |
·试验方法 | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
第六章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 的转录激活分析 | 第38-44页 |
·材料与方法 | 第38-40页 |
·试验材料 | 第38-39页 |
·试验方法 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-43页 |
·中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因 VpRFP1 不同缺失片段的克隆 | 第40-41页 |
·中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 不同缺失片段转录激活载体构建 | 第41-42页 |
·中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 不同缺失片段的转录激活分析 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
第七章 中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1 在拟南芥中的过量表达 | 第44-51页 |
·材料与方法 | 第44-46页 |
·试验材料 | 第44页 |
·试验方法 | 第44-46页 |
·结果与分析 | 第46-49页 |
·中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因 VpRFP1 过量表达载体的构建 | 第46-47页 |
·转基因拟南芥T2 代的PCR-Southern Blot 检测 | 第47页 |
·转基因拟南芥T2 代的Western Blot 检测 | 第47-48页 |
·转基因拟南芥对白粉病的抗病性鉴定 | 第48-49页 |
·转基因拟南芥对P. syringae pv. tomato DC3000 的抗病性鉴定 | 第49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
第八章 利用VIGS 技术在番茄中干扰VpRFP1 的同源基因 | 第51-59页 |
·材料与方法 | 第51-52页 |
·试验材料 | 第51页 |
·试验方法 | 第51-52页 |
·结果与分析 | 第52-58页 |
·VIGS 载体构建 | 第52-55页 |
·RT-PCR 检测转化植株的病毒分子 | 第55-56页 |
·PCR-Southern 检测转化植株的病毒分子 | 第56页 |
·目的基因干扰效果的检测 | 第56-57页 |
·VIGS 干扰LeRFL1 后番茄抗病性鉴定 | 第57页 |
·VIGS 干扰LeRFL1 后番茄中抗病相关基因的表达 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
第九章 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68页 |