摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8页 |
英文缩写对照表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
1.1 引言 | 第12-13页 |
1.2 miR-36的研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 miR-36基因簇特征 | 第13页 |
1.2.2 miR-36的进化及序列特征分析 | 第13-14页 |
1.2.3 miR-36研究进展 | 第14-16页 |
1.2.4 小结与展望 | 第16页 |
1.3 DNA疫苗研究进展 | 第16-19页 |
1.3.1 DNA疫苗简介 | 第16-17页 |
1.3.2 DNA疫苗的研究进展 | 第17-19页 |
第二章 Asu-miR-36f抗猪蛔虫幼虫感染的效果评价 | 第19-28页 |
2.1 材料与方法 | 第19-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第19页 |
2.1.2 猪蛔虫三期幼虫的培养 | 第19-20页 |
2.1.3 仪器及试剂 | 第20页 |
2.1.4 培养基的配制 | 第20页 |
2.1.5 感染性虫卵的体外脱壳 | 第20-21页 |
2.1.6 虫卵计数 | 第21页 |
2.1.7 asu-miR-36f模拟物, 抑制剂及其对照溶液的配制 | 第21页 |
2.1.8 浸泡三期幼虫 | 第21页 |
2.1.9 攻虫实验 | 第21页 |
2.1.10 检测asu-miR-36f及OST48和Cyb表达量 | 第21-24页 |
2.2 结果 | 第24-27页 |
2.2.1 猪蛔虫受精卵培养至第三期幼虫 | 第24-25页 |
2.2.2 提RNA纯度检测 | 第25页 |
2.2.3 asu-miR-36f靶基因的荧光定量结果 | 第25-26页 |
2.2.4 统计回收幼虫的数目及长度和宽度结果 | 第26-27页 |
2.3 讨论 | 第27-28页 |
第三章 pVAX -NCS、pVAX-AG的制备及免疫效果评价 | 第28-63页 |
3.1 材料 | 第28-34页 |
3.1.1 实验动物 | 第28页 |
3.1.2 质粒、菌株和细胞 | 第28页 |
3.1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
3.1.4 主要设备及仪器 | 第29页 |
3.1.5 主要溶液配制 | 第29-32页 |
3.1.6 培养基的配制 | 第32-34页 |
3.2 方法 | 第34-48页 |
3.2.1 猪蛔虫总cDNA的获取 | 第34-35页 |
3.2.2 目的基因的原核表达与阳性血清的制备 | 第35-40页 |
3.2.3 目的片段与pVAX1.0 真核表达载体的连接 | 第40-43页 |
3.2.4 重组质粒pVAX-AG、pVAX-NCS的体外表达验证 | 第43-44页 |
3.2.5 pVAX1.0 及重组质粒pVAX-AG、pVAX-NCS的大量制备 | 第44-45页 |
3.2.6 重组质粒的免疫效果评价 | 第45-48页 |
3.3 结果 | 第48-60页 |
3.3.1 AG基因和NCS基因的原核表达 | 第48-53页 |
3.3.2 pVAX-AG、pVAX-NCS重组质粒的构建 | 第53-56页 |
3.3.3 重组质粒pVAX-AG、pVAX-NCS的体外表达验证 | 第56-57页 |
3.3.4 重组质粒的免疫效果评价 | 第57-60页 |
3.4 讨论 | 第60-63页 |
第四章 全文总结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71-72页 |